细胞素及合用异博定对人乳腺癌细胞多药耐药性逆转作用的研究

中华实验外科杂志 2000年第2期第17卷 简报

作者：张荣河　何三光

单位：(110001　沈阳，中国医科大学第一临床学院肿瘤科)

　　我们利用人乳腺癌耐药细胞系以流式细胞术及噻唑蓝(MTT)法检测肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素(IL)-2、α-干扰素(α-IFN)单用及与异博定合用对细胞耐药性的调节作用，结果报道如下。

　　一、材料与方法

　　1.细胞：人乳腺癌亲代MCF-7细胞及对阿霉素耐药的MCF-7/ADR细胞来源于美国国立癌症研究院，常规培养。

　　2.MCF-7/ADR细胞的抑制率测定：将细胞调整至3×10⁸个/L浓度，取200 μl加入96孔板中过夜，去掉培养基，加入含不同药物浓度的新培养基，培养48 h收集细胞，MTT法检测半抑制浓度(IC₅₀)。

　　3.细胞内药物含量测定：1×10⁶个MCF-7/ADR细胞，加入不同浓度药物，分别于2、12、24、48、72 h制成细胞悬液，加入罗丹明-123，流式细胞仪检测细胞的平均荧光强度。

　　4.统计学方法：t检验。

　　二、结果

　　1.阿霉素及合用逆转剂作用后MCF-7/ADR细胞的IC₅₀变化：阿霉素合用5 μmol/L异博定，并用TNF、IL-2、α-IFN，MCF-7/ADR的IC₅₀值分别下降1.33、 2.06、 2.00倍，单用TNF、IL-2、α-IFN的实验组，癌细胞的IC₅₀均有不同程度下降，但差异无显著性(P＞0.05)。

　　2.细胞素作用于耐药细胞后，MCF-7/ADR细胞内罗丹明-123药物浓度变化：TNF，α-IFN均能增加癌细胞内药物含量，但经t检验，TNF、IL-2作用组的含量增加差异无显著性(P＞0.05)。α-干扰素作用组t=2.95,P＜0.05，表明α-干扰素能显著增加耐药细胞内的药物含量。

　　3.合用阿霉素、异博定及细胞素，细胞内罗丹明-123药物浓度变化见表1。异博定及α-IFN合用后，耐药细胞内药物浓度比单用异博定显著增加(t=2.834,P＜0.05)，比不加逆转剂的对照组药物浓度明显增加。

表1　合用阿霉素、异博定及细胞素，细胞的罗丹明-123药物浓度的变化

　　三、讨论

　　本实验结果显示α-干扰素能显著增加耐药细胞内的罗丹明-123药物浓度，并使阿霉素对耐药细胞的杀伤力有所上升，IC₅₀略有下降，证实α-干扰素在乳腺癌的化疗中有可能部分逆转癌细胞的耐药性，为临床传统的乳腺癌化疗方案中增加使用α-干扰素提供了理论基础。异博定是能够逆转细胞多药耐药性的有效药物，但由于其逆转肿瘤耐药时所需要较高的血药浓度所产生的严重心脏毒性和其他副作用，而限制了其在临床上的广泛应用。本实验结果表明，α-干扰素、IL-2、TNF均可增强异博定对人乳腺癌耐药细胞系的阿霉素毒性作用。α-干扰素合用异博定时，经流式细胞术检测与单用异博定比较可显著增加耐药细胞内的罗丹明-123药物浓度。α-干扰素与异博定产生协同效应逆转肿瘤耐药性的机制可能是α干扰素能增加异博定与P糖蛋白的结合，经直接或间接膜反应为异博定提供更容易结合的P糖蛋白结合位点，并通过膜效应增加阿霉素的通透性，增加阿霉素的浓度，加强了阿霉素对耐药细胞的毒性。

　　我们在本实验中所使用的5×10⁵ U/L α-干扰素是在病人身上很容易达到且几乎没有副作用的浓度，而5 μmol/L异博定也是较低的浓度，临床上较易达到，提示应该合用α-干扰素和异博定进行临床Ⅰ～Ⅱ期实验，在减少副作用的基础上逆转肿瘤的耐药性，提高肿瘤的化疗水平。

　　参考文献

　　1，Stein U,Walther W.Modulation of mdr-1 expression by cytokines in hunan colon carcinoma cells:an approach for reversal of multidrug resistance. Br J Cancer, 1996，74:1384-1391.

　　2，张荣河，何三光.异搏定对乳腺癌细胞多药耐药性的逆转作用研究.中国医科大学学报，1999，28：426-427.

(收稿日期：1999-03-28)