一氧化氮与子宫颈癌可能关系的探讨

山西医药杂志 2000年第5期第29卷 论著

作者：李莉　赵瑞霞

单位：李莉(山西医科大学第一医院 030001)；赵瑞霞(山西省肿瘤医院)

关键词：一氧化氮；子宫颈癌

　　【 摘　要 】　目的　探讨一氧化氮(NO)与子宫颈癌的关系 。方法　采用一氧化氮代谢量测定法及分光光度计在540 nm波长下测定32例 子宫颈癌及24例慢性子宫颈炎患者组织中的NO^-₂/NO^-₃含量。结果　子宫颈癌组织中NO含量(231±24)明显高于子宫颈炎组织中NO含量(194±21)。随子宫颈癌 临床分期增高，NO含量虽有增高趋势，但无统计学差异。结论　子宫颈癌组 织中NO含量明显升高，可能与子宫颈癌的发生发展有一定关系。

The possible relationship between nitric oxide and cervical cancer

Li Li,Zhao Ruixia

　　(The First Hospital,Shanxi Medical Univers ity,Taiyuan,030001,China)

　　【 Abstract 】　Objective　To investigate the relationship betwe en nitric oxide (NO) level and cervical cancer.Methods　Cervical hom ogenate NO₂^-/NO₃^- level in 32 cases of cervical cancer and 24 cases of c hronic cervicitis was measured and compared using fluorophotometry and metabolim etry.Results　The NO level of cervical cancer group was significantl y higher than that of control group.Along with the clinical stage of cervical ca ncer getting higher the NO level tended to increase,but no statistical significa nce.Conclusion　The increasing NO in cervical cancer might play an i mportant role in the carcinoma development and growth.

　　【 Key words 】　Nitric oxide;　Cervical cancer

　　一氧化氮(nitric oxide,NO)系一种新发现的细胞毒分子^［1］，体内NO产生或释放异 常可能与肿瘤的发生、发展有关。子宫颈癌对妇女健康危害最甚，但其发病机制尚不清楚， 有关子宫颈癌与NO的关系尚未见报道。本研究通过测定组织中NO代谢产物NO^-₂/NO^- 3的含量，以探讨子宫颈癌与NO的关系。

　　1　资料与方法

　　1.1　病例选择

　　1.1.1　子宫颈癌组：选择1998年1月至1999年10月经临床病理检查确诊为宫颈鳞状细胞癌 者32例。临床分期(FIGO，1985)中原位癌3例，Ⅰ期癌17例，Ⅱ期癌12例。组织学分级中中 分化25例，低分化3例。本组年龄36～58岁，平均51岁。

　　1.1.2　慢性子宫颈炎组：选择同期慢性子宫颈炎患者24例，均经病理检查证实。其中宫 颈糜烂15例，宫颈肥大5例，宫颈息肉4例。年龄30～49岁，平均39岁。

　　1.2　研究方法

　　1.2.1　标本采集：两组组织切下后，立即采取标本，放入-80 ℃冰箱内保存，成批一同 检测。

　　1.2.2　检测方法：机体内NO半衰期只有2～30 s，作用后迅速氧化成稳定的代谢产物NO -₂/NO^-₃，故NO^-₂/NO^-₃水平成为反映组织中NO含量间接而有效的指标。本试 验采用比色法检测组织中NO^-₂/NO^-₃含量以间接反映组织NO水平^［2，3］。

　　取待测宫颈组织各1 g，加生理盐水5 mL，采用德国进口HO₄型匀浆器，制成组织匀浆后， 经2 500 r/min离心5 min取0.1 mL按下列方法检测。

　　取试管3支，分为测定管、空白管和质控管，每管各加镉粒2 g，标本去蛋白后加入重蒸水及 缓冲剂，充分混匀，室温下反应60 min后，即用吸管移至10 mL容量瓶中，以重蒸水洗涤3次 ，每次2 mL，将3次洗涤液一并收集于同一容量瓶中，再加入0.4%对氨基苯磺酸0.5 mL和0 .2%萘乙二胺溶液0.25 mL，重蒸水加至刻度，混匀，静置15 min后，采用分光光度计在54 0 nm波长下测定吸光度A值。

　　1.3　结果判断及计算

　　首先观察质控管，断定其在质控范围内，则本次试验成立。按下述公式求出每一测定管中待 测标本的NO^-₂/NO^-₃。

　　组织中NO^-₂/NO^-₃含量(μg)=(C×100)/(0.1×0.8×0.1×46)

　　式中C为待测组织的吸光度在标准曲线上对应的亚硝酸钠浓度(mg/L)。

　　1.4　统计学方法

　　所用数据均采用(±s)表示，组间比较采用非配对t检验。

　　2　结　　果

　　本研究结果显示，子宫颈癌组织中NO含量较慢性宫颈炎组织中明显升高，差异有显著性(P＜0.05)。子宫颈癌中随临床期别增加，NO含量有增高趋势，但早、中 期之间差异无显著性(P＞0.05)，见表1、表2。

表1　两组组织中NO含量比较(±s)

μg/g

表2　早、中期子宫颈癌组织中NO含量(±s)

μg/g

　　3　讨　　论　　NO是一种无机小分子化学物质，广泛存在于人体和脊椎动物的各种细胞及组织中，体内左旋 －精氨酸在一氧化氮合成酶作用下，形成NO。NO作用于靶细胞而产生各种生理功能。当NO上 升超过行使正常生理功能的浓度时，有可能诱发细胞突变和癌变^［4，5］。过量的NO 可诱导DNA损伤，包括DNA的氧化、脱氨基、碱基化、链断裂和突变修复错误，或基因表达失 控，使癌基因激活和抑癌基因失活，从而促使肿瘤的发生发展。有关子宫颈癌组织中NO含量 研究甚少。本研究测定了子宫颈癌及慢性子宫颈炎组织中的NO含量。结果显示：子宫颈癌组 织中NO含量明显高于慢性子宫颈炎组织(P＜0.05)，各期癌组织 中NO含量随临床期别增加有增高趋势，但无统计学差异(P＞0.05)，提示在子宫颈癌的发生过程中可能包含有NO机制。癌组织中NO含量高于良性组织，与孙 恒芳等^［6］报道基本一致。

　　已有研究资料显示：子宫颈癌组织中一氧化氮合成酶(NOS)含量增高^［7］。NOS增高 可使局部NO合成增加，而高浓度的NO可诱发细胞癌变，也可使肿瘤组织中出现较多的新生血 管，增加肿瘤血供，且较对照组更有侵袭力。这些研究均表明，肿瘤细胞中较高浓度的NO促 使肿瘤生长。我们的研究也表明子宫颈癌组织中NO含量高于慢性子宫颈炎组织，可以提示NO 与子宫颈癌的发生发展有一定关系。NO与肿瘤的关系还仍需进一步的研究。

　　作者简介：李莉，女，1956年11月生，副主任医师，山西医科大学第一医院，030001

参考文献

　　1.Farias-Eisner R,Sherman MP,Aeberhard E,et al.Nitric oxide is a n important mediator for tumoricidal activity in vivo.Proc Natl Acad Sci USA,1994,91:9407-9411

　　2.茅惠明.血清中硝酸盐的镀铜镉还原测定法.临床检验杂志，1995,13： 6

　　3.Nathem C.Nitric oxide as a secretory product of mammalian cells .FASEB J,1992,6:3051.

　　4.Nguyen T,Brunson D,Crispi CL,et al.DNA damage and mutation in h uman cells exposed to nitric oxide in vitro.Proc Natl Acad Sci USA,1 992,89:3030

　　5.孙恒芳，张旭东，罗源，等.胃癌患者血清和组织一氧化氮水平变化及 临床意义.中国肿瘤临床，1998，25：285-286

　　6.Sager SM,Sigh G,Hodson DI.Nitric oxide and anti-cancer therapy .Cancer Treat Rev,1995,21:159-181

　　7.Jenkins DC,Charles IG,Thomsen LL,et al.Roles of nitric oxide in tumor growth.Proc Natl Acad Sci USA,1995,92:4392-4396

(收稿日期：2000-05-23)