剥夺睡眠对人体免疫功能的影响

　　第一军医大学学报1999年第19卷第4期

裘宇容　洪军　杨春莉

　　摘要　目的：探讨睡眠与免疫功能的关系。方法：采用流式细胞仪和单向琼脂扩散法对20例军校学员进行了剥夺睡眠48 h后细胞免疫和体液免疫功能的测定。结果：剥夺睡眠48 h后，T细胞亚群CD4、CD8以及免疫球蛋白IgG、IgA、IgM和补体C3、C4的含量与剥夺睡眠前相比无显著性差异（P＞0.05），NK细胞值则显著降低（P＜0.01）。结论：剥夺睡眠48 h对人体免疫功能有影响，睡眠与免疫功能有关。

　　关键词：剥夺睡眠　免疫功能

　　为研究睡眠与免疫功能的关系，观察了20例军校学员剥夺睡眠48 h后T细胞亚群、NK细胞、免疫球蛋白及C3、C4补体的变化，现报道如下。

　　1 材料与方法

　　1.1 研究对象 军校学员20例，男性，平均年龄20岁，身体健康。

　　1.2 研究方法 实验连续4 d。第一天为正常的昼夜节律，第二天早晨6:00时抽取外周静脉血进行免疫功能的检测，并以此检测结果作为剥夺睡眠前的对照。自第二天早晨至第四天早晨，受试者不睡眠，期间进行脑电图、肌电图、心电图的检测，并参加一系列活动如看书、看电视、看录像、打牌及一些体育活动。第四天早晨6:00抽取外周静脉血进行免疫功能的检测，并以此为剥夺睡眠后的检测结果。研究期间，受试者禁酒、禁烟、禁喝咖啡。

　　1.2.1细胞免疫的检测 于两只试管中分别加入100 μl的抗凝静脉血，再分别加入20μl的双标记单克隆抗体CD3/NK，CD4/CD8（购于法国国际免疫公司），室温避光孵育20 min，加入红细胞溶解液500 μl，充分溶解20 min后，以1200 r/min的速度离心5 min，去上清，PBS缓冲液冲洗2次，最后以0.5 ml的PBS缓冲液使细胞悬浮，流式细胞仪（Coulter）分析。

　　1.2.2 体液免疫的检测 采用单向琼脂扩散法。单扩板购于北京华夏科海医用检验试剂有限公司。

　　2 结果

　　2.1 细胞免疫 剥夺睡眠后T淋巴细胞总数CD3，T细胞亚群CD4稍有升高，CD8降低，与剥夺睡眠前相比无显著性差异（P＞0.05）；NK细胞值明显低于剥夺睡眠前（P＜0.01）。

　　2.2 体液免疫 剥夺睡眠后免疫球蛋白IgG、IgM、补体C4升高，免疫球蛋白IgA、补体C3降低，与剥夺睡眠前相比无显著性差异（P＞0.05）。

　　3 讨论

　　睡眠在人类健康与疾病作用中的研究近年来已经取得很大进步，但睡眠的功能仍不是很清楚。剥夺睡眠是研究睡眠功能的一种方法.早在1979年Palmblad等^[1]对健康人群进行了64 h的剥夺睡眠的研究，发现在64 h的剥夺睡眠后受试者对PHA的反应减弱，但内分泌功能正常，血浆皮质醇水平正常。Moldofsky等^[2]对10例健康人进行了剥夺睡眠40 h的细胞免疫功能的观察,发现剥夺睡眠40 h期间，受试者对PWM（一种B细胞刺激因子）反应是逐渐升高的，NK细胞活性是逐渐降低的，而对PHA（体外T细胞刺激因子)分裂原的反应不受影响，由此认为T细胞活性或某些T细胞亚群功能不易受40 h的剥夺睡眠的影响。NK细胞活性降低，细胞数目减少，恢复睡眠后，NK细胞活性逐渐恢复正常。作者观察了20例军校学员剥夺睡眠48 h后的细胞免疫和体液免疫，结果显示：NK细胞值显著降低,T细胞亚群和体液免疫功能没有显著性改变,说明短期剥夺睡眠，受影晌的是NK细胞，而T细胞亚群和体液免疫功能不受影响，但随着剥夺睡眠时间延长，T细胞亚群和体液免疫功能是否会改变有待于进一步研究。

　　研究表明^[1,3]，剥夺睡眠期间血浆皮质醇昼夜节律水平不变。在剥夺睡眠的研究期间，受试者无精神紧张，说明剥夺睡眠期间NK细胞数目、活性的降低，以及对PWM的反应升高不是内分泌功能改变引起，而是剥夺睡眠本身引起的变化，说明剥夺睡眠对人体免疫功能有影响，从而也说明睡眠与免疫功能密切相关。

　　NK细胞是一种自然杀伤细胞，它不需要抗体存在，不受MHC限制，可直接杀伤某些肿瘤细胞或病毒感染的细胞。NK细胞数目减少,功能降低对剥夺睡眠48 h的人体没有重大影响,但较长时期的剥夺睡眠,是否容易导致人体发生感染性疾病,目前未见文献报道，但是对大白鼠长期剥夺睡眠的实验研究显示：长期剥夺睡眠后，大白鼠皮肤潰烂,2～4周后死于菌血症，死后尸解未发现组织形态学和病理学的改变。我们推测大白鼠的死亡可能与NK细胞数目减少,功能降低及其它免疫功能相继紊乱有关,长期剥夺睡眠的人体肯定也如此。

　　作者简介：裘宇容，女，1963年出生，1988年毕业于第一军医大学，硕士作者单位：裘宇容　杨春莉　(第一军医大学南方医院检验科，广州，510515)

　　洪　军(第一军医大学南方医院康复科，广州，510515）

　　参考文献

　　1 Palmblad J，Petrini B，Wasserman J et al．Lymphocyte and granulocyte reactions during sleep deprivation．Psychosom Med，1979,41:273

　　2 Moldofsdy H，Leu FA，Davidson JR et al．Effects of sleep deprivation on human immune function．FASEB J,1989,3:1972

　　3 Carol AE．Sustained sleep deprivation impairs host defense．Am J Physiol，1993,265:R1148