冠心病患者血单核细胞粘附分子和分泌细胞因子的变化

中华心血管病杂志 2000年第3期第28卷 论著摘要

作者：梁春　吴宗贵　黄佐　仲人前　张玲珍　李莉

单位：梁春（200003 上海，第二军医大学附属长征医院心内科）；吴宗贵（200003 上海，第二军医大学附属长征医院心内科）；黄佐（200003 上海，第二军医大学附属长征医院心内科）；仲人前（200003 上海，第二军医大学附属长征医院心内科）；张玲珍（200003 上海，第二军医大学附属长征医院心内科）；李莉（200003 上海，第二军医大学附属长征医院心内科）

　　在动脉粥样硬化（AS）不稳定斑块中存在着大量单核巨噬细胞和泡沫细胞，其功能状态与粥样斑块的发展和破裂密切相关。循环血中的单核细胞是斑块部位泡沫巨噬细胞的主要来源之一，深入研究冠心病患者循环血中单核细胞的功能状态对了解AS的病理生理和心血管事件的发生具有重要意义。

　　一、对象与方法

　　1.病例选择：冠心病患者31例，均经冠状动脉造影证实。其中稳定性心绞痛组13例，男11例，女2例，年龄49～71（平均63.4）岁；不稳定性心绞痛组18例，男15例，女3例，年龄45～80（平均62.8）岁。对照组11例，男8例，女3例，年龄41～69（平均60.3）岁。所有受试者近期均无感染性疾病和肿瘤病史，未用过类固醇类药物。

　　2.于行冠状动脉造影的同时，取股动脉血肝素抗凝，30 min内采用密度梯度离心法分离收集单个核细胞，附壁分离培养单核细胞。实验用单核细胞数为1×10⁹/L。

　　3.新鲜分离的单核细胞用流式细胞仪直接免疫荧光法检测，用平均荧光强度（mean fluorescence intensity，MFI）代表细胞CD表达水平。同时对各标本做阴性对照。所用的鼠抗人单克隆抗体包括：CD11b-FITC、CD49d-FITC。

　　4.调新鲜分离单核细胞数为1×10⁹/L，加入10 g/L PHA，继育12 h，离心收集上清液，-80℃储存待测。TNF-α(肿瘤坏死因子)的测定：采用TNF-α放免药盒；IL-8(白细胞介素-8)的测定：采用ELISA药盒。

　　5.数据用±s表示，组间t检验分析处理。

　　二、结果

　　1.冠心病患者PBMs粘附分子和细胞因子表达：详见表1。

表1　各组间PBMs、CD11b、CD49d表达和分泌TNF-α、IL-8的比较(±s)

　　注:与对照组相比 ^*　P＜0.01；与稳定心绞痛组相比，^△ P＜0.05　　2.冠脉狭窄程度与单核细胞膜表面CD11b、CD49d表达及TNF-α、IL-8的分泌无明显相关。

　　三、讨论

　　我们检测31例冠心病患者外周血单核细胞表面CD11b、CD49d表达均高于正常人，差异显著；而从外周动脉血分离出的单核细胞，经PHA激活后，其分泌TNF-α、IL-8的能力也明显高于正常人。人单核细胞膜表面CD11/CD18的表达升高是炎症反应的重要标志；TNF-α、IL-8是免疫和炎症反应的重要调节因子。推测冠心病患者动脉血中单核细胞受AS的一些致病因素的影响，在与血管内皮粘附之前，可能已经处于激活或半激活状态开始参与AS的形成。不稳定斑块中的炎症细胞（单核巨噬和T淋巴细胞）明显多于稳定斑块，从而更易被激活有利于斑块破裂和不稳定心绞痛的发生。本研究发现：不稳定心绞痛组外周血单核细胞表面CD11b、CD49d表达和分泌TNF-α、IL-8的能力高于稳定劳力型心绞痛组；而冠状动脉狭窄程度与此无明显相关。推测循环血中的单核细胞的激活在不稳定性心绞痛病理发生中起重要作用，针对此进行干预会给不稳定性心绞痛乃至急性冠状动脉综合征诊治带来新的前景。

收稿日期：1999-04-18