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胃康复对胃癌前病变脾虚证胃粘膜上皮细胞超微结构的影响

胃康复对胃癌前病变脾虚证胃粘膜上皮细胞超微结构的影响

江苏医药 2000年第7期第26卷 论著

作者:尹光耀 张武宁 许福昌 何雪芬 陈一 沈小静

单位:尹光耀 何雪芬 沈小静(无锡市第三民医院 214041);陈一 张武宁(复旦大学国家微分析中心);许福昌(中国航空航天部激光医院)

关键词:肠上皮化生;不典型增生;胃康复冲剂;细胞核;线粒体

  【摘要】目的 观察胃康复冲剂对胃粘膜上皮细胞超微结构的影响。方法 应用胃康复冲剂治疗61例脾虚证胃粘膜肠化生和不典型增生患者,治疗前后均作胃镜检查,取胃窦部粘膜采用EM430型透射电镜,观察上皮细胞超微结构。结果 4组脾虚证在治疗后胃粘膜上皮细胞核、线粒体的超微结构均有不同程度的改善,P<0.05~0.001,趋向接近于健康对照组。结论 胃康复冲剂是通过改善胃粘膜上皮细胞核与线粒体的Zn、Cu、DNA含量和体内其他生物活性物质的水平,促进上皮细胞分化和亚细胞超微结构正常化,以维护机体内环境适应性调节机制,达到消除临床症状、逆转IM和ATP的效果。

Effect of Weikangfu Chongji on epithelial cellular ultrastructure of precancerotic gastric mucosa of patients with spleen deficiency Syndrome

YIN Guangyao,ZHANG Wuning,XU Fuchang

  (Wuxi NO.3Peoples Hospital 214041)

  【Abstract】Objective To observe the effect of Weikangfu chongji on the epithelial cellular ultrastructure of gastric mucosa.Method Weikangfu chongji was used to treat 61 patients with gastric mucosa IM and ATP.Both before and after the treatment,gastroscopy was conducted by taking mucosa from the antral region of stomach and observing the epithelial cellular ultrastructure through EM 430 Transmission electron microscope. Result After the treatment,the gastric mucosa epithelial nuclei and mitochondrial ultrastructure of the 4 groups of patients with spleen deficiency syndrome were improved to different degrees(P<0.05~0.001),and inclined to be as healthy as those of normal control group.Conclusion Weikangfu chongji might improve the content of Zn,Cu,and DNA in gastric mucosa epithelial nuclei and mitochondria and the level of other bioactive substances in the body,promote epithelial cell differentiation and the normalization of subcellular ultrastructure so as to maintain the regulating mechanism of the body adaptability to circumstances and to achieve the result of curing the clinical symptoms and reversing IM and ATP.

  【Key words】IM ATP   Weikangfu chongji   Nuclei  Mitochondria.

  采用胃康复冲剂与胃苏冲剂对照治疗115例胃粘膜肠上皮化生(IM)和不典型增生(ATP)患者[1],及对61例胃康复治疗的患者进行治疗前后胃粘膜组织病理和超微结构检测的基础上[2],同时对这61例患者进行治疗前后胃粘膜上皮细胞核、线粒体的超微结构观察比较,现报告如下。

  资料与方法

  一、临床资料 61例经胃镜在胃窦部取活检组织病理检查,明确诊断胃粘膜伴有IM或ATP患者,男43例,女18例,年龄32~68岁,平均44.24±11.08岁,病程1~10年,平均5.12±2.14年。其中,慢性浅表性胃炎(CSG)25例,慢性萎缩性胃炎(CAG)36例。

  二、脾虚辨证分型标准与分组 参照“中医虚证辨证参考标准”[3],将脾虚证分为:(1)脾气虚证13例,其中,CSG8例,CAG 5例;(2)脾阳虚证14例,其中,CSG 9例,CAG 5例;(3)脾阴虚证16例,其中,CSG 3例,CAG 13例;(4)脾虚气滞证18例,其中,CSG 5例,CAG 13例。15例志愿献血者经胃镜在胃窦部取活检组织病理检查明确诊断胃粘膜组织基本正常为健康对照组。

  三、治疗方法 胃康复基本方由黄芪、茯苓、白术、甘草、元胡、黄连、白芍等组成为Ⅰ号,用于脾气虚证;脾阳虚证加高良姜、吴茱萸为Ⅱ号;脾阴虚证加元参、麦冬为Ⅲ号;脾虚气滞证加陈皮、沉香为Ⅳ号。每日冲服3次,每次15 g,15天为1疗程,一般治疗3~6个疗程。

  四、观察方法

  1.取材 均作胃镜检查,在治疗前后取胃窦区同部位粘膜用于制作组织切片和透射电镜标本。

  2.胃粘膜上皮细胞超微结构观察 采用EM430型透射电镜,对每例患者3处粘膜标本,统一于5个放大倍数(3600,7200,14000,19000,29000倍)随机拍摄全貌、局部和细胞器。

  五、统计方法 采用χ2和t检验。

  结  果

  在胃康复冲剂治疗后,61例患者症状疗效、病理疗效和脾虚证疗效均有不同程度的改善,P<0.05~0.01。

  一、健康对照组胃粘膜上皮细胞 粘液细胞为柱状上皮细胞,游离面有短小微绒毛,胞质内有粘液颗粒、粗面内质网和线粒体。主细胞胞质内有粗面内质网、分泌颗粒、高尔基体和线粒体(图1)。壁细胞呈圆锥形,锥顶端向腺腔,核在细胞中心,胞质内充满小泡状光滑内质网(分泌盐酸)、细胞内小管(输送盐酸)和丰富的线粒体。内分泌细胞较小,核呈圆形位于细胞基底部,胞质中可见大量小球形内分泌颗粒、粗面内质网、线粒体,高尔基体位于细胞核附近。

  1.上皮细胞核 核呈圆形或椭圆形,核被膜略有曲折,分叶核极少,核与胞质截面积比(核质比)小于1;核内染色质呈散在分布、随核仁分布和沿核周分布,核中央异染色质间的浅亮区是常染色质,核仁有较高电子密度,无被膜包裹(图2)。

  2.上皮细胞线粒体 线粒体为圆形或椭圆形,散在于细胞核周围。线粒体由外膜、内膜、外室、内室与嵴组成。嵴由内膜向内折叠而成,为中空管道,与外室相通(图3)。有些线粒体嵴直通细胞质(图4)。嵴通常呈板层状排列,互相平行,并垂直于线粒体长轴。

  二、脾虚证胃粘膜上皮细胞 细胞游离面微绒毛脱落,细胞间隙增宽,细胞连接减少。粗面内质网扩张呈环状排列;高尔基体萎缩,失去其典型的结构;胞质内分泌颗粒减少。壁细胞胞质内小管扩张,微绒毛变短变细或消失。

  1.脾虚证上皮细胞核 分化差的上皮细胞其核质比大于1,分叶核增多(图5);染色质间颗粒或染色质周颗粒密集增多,常染色质增多;核仁肥大靠近核边缘(称核仁边集)。衰老退化的上皮细胞核缩小,核质比更小;异染色质密集于核周围,核中心电子密度低,核呈圈状(称染色质边集)(图6);核皱缩呈齿状,核内呈中等均匀电子密度,见不到染色质(称染色质均匀化)。

  2.脾虚证上皮细胞线粒体 线粒体肿胀肥大、固缩和透明变性,乃至空泡变性,畸形线粒体,呈C字型或U字型(图7)。线粒体嵴有之字嵴、纵向嵴、稀疏嵴和致密嵴,嵴排列紊乱,有些嵴呈网状结构(图8)。线粒体及嵴的数目减少。

图1 胄粘膜上皮细胞 图2 上皮细胞核核仁无被膜包裹 图3 线粒体嵴直通细胞质 图4 细胞间隙境宽 图5 细胞核分叶,核呈圈状,核质比大于1 图7 线粒体畸形,呈C字形 图 8线粒体峭呈网状状排列

  三、胃康复冲剂治疗后胃粘膜上皮细胞

  1.上皮细胞核的变化 胃康复治疗后,4组脾虚证胃粘膜上皮细胞核的超微结构均有显著性改善,P<0.05~0.001,趋向接近于健康对照组,见表1。

  2.上皮细胞线粒体的变化 胃康复治疗后,4组脾虚证胃粘膜上皮细胞线粒体的超微结构均有显著性改善,P<0.05~0.001,趋向接近于健康对照组,见表2~3。

表1 胃康复对癌前病变脾虚证胃粘膜上皮细胞核超微结构的影响

组别 例数 外  形 染色质 核  仁
    核质比>1

  个(%)

核分叶

  个(%)

边集或均匀化

  个(%)

周间颗粒密集

  个(%)

肥大或边集

  个(%)

圈状

  个(%)

健康对照组 15 1(6.67) 1(6.67)
脾气虚证 疗前 13 2(15.38) 1(7.69) 6(46.15) 2(15.38) 3(23.08) 3(23.08)
疗后   2(15.38) 1(7.69) 1(7.69)
脾阳虚证 疗前 14 3(21.42) 2(14.29) 8(57.14) 4(28.57) 3(21.43) 3(21.43)
疗后   3(21.42) 1(7.14)
脾阴虚证 疗前 16 5(31.25) 5(31.25) 4(25.00) 7(43.75) 6(37.50) 3(18.75)
疗后   1(6.25) 1(6.25) 2(12.50) 3(18.75) 2(12.50) 1(6.25)
脾虚气滞证 疗前 18 8(44.44) 8(44.44) 6(33.33) 9(50.00) 9(50.00) 5(27.78)
疗后   3(16.67) 2(11.11) 2(11.11) 3(16.67) 3(16.67) 2(11.11)

  注:χ2检验,治疗前后%率比较,△P<0.05,○P<0.01,☆P<0.001;表2、3标记与此相同(唯表2~3是t检验)。

表2 胃康复对癌前病变脾虚证胃粘膜上皮细胞线粒体的影响
组别 例数 线粒体超微结构 线粒体嵴
数目

  个

肿胀肥大

  (%)

基质变淡

  (%)

空泡变性

  (%)

固缩

  (%)

数目

  个

断裂与排列紊乱

  (%)

健康对照组 15 86.47±27.34 3.37±1.61 3.04±1.14 2.87±1.97 1.07±0.84 12.84±3.15 2.23±1.07
脾气虚证 疗前 13 69.12±26.18 7.81±2.74 7.15±4.28 6.23±3.21 1.81±1.21 9.79±6.19 6.27±3.07
疗后   89.24±23.15 4.87±2.17 3.87±3.32 3.75±2.36 1.17±0.63 13.67±4.12 3.25±4.13
脾阳虚证 疗前 14 69.03±25.17 7.96±3.58 7.67±4.31 7.48±3.09 1.97±1.26 8.14±3.26 7.31±4.12
疗后   90.29±24.25 4.63±3.24 3.74±2.74 3.77±2.37 1.11±0.61 11.33±4.53 3.78±2.87
脾阴虚证 疗前 16 54.38±20.74 10.77±4.06 11.48±6.17 11.55±7.46 3.75±0.89 6.27±3.26 9.27±2.17
疗后   70.03±21.87 7.57±4.27 6.14±5.24 5.84±4.79 2.67±0.73 9.47±4.89 6.83±3.74
脾虚气滞证 疗前 18 47.54±19.23 12.55±4.13 13.21±7.12 14.21±6.87 4.97±1.12 5.16±2.74 10.53±3.96
疗后   63.07±24.28 9.27±4.66 6.87±5.76 7.13±4.66 3.83±0.77 8.01±4.67 7.49±4.54

 表3 胃康复对癌前期病变脾虚证胃粘膜上皮细胞线粒体腔径比值的影响

组别 例数 线粒体内室内经

  与外室内经比值

线粒体内室内经

  与嵴间腔内经比值

健康对照组 15 20.71±6.54 23.63±3.48
脾气虚证 疗前 13 16.24±5.12 20.36±3.57
疗后   20.17±4.28 23.81±4.25
脾阳虚证 疗前 14 16.35±4.17 19.86±3.74
疗后   20.38±5.29 23.28±4.16
脾阴虚证 疗前 16 14.19±3.87 18.37±3.19
疗后   17.47±4.28 21.45±4.29
脾虚气滞证 疗前 18 13.14±3.23 17.28±4.12
疗后   16.54±4.26 19.83±4.37

  讨  论  脾虚证胃粘膜上皮细胞核质比>1的发生率、核分叶的发生率、染色质周间颗粒密集的发生率、核仁肥大的发生率、线粒体退变发生率和线粒体嵴退变发生率等,随着脾气虚证、脾阳虚证、脾阴虚证和脾虚气滞证的顺序递增,而线粒体和嵴的数目,则随上述顺序递减;应用胃康复冲剂治疗后,以上胃粘膜上皮细胞的亚细胞超微结构在4组脾虚证型均有不同程度的显著性改善,P<0.05~0.001。由此证明:胃康复冲剂消除临床症状,逆转IM和ATP,是通过改善胃粘膜上皮细胞核与线粒体Zn、Cu、DNA;提高胃粘膜组织Zn、Cu、cAMP和SOD和细胞免疫功能水平,降低氧自由基和LPO水平[1],促进细胞分化和亚细胞超微结构正常化,以维护机体内环境适应性调节机制而实现的。

  参考文献

  1,尹光耀,何雪芬,张武宁,等.胃康复治疗脾虚证胃癌前病变的疗效及其对胃粘膜Zn、Cu、cAMP、SOD、LPO和3H-TdRLCT的影响.中国中西医结合杂志,2000,20:177-180.

  2,沈自尹,王文健.中医虚证辨证参考标准.中西医结合杂志 1986;(10):598.

(收稿:2000-04-02)


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