雄激素受体对前列腺癌内分泌治疗的预后评价

中华核医学杂志 1999年第1期第19卷 临床与实验研究

作者：张勇　桂治宁　王晓波　陈炜　罗则民

单位：张勇　510630　广州,中山医科大学附属第三医院核医学科；桂治宁　中山医科大学实验核医学教研室；王晓波、陈炜　中山医科大学附属第一医院泌尿外科；罗则民　广东省人民医院泌尿外科

　　以阻滞雄激素受体(AR)通道为主的内分泌治疗是晚期前列腺癌(PC)的主要治疗手段之一,但PC患者对内分泌治疗的反应性存在很大差异,目前临床上还不能预测晚期PC的预后。有作者认为癌组织中的AR水平对PC内分泌治疗具有预后判断价值^〔1〕,AR基因突变是导致PC对内分泌治疗产生抵抗性的原因之一^〔2,3〕。笔者采用放射配基结合分析法(RBA)和多聚酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术研究了原发PC组织中的AR表达及AR基因(第8外显子)突变情况,结合随访,对AR与PC内分泌治疗预后的关系作了初步探讨。

　　材料与方法

　　1.标本来源。由中山医科大学附属第一医院泌尿外科提供未经治疗的B超引导经直肠晚期PC穿刺标本12例;另取1例尸解正常前列腺组织作为阴性对照。所有标本均经病理检查和临床资料证实。内分泌治疗包括去势手术加“缓退瘤”。复发的指标包括患者出现局部症状、血清PSA水平升高、原发病灶范围扩大以及影像学检查发现新的转移灶等。

　　2. RBA法测定AR水平。经饱和分析法,选取浓度为5 nmol/L的³H-R1881作为标记配基,采用单点法测量前列腺癌标本中胞浆胞核的AR水平^〔4〕。

　　3. PCR-SSCP分析法。①AR基因第8外显子的体外扩增:模板DNA按常规酚-氯仿法从标本中抽提基因组DNA。引物选用5′-GAGGCACCTCCTTGTCAAC-CCTG-3′和5′-GGAACATGTTCATGACAGA-CTGTACATCA-3′。PCR扩增的特异性循环参数为94 ℃变性45s,60℃退火45 s,72 ℃延伸60 s,30个循环后再72 ℃延伸5 min。②SSCP分析:取PCR产物8μl经碱变性后上样于6%中性聚丙烯酰胺凝胶,用0.5×TBE为缓冲液,恒电流15mA,室温下电泳12～16h,凝胶以银染^〔5〕后观察结果。

　　结　果

　　1.总检测结果。12例晚期PC患者经内分泌治疗后,随访期达9个月以上,其中3例在随访期内复发。各标本检测结果如表1所示。

表1　前列腺癌标本中的AR水平和

　　AR基因突变情况及患者随访结果

　　2.复发组与未复发组标本中AR平均水平的比较。复发组标本中的AR平均水平(±s):胞浆为(338.1±239.8) fmol/mg蛋白质,胞核为(485.8±380.8) fmol/mg蛋白质;未复发组标本中的AR平均水平:胞浆为(459.3±314.6) fmol/mg蛋白质,胞核为(706.4±356.9) fmol/mg蛋白质。两组间差异均无显著性(t_核=0.91,P=0.19;t_浆=0.60,P=0.28)。

　　3.复发组与未复发组标本中AR基因PCR-SSCP结果比较。与正常前列腺组织DNA对照,在随访期内3例复发病例中有2例PC标本中AR基因第8外显子扩增片段具异常泳带,表明该片段内可能有碱基突变(图1)。

　　图1　第1～6例PC患者标本中AR基因第8外显子PCR产物的SSCP分析。可见第1、2例号患者标本各有1条异常泳带

　　讨　论

　　有人认为胞核中的AR水平与PC对内分泌治疗的反应性之间存在相关性,即AR水平越高,则内分泌治疗的预后越好;另有人认为只有胞浆中的AR水平才具有这种相关性。也有不少研究表明,不论是胞浆还是胞核中的AR水平与PC对内分泌治疗的反应性之间均无相关性。本研究结果显示,复发组与未复发组胞浆或胞核中的AR平均水平差异均无显著性,提示癌组织中的AR水平对PC的内分泌治疗没有预后价值。

　　近年来,AR基因突变与PC的关系倍受关注。有作者在对内分泌治疗产生抵抗性的PC组织中检出AR基因突变,认为突变是导致PC对内分泌治疗产生抵抗性的原因之一^〔2,3〕,提示AR基因突变可能与PC的预后有关。第8外显子是PC组织中AR基因的突变热点^〔6〕,本研究在治疗前即对标本中AR基因第8外显子突变情况做检测,随访结果发现2例SSCP结果异常的PC经内分泌治疗后很快复发,进一步表明其可能与AR基因突变有关。

　　*本课题获国家自然科学基金资助(基金编号:39270770)

　　参　考　文　献

　　1　Barrack ER. A critical evaluation of the use of androgen receptor assays to predict the androgen responsiveness of prostatic cancer. Prog Clin Biol Res, 1987, 239:155-187.

　　2　Suzuki H, Sato N, Watabe Y, et al. Androgen receptor gene mutations in human prostate cancer. J Steroid Biochem Molec Biol, 1993, 46:759-765.

　　3　Culig Z, Hobisch A, Cronauer MV, et al. Mutant androgen receptor detected in an advanced-stage prostatic carcinoma is activated by adrenal androgens and progesterone. Endocrinol, 1993, 7:1541-1550.

　　4　桂治宁, 胡笑克, 卢汉平, 等. 人前列腺癌雄激素受体分布特性及血清睾酮水平变化的研究. 核技术, 1993, 16:649-651.

　　5　Budowle B, Chakraborty R, Giusti AM, et al. Analysis of the VNTR locus dis80 by the PCR followed by high-resolution PAGE. Am J Hum Genet, 1991, 48:137-143.

　　6　Gaddipati JP, McLeod DG, Heidenberg HB, et al. Frequent detection of codon 877 mutation in the androgen receptor gene in advanced prostate cancers. Cancer Res, 1994, 54:2861-2864.

（收稿：1998-02-16　　修回：1998-09-01）