BCL-2和P53蛋白表达在胃癌发生中的意义

广东药学院学报 2000年第2期第16卷 实验研究

作者：苏江

单位：广州市红十字会医院病理科，广东广州 510220

关键词：胃癌；胃粘膜不典型增生；BCL-2P53

　　摘　要　目的：探讨BCL-2蛋白在胃癌及癌前病变中的表达规律和意义以及与P53表达之间的关系。方法：采用免疫组化检测BCL-2和P53蛋白的表达。结果：在胃癌的发生发展过程中，BCL-2表达在中重度不典型增生中显著高于轻度不典型增生,而低于早期胃癌。P53蛋白表达在中重度不典型增生的阳性率大于轻度不典型增生(P＜0.05),与早期胃癌比较则无统计学差异。不典型增生组织中BCL-2和P53蛋白的阳性率之间无统计学差异,而胃癌中P53阳性率大于BCL-2的阳性率(P＜0.05)。结论：BCL-2高表达与胃癌发生的早期阶段即启动阶段有关,BCL-2失表达是一个晚期事件;BCL-2表达与分化程度、病理分期、淋巴结转移无关;P53蛋白对BCL-2表达的调控因胃癌发生的不同阶段而变化。

　　中图号　R735.203　　文献标识码:A

　　文章编号:1006-8783(2000)02-0116-02

　　自从1984年Tsujimoto等^［1］在滤泡型淋巴瘤中分离出抑凋亡基因BCL-2以来,人们相继在多种肿瘤中检测到BCL-2的过度表达,并发现BCL-2表达与P53蛋白表达之间存在某种关系。本文将讨论BCL-2蛋白在胃癌及癌前病变中的表达规律和意义及其与P53蛋白表达之间的关系。

　　1　材料和方法

　　1.1　材料　标本取自我院1987年～1997年胃粘膜活检及手术切除标本。正常胃粘膜18例,轻中重不典型增生分别为20例,12例,19例,早期胃癌9例,进展期胃癌59例。68例胃癌中高中低腺癌和未分化癌分别是7例,19例,33例,9例;68例胃癌中50例进行了淋巴结清扫,其中淋巴结无转移的13例,有转移的37例。

　　1.2　试剂和方法　免疫组织化学采用LSAB染色法。BCL-2和P53单克隆抗体购自DAKO公司。SP试剂盒购自福州迈新公司。BCL-2阳性表现为胞浆呈黄褐色均匀颗粒(附图1)或核呈棕褐色(附图2),P53阳性表现为细胞核棕褐色(附图3)。

　　1.3　统计学处理　χ²检验。

　　2　结果

　　2.1　胃癌及癌前病变中BCL-2和P53表达，见表1。

表1　胃癌及癌前病变中BCL-2和P53的表达

　　与前一项病变组比较：^*P＜0.05　　表1表明在胃癌发生过程中，BCL-2表达的阳性率在中重度不典型增生中显著高于轻度不典型增生，而低于早期胃癌，与胃癌的分期，分化程度，有无淋巴结转移无关；P53表达的阳性率在中重度不典型增生中显著高于轻度不典型增生。

　　2.2　胃癌及癌前病变中BCL-2与P53蛋白表达之间的关系

　　见表2、3。表明胃癌前病变中BCL-2与P53表达的阳性率差异无显著性(P＞0.05)；胃癌中BCL-2与P53表达的阳性率差异有显著性(P＜0.05)。

表2　胃癌前病变中BCL-2与P53之间的关系

　　P＞0.05

表3　胃癌中BCL-2与P53之间的关系

　　P＜0.05

　　3　讨论

　　3.1　抑凋亡基因BCL-2在胃癌的启动过程中通过延长细胞的生存时间,使其遭遇致癌因素的机会增加，而癌变后部分胃癌组织的细胞周期不受BCL-2蛋白的控制。本组研究发现,当胃粘膜出现不典型增生时,BCL-2表达明显增加,在早期癌则开始下降,在进展期胃癌时进一步下降,说明BCL-2高表达主要参与胃癌的早期启动阶段,胃癌的启动过程存在凋亡抑制。许岸高的研究表明轻中重不典型增生过程中凋亡指数下降支持了这一结果^［2］。实验表明癌基因BCL-2编码的蛋白具有抑制细胞凋亡的作用,但不影响细胞的增殖,单独BCL-2的表达增多也不足以引发肿瘤状态,但因为BCL-2能够增强细胞的生存能力,这样就可以发生许多基因现象,BCL-2就可以与某些癌基因和病毒产物产生协同作用。BCL-2和MYC的协同作用已经在这两种基因的转基因小鼠中得到证实。包含BCL-2和MYC两种基因的小鼠比缺少其中任何一种基因的小鼠能够更快地发生肿瘤^［3］。癌变后BCL-2表达下降,说明BCL-2失表达是一个晚期的事件,提示癌变后的细胞生存不再受BCL-2的调控,或者癌变后细胞周期正常,但增殖率增加。对胃癌的增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学研究表明^［4］,胃癌的PCNA阳性率明显增加也反映了这一现象。

　　3.2　BCL-2阳性表达能否作为评价胃癌预后的指标,目前仍未确定。尽管对淋巴瘤^［1］和乳腺癌^［5］的研究表明BCL-2表达与良好的预后指标有关,但在胃癌中的研究结果却有所不同。Gregory^［6］ 认为BCL-2表达与肠型胃癌的发展有着非常密切的关系,但与分化程度,病理分期,淋巴结转移情况和预后无关;而Muller^［7］对413例胃癌的研究发现,BCL-2表达可以抑制细胞凋亡,与Lauren 分型有关,但与浸润深度,血管和淋巴管浸润无关,高、中度分化的肿瘤BCL-2阳性率较低分化者高,且有显著性差异,无淋巴结转移者BCL-2阳性率较有淋巴结转移者高(P＜0.05),但BCL-2阳性的患者与阴性患者的生存率无统计学差异,即BCL-2表达对胃癌预后无影响。我们的研究结果与Gregory相同,即BCL-2表达与分化程度,病理分期,淋巴结有无转移无关,但光从数据看却与Muller的结果相似,这是否因病例数不同所致,有待进一步增加病例来确定。

　　3.3　P53对胃癌发生过程中BCL-2表达的调控因不同的时期而变化。野生型P53是细胞生长的监控器,在发生细胞DNA损伤的情况下使细胞分裂中止在G1/S期,以便有足够时间修复损伤,恢复常态,若损伤不能修复,野生型P53还能启动细胞的程序性死亡机制引起细胞自尽。P53基因是BCL-2,BAX的上游调控基因,野生型P53能下调BCL-2,上调BAX,从而介导细胞凋亡,但突变型P53蛋白可能正好相反。本组实验中不典型增生病变中BCL-2阳性率与P53阳性率之间无统计学差异即表示二者一致,提示突变型P53促使BCL-2的过度表达,但在胃癌中P53阳性率大于BCL-2阳性率(P＜0.05),提示部分BCL-2失表达,过度表达的P53可能已失去了调节BCL-2表达的功能或者下调BCL-2的表达。

　　(本文附图见封三)

图1　BCL-2和P53蛋白表达

　　①PCL-2阳性表现为胞浆呈黄褐色均匀颗粒(400×);

　　或②核呈棕褐色(400×);③P53阳性表现为细胞棕褐色(400×)

参考文献

　　［1］Tsujimoto Y,Yunis J,Onorato-Showe L,et al.Molecular cloning of the chromosomal breakpoint of B-cell lymphomas and leukimias with the t(11:14) chromosomal translocation［J］.Science,1984,224:1403.

　　［2］许岸高,李韶光,刘集鸿等.细胞凋亡及BCL-2蛋白表达在胃癌发生中的意义［J］.广东医学,1998,19(7):489.

　　［3］纪小龙,尹彤.BCL-2基因:从研究走向肿瘤病理诊断［J］.临床与实验病理学杂志,1999,15(4):343.

　　［4］李宁.增殖细胞核抗原(PCNA/Cyclin)与胃癌预后的关系［J］.中华病理杂志,1993,15(1):34.

　　［5］JoensuuH,Pylkkanen L,Joikkanen S.Bcl-2 protein espression and long-term survival in breast cancer［J］.Am J of Path,1994,145(1):1191.

　　［6］Gregory YL, Gregory VS, Martin SK.Immunohistochemical evaluation ofbcl-2 protein expression in gastric adenocarcinomas［J］.Cancer,1995,75(9):2209.

　　［7］Muller W,S chneider A,Hommel G.et al.Prognostic value of bcl-2 espression in gastric cancer［J］.Anticancer Res,1998,18(6B):4699.

(收稿日期　2000-03-13)