如何鉴定骨髓移植后供者细胞转化为白血病细胞

中华血液学杂志 1998年第11期第19卷 读者*作者*编者

作者：刘迎　朱平

单位：100034　北京医科大学第一医院

　　编辑部：

　　贵刊于1998年第19卷第2期第94～95页研究报告栏目中，刊登了胡亮钉医师等撰写的文章《白血病患者异基因骨髓移植后供者源白血病复发二例》，我们很感兴趣，如果有骨髓移植后供者细胞在患者体内恶变的确凿证据，对探讨白血病病因学，了解白血病是否由于造血环境影响导致细胞突变有重要意义。胡医师等用3个方面的证据表明患者复发的白血病是供者源的，包括从染色体水平分析核型变化，基因水平分析指纹图谱以及用免疫反应分析血型变化。对这些标准我们谈一点看法。

　　染色体作为一个证实移植成功的指标，是很有用的。但染色体性别分析作为移植后供者细胞发生恶变的证据仍有不足之处。在染色体分析的技术操作中，正常细胞和白血病细胞都会显示各自的核型，而出现核型的比例并不完全与骨髓中正常细胞与白血病细胞的比例相同，往往白血病细胞的核型不易在一两次核型分析中显示出来。原文中例1用染色体性别分析证明大部分核型为供者细胞，但未能证实是白血病细胞，似有缺陷；例2在46XX核型的细胞中同时发现了与白血病相关的易位t(8;21)，证明复发的白血病是供者细胞来源的(供者为女性)，证据较为充分。有人用原位杂交分析发现复发的白血病细胞中有Y染色体(受者为女性，供者为男性)，也是较好的证据^［1］。

　　例1用基因指纹图谱分析作为供者源细胞复发的主要证据。但是，仔细分析附图和内容，图中所示的例1的指纹图谱变化情况，似不足以证实作者提出的供者细胞发生白血病的结论。原图上，移植前与复发后的电泳原点不在同一条水平线，我们估计作者是在不同时间作的。为了更清楚显示结果，我们将电泳图按原点排列整齐，可见复发后患者指纹图谱与移植前患者本人的图谱是相同的，而不是如作者所说与供者的指纹图谱相同，因此，这一结果恰好说明是患者自身的残留白血病复发，而不是供者细胞突变导致白血病。此外，作者提供的图中，患者复发后和移植前的供者的2个指纹图谱出现明显不同，不知是标本搞错了，还是标记有误。

　　例1另有血型发生变化的证据。但是，以往常有患白血病后血型变化的报道，通常认为是化疗后血型抗原表达不足或输血所致，所以用这一指标来确定白血病细胞的来源，虽是一条线索，但不是很确切的指标。

　　移植后供者细胞是否会恶变，是当前引起广泛注意的问题，应用血型、血清免疫球蛋白分型、性染色体特异探针等方法的可靠性不尽相同，HLA分型则往往因配型相同而不可能进行。另外，由于移植后患者体内往往呈嵌合体状态，细胞和染色体水平的分析可能不够准确和全面，近年来应用多态性和个体稳定性都较高的微卫星和小卫星位点行PCR扩增，在基因水平分析，可检测出仅占0.5%的嵌合体^［2］，结果较为准确和可靠。一些研究也发现，异基因骨髓移植后嵌合状态存在演化过程，长期存活者呈供者嵌合型，而复发患者呈受者细胞生长占主导的嵌合型^［3］。因此，在分析是残留病复发还是供者细胞恶变时，应当考虑移植后体内各种细胞的比例。

参 考 文 献

　　1　Mouratidou M, Sotiropoulos D, Deremitzaki K, et al. recurrence of acute leukemia in donor cells after bone marrow transplantation: documentation by in situ DNA hybridization. Bone Marrow Transplant, 1993,12:77-80.

　　2　Oberkircher AR, Strout MP, Herzig GPTI,et al. Description of an efficient and highly informative method for the evaluation of hematopoietic chimerism following allogeneic bone marrow transplantation. Bone Marrow Transplant, 1995,16:695-702.

　　3　Ramirez M, Diaz MA, Garcia Sanchez FTI, et al. Chimerism after allogeneic hematopoietic cell transplantation in childhood acute lymphoblastic leukemia. bone Marrow Transplant, 1996, 18:1161-1165.

(收稿：1998-03-11)

(校对：仵乾玉)