血清α-L-岩藻糖苷酶在原发性肝癌中的诊断价值

山东医药 2000年第22期第40卷 经验交流

作者：张华　叶震璇　刘广宣

单位：贵州省人民医院　贵州贵阳　550002

　　原发性肝癌（PHC）是一种常见的恶性肿瘤，血清甲胎蛋白（AFP）曾被认为是PHC的特异性好、阳性率高的标志物，但有30％左右的PHC患者血清AFP阴性。因此，寻找AFP以外的肝癌标志物显得尤为重要。近年来，血清α-L-岩藻糖苷酶（AFU）被认为是肝癌的一个新的标志物。

　　肝癌时AFU升高机制：AFU是一种溶酶体酶，广泛分布于各种组织细胞体液中，参与糖蛋白等多种生物活性物质的分解代谢。肝脏是富含溶酶体的器官，当肝脏细胞癌变时，AFU合成增加并大量释放入血，其机制可能为：①血清AFU激活物存在影响酶活性有文献报道，PHC及正常人血清都能使标准的AFU活性升高，正常人血清AFU激活物与AFU活性呈正相关。而在PHC时，血清AFU激活物含量增加且和AFU关系发生紊乱，提示AFU激活物含量增加对PHC血清AFU活性升高起重要作用；②AFU底物浓度升高而使AFU代偿性升高PHC时，血清PBF（蛋白结合岩藻糖）和岩藻糖基化AFU浓度增加，人体内与蛋白结合的岩藻糖为L-岩藻糖，含岩藻糖的糖蛋白是AFU生理底物之一。有研究表明，PHC患者血清PBF含量增加。③癌外肝细胞合成AFU增加肝癌细胞可分泌某种刺激因子作用于正常肝细胞，促使酶蛋白合成增加，引起血清AFU活性增加。其他消化道肿瘤即使发生肝转移，血清AFU也无明显增加，提示这种刺激具有肝癌特异性。

　　血清AFU升高对PHC的诊断价值：文献报道，PHC患者的血清AFU活性不仅显著高于健康人，而且显著高于转移性肝癌、肝硬化、先天性囊肿和其他良性肝占位性病变，对PHC的诊断阳性率为64％～86％，特异性为90％左右。血清AFU活性及阳性率与肝癌直径大小无明显相关性，小肝癌组织血清AFU阳性率（70.8％）显著高于AFP（37.5％）。但是，血清AFU活性与AFP水平不相关。AFP阴性与AFP阳性的PHC患者，血清AFU阳性率无显著差别。也有报道指出，包括AFU的血清糖苷酶的酶谱分析更有利于肝癌的诊断及鉴别诊断，尤其是对AFP阴性的患者。研究发现，肝细胞癌患者血清中的AFU、N-乙酰氨基-β-D葡萄糖苷酶、N-乙酰氨基-β-D半乳糖苷酶和α-甘露糖苷酶活性均显著高于正常人。这4种糖苷酶的活性密切相关，某些良性肝病和肝外疾病时也出现单种糖苷酶活性升高，但同时出现几种糖苷酶活性升高主要见于肝细胞癌。

　　血清AFU测定方法：①荧光法：利用AFU水解4-甲基伞型酮α-L-岩藻吡喃糖苷，释放4-甲基伞型酮，用碱性缓冲液终止反应，并使产物呈现荧光，用360nm或365nm激发波长和400nm或448nm发射波长检测荧光强度，对照不同浓度4-甲基伞型酮制备的标准曲线求酶活性。此法敏感性高，最小检出限为0.06U／L。②比色法：以4-硝基苯α-L-岩藻吡喃糖苷为底物经AFU水解释放4-硝基苯酚，同样用碱性缓冲液终止反应，使4-NP呈显著黄色，在规定波长下读取吸光度A。用纯4-NP作标准，利用标准曲线或4-NP摩尔吸光度计算出AFU活性。本法简便，设备要求不高，国内外广泛采用。

（2000-09-11收稿）