细胞角蛋白20检测诊断大肠癌淋巴结转移的价值

山东医药 2000年第11期第40卷 实验与临床

作者：刘忠民　王明玉　毕维民　崔刚　叶欣　李毅　陈廷武

单位：泰安市中心医院271000

　　我们以细胞角蛋白20（CK20）作为大肠癌标记物，对39例大肠癌患者的260枚淋巴结进行了CK20mRNA检测，以判断大肠癌转移情况，现报告如下。

　　临床资料：本组男23例，女16例，年龄39～69岁，平均56.3岁。患者均经病理确诊，按Dukes分期A期3例，B期20例，C期12例，D期4例。260枚淋巴结均取自手术切除标本，每个淋巴结一分为二，1份送常规病理检查，另1份液氮速冻后，置－80℃冰箱保存备测。CK20 mRNA的检测采用逆转录－聚合酶链反应（RT-PCR）法。电泳后同时出现370bp　CK20扩增带和500bp　β-actin扩增带者为CK20 mRNA表达阳性，说明淋巴结中存在肿瘤细胞，即淋巴结有肿瘤转移；只出现500bp者为阴性。本组组织学检查检出29枚转移淋巴结，其CK20 mRNA均阳性；231枚组织学检查无肿瘤转移的淋巴结中，有13例（28枚）CK20 mRNA呈阳性表达，其中8例同时有淋巴结的组织学转移、5例只有淋巴结CK20 mRNA阳性表达。病理学淋巴结转移的检出率为11.1％，RT-PCR检出率为21.9％，二者比较差异有显著性（P＜0.01）。

　　讨论：淋巴结转移与否是影响大肠肿瘤预后的重要因素之一。常规的病理检测方法常低估转移，淋巴结连续切片或免疫组织化学方法虽可提高肿瘤的检出率，但费时费力，难以作为常规的检测方法。RT-PCR具有病理组织学和免疫组化技术不可比拟的敏感性，可以从10⁶～10⁷个正常组织细胞中检出一个肿瘤细胞，因而适用于微量肿瘤细胞的检测。CK20具有严格的上皮分布特征，在肠粘膜及结肠癌细胞株中呈阳性表达，而非上皮来源的细胞如正常血细胞、骨髓和淋巴结中不表达CK20。因此，如果大肠癌患者淋巴结有CK20表达，即可认为淋巴结存在肿瘤转移。本组39例大肠癌患者中，有16例患者的29枚淋巴结经病理学检查证实有肿瘤转移，CK20 mRNA检测均表达CK20。231枚常规病理检查无转移的淋巴结中，有28枚检测到CK20表达，即淋巴结存在肿瘤微转移。表明CK20 mRNA可提高大肠癌淋巴结转移的检出率，更加准确地了解大肠癌的淋巴转移规律，从而指导临床治疗。

　　本组常规病理检查未发现肿瘤转移的患者中，有5例淋巴结查见CK20 mRNA表达，提示有肿瘤淋巴结转移。根据常规病理检查结果，此5例患者为Dukes B期，但实际应属C期。可见检测大肠癌患者淋巴结CK20 mRNA的表达情况，可提高大肠癌临床分期的准确性，为术后选择治疗方案及判断患者预后提供可靠的依据。

收稿1999-12-20