膀胱癌组织中Fas和Bcl-2基因的表达及意义

山东医药 2000年第11期第40卷 论著

作者：夏庆华　许纯孝　尉立京　劳平　王春霞

单位：山东省立医院250021

关键词：膀胱肿瘤　Fas基因　Bcl-2基因

　　摘要　采用免疫组化SABC法检测了42例膀胱移行细胞癌患者癌组织标本中Fas和Bcl-2基因的表达情况，并观察其与病理分级、临床分期及预后的关系。结果显示，Fas基因表达与膀胱移行细胞癌的病理分级、临床分期及是否复发有显著关系，Bcl-2基因表达与临床分期及是否复发有关。认为Fas和Bcl-2基因表达可以作为监测膀胱移行细胞癌恶性程度、预测复发的重要指标。在低分化和晚期膀胱移行细胞癌中，Fas基因介导的细胞凋亡可能被Bcl-2基因的过度表达所抑制。

　　abstract Immunohistochemical method was used to determine the expression of Fas and Bcl-2 gene on 42 cases of bladder transitional cell cancer.Results showed Fas and Bcl-2 expression correlated with histological grade，clinicl stage and recurrence rate.It is concluded that the expression of Fas and Bcl-2 might have a practical significance in assessing the malignancy and recurrence of bladder cancer.Overexpression of Bcl-2 in bladder transitional cell cancer resulted in a partial inhibition of Fas-induced cell death.

　　Key words Bladder neoplasms Fas gene Bcl-2 gene

　　Fas分子是近年发现的细胞凋亡信号受体，广泛表达于正常组织及多种肿瘤细胞上，当与其特异性配体结合后，可以传导凋亡信号，诱导Fas所在细胞的凋亡；Bcl-2是抑制凋亡的基因。我们采用免疫组织化学方法对42例膀胱移行细胞癌患者癌组织中Fas和Bcl-2的表达进行了检测，以探讨Fas和Bcl-2表达与肿瘤病理分级、临床分期及预后的关系。

　　1　资料与方法

　　1.1　一般资料　收集1994～1997年有随访结果的42例原发性膀胱移行细胞癌患者的手术切除标本。患者男35例，女7例；年龄28～92岁，平均58岁，随访2～4年。所有病例术前均未作任何治疗，其中4例行膀胱全切术，30例行膀胱部分切除术，8例行经尿道膀胱肿瘤电切术。

　　1.2　方法　将标本经10％福尔马林液固定24小时，常规石蜡包埋。蜡块采用5μm切片，连续切片3张，1份作HE染色以核实诊断，另2份分别作Fas和Bcl-2染色观察。病理分级按WHO分级标准，Ⅰ级9例，Ⅱ级19例，Ⅲ级14例。临床分期按UICC标准，T₁期13例，T₂期23例，T₃期6例。

　　Fas和Bcl-2免疫组化染色试剂盒购自武汉博士德生物工程公司，免疫组化染色采用标准SABC法。Fas及Bcl-2阳性染色为肿瘤细胞膜及胞浆内见棕褐色颗粒，根据癌细胞染色程度、范围和分布不同进行判断，具体标准为：阴性（－）：整个切片未见阳性染色；轻度阳性（＋）：阳性细胞占0～25％；中度阳性（＋＋）：阳性细胞占26％～50％；强阳性（＋＋＋）：阳性细胞占50％以上。

　　1.3　统计方法　Fas和Bcl-2染色结果与肿瘤分级和分期的关系采用X²检验。

　　2　结果

　　2.1　Fas和Bcl-2基因表达与膀胱癌病理分级的关系　见表1。由表1可见，Fas和Bcl-2基因的表达率随肿瘤病理分级的增高而升高，说明肿瘤恶性程度越高，其Fas和Bcl-2的表达越强。膀胱癌Ⅰ级与Ⅱ级、Ⅰ级与Ⅲ级、Ⅰ级与Ⅱ级＋Ⅲ级间Fas表达有显著性差异（P＜0.05）。膀胱癌各病理分级之间Bcl-2的表达无显著性差异（P＞0.05）。

　　2.2　Fas和Bcl-2基因表达与膀胱癌临床分期的关系　见表2。由表2可见，浸润性（T₂～T₃期）膀胱癌的Fas和Bcl-2基因表达明显高于表浅性（T₁期）膀胱癌，T₁期与T₂期＋T₃期两组间比较有极显著性差异（P＜0.01），表明Fas和Bcl-2基因表达越强，肿瘤侵袭力越强。

　　2.3　Fas和Bcl-2基因表达与膀胱癌术后复发的关系　本组有11例膀胱癌术后复发，首次复发间隔时间为8个月至2年，11例均为Fas表达阳性，8例Bcl-2表达阳性。Fas和Bcl-2表达阳性组与未表达组间比较有极显著性差异（P＜0.01）。

　　　表1　Fas和Bcl-2基因表达与膀胱癌病理

　　分级的关系

　　表2　Fas和Bcl-2基因表达与膀胱癌临床

　　分期的关系

　　3　讨论　　　肿瘤形成是多种基因异常参与的复杂过程，如癌基因突变、扩增、重排及抑癌基因失活等。细胞表面的Fas分子是一种凋亡信号受体^［1］，Fas受体可在多种组织中表达，但表达水平差异很大。在许多淋巴系统恶性细胞中Fas表达量极高^［2］，在非淋巴系统恶性肿瘤中许多细胞也有广泛的Fas受体表达^［3，4］。本组42例膀胱移行细胞癌中，有31例Fas表达阳性（占73.8％），在低分化和晚期膀胱癌中，Fas表达强度明显增加（P＜0.05），说明Fas表达可作为监测膀胱癌恶性程度及预测复发的指标。

　　Bcl-2是细胞凋亡调节基因家族中的基本成员，能够抑制细胞凋亡，从而延长表达Bcl-2基因细胞的生长期^［5］。另一方面，由于Bcl-2过度表达，细胞不能发生正常凋亡，故导致肿瘤形成^［6］。Bcl-2主要在生长因子或激素调节的腺上皮细胞表面表达，如前列腺、乳腺和胸腺^［7］。现已发现，大多数人类癌组织和癌前病变组织中有Bcl-2的异常表达。本组结果显示，Bcl-2在膀胱移行上皮细胞癌中也有表达，但各病理分级之间比较差别无显著意义（P＞0.05）。在晚期浸润性膀胱癌中Bcl-2表达率增加明显（P＜0.01），说明Bcl-2基因过度表达有助于肿瘤细胞的生存，并可能导致肿瘤的进展和转移。

　　Fas基因在多种肿瘤组织中呈高表达，但某些高表达Fas受体的组织并不能进行由Fas所介导的细胞凋亡，提示可能存在另外的基因或途径调节Fas系统所引起的生物学作用。Bcl-2高表达可明显延长细胞的生长期，引发肿瘤的形成^［9］，其调节细胞生长的可能机制为：①抑制细胞内质网中钙离子的释放；②调节抗氧化途径，抑制细胞凋亡；③与其它细胞信号传递蛋白相互作用，调控细胞死亡^［10］。已有实验证实，Bcl-2的过度表达能抑制Fas抗体所诱导的细胞凋亡^［2］，而且在Fas系统所介导的细胞凋亡过程中观察到，Bcl-2基因的表达水平首先下调^［10］。本组42例膀胱癌中，在低分化和浸润性膀胱肿瘤中，Fas和Bcl-2基因的表达均增加，提示二者共同参与膀胱移行细胞癌的发生发展，Bcl-2的过度表达抑制了肿瘤细胞进行由Fas系统所介导的细胞凋亡，使带有遗传物质的细胞持续增殖。

　　4　参考文献

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收稿2000-03-09