nm23-H1　NDPK在胃癌中表达的研究

江苏医药 2000年第1期第26卷 短篇论著

作者：王志伟　黄健　李厚祥　沈洪薰　朱铭岩

单位：王志伟（226001　南通医学院附属医院普外科）； 黄健（226001　南通医学院附属医院普外科）； 李厚祥（226001　南通医学院附属医院普外科）； 沈洪薰（226001　南通医学院附属医院普外科）； 朱铭岩（226001　南通医学院附属医院普外科）

　　nm23基因被多数学者认为是肿瘤转移抑制基因，它对胃癌转移抑制功能尚有争论。我们对1998年1月～11月期间收治的58例胃癌，免疫组化法检测其nm23-H₁、NDPK表达差异，现报告如下。

　　一、材料与方法

　　1．一般资料：58例胃癌中，男38例，女20例，男女之比为1.9∶1。年龄最小者18岁，最大者92岁，平均年龄56.7岁。58例均施行胃切除术，根治性胃切除术39例（67.2％），姑息性胃切除术19例（32.8％），PTNM分期Ⅰ期4例（6.9％），Ⅱ期14例（24.1％），Ⅲ期21例（36.2％），Ⅳ期19例（32.8％），全组无手术死亡，均治愈出院。

　　2．标本来源与处理　胃癌切除标本取部分胃癌组织和转移淋巴结置10％福尔马林固定，常规石蜡包埋，以备检测nm23-H₁　NDPK。

　　3．免疫组化（S-P法）检测nm23-H₁　NDPK（福州迈新试剂盒）。

　　（1）将胃癌组织切片经脱蜡水化，H₂O₂阻断，血清封闭，nm23抗体，4℃水箱孵育过夜，生物素标记二抗，链菌素亲生物蛋白-过氧化物酶溶液，DAB显色，阴性对照用TBS替代一抗。

　　（2）肿瘤细胞阳性表达以细胞浆内出现明显的棕色颗粒沉淀为标准，切片中超过20％肿瘤细胞阳性表达，则定为nm23-H₁　NDPK反应阳性。

　　4．统计方法：确切概率法。

　　二、结果

　　nm23-H₁　NDPK表达

　　（1）胃癌原发灶组（n＝58）　58例胃癌原发灶中，33例（56.89％）nm23-H₁　NDPK呈高表达（＞20％肿瘤细胞阳性表达），比较T₁、T₂、T₃、T₄之间nm23-H₁　NDPK表达差异，P＝0.419（P＞0.05），显示nm23-H₁　NDPK表达与肿瘤浸润深度无关。

　　（2）淋巴结转移组（n＝31），nm23-H₁　NDPK高表达占41.94％（13／31），淋巴结无转移组（n＝27）nm23-H₁　NDPK高表达占74.07％（20／27），比较淋巴结无转移组与转移组之间nm23-H₁　NDPK表达差异，P＜0.05，显示nm23-H₁　NDPK表达与淋巴结转移呈负相关（见表1）

　　三、讨论

　　影响肿瘤转移的因素很多，有宿主的因素如AIF、EGIF、FCM、PAI及性激素等，还有肿瘤细胞本身，包括肿瘤细胞的运动性、肿瘤细胞粘连性、肿瘤细胞分泌物如TIMP的减少或缺乏，肿瘤转移相关基因和肿瘤转移抑制基因等。nm23基因是肿瘤转移抑制基因，由Steeg-PS等从K1735鼠黑色瘤细胞株分离出来的，与肿瘤转移过程有关。在低转移细胞株中表达水平最高。nm23基因定位于人染色体17q21-3，nm23-H₁和nm23-H₂两种，它们受两个独立的调控系统所调节，其中nm23-H₁ mRNA水平与肿瘤转移更为密切，其编码产物二磷核苷激酶（Nucleoside diphosphokinase，NDPK），此酶通过调节细胞内信号传递、分化等代谢过程，影响微管、微丝等细胞骨架蛋白的生物活性而发挥生长抑制的负性调节。

表1　胃癌原发灶与淋巴结转移灶中nm23-H₁　NDPK表达

　　研究nm23基因始于黑色瘤细胞株和N-nitroso-N-methylurea诱发鼠乳腺癌。胃癌中nm23基因表达研究报告不多。胃癌原发灶中nm23基因高表达报告不一，国外学者报告介于75％～85％之间。国内黄明哲报告88.9％。本组胃癌原发灶nm23-H₁　NDPK高表达为56.89％（33／58），比国内外各家报告为低，推测本组胃癌中晚期（Ⅲ期36.2％，Ⅳ期32.8％）病例偏多，高转移细胞比例可能过多所致，有人报告低转移细胞株中nm23基因表达水平为高转移细胞株的10倍。

　　nm23基因表达与胃癌转移关系报告仍有争论，Ura-H和Aoyagik报告nm23-H₁表达水平与淋巴结转移呈负相关，Wang-CS报告与此相反，nm23-H₁表达水平与胃癌淋巴结转移无明显抑制作用。本研究结果nm23-H₁　NDPK高表达水平在淋巴结转移组为41.9％，显著低于淋巴结无转移组的74.07％，P＜0.05，与Ura-H和Aoyagik报告相一致，证实nm23-H₁　NDPK在胃癌转移过程中起着重要的抑制作用。

　　nm23-H₁　NDPK表达与胃癌原发灶浸润深度无关，与淋巴结转移呈负相关。它在胃癌淋巴结转移过程中起着重要的抑制作用。■