肝癌患者血清及癌组织中β-葡糖醛酸酶活性改变及临床意义

世界华人消化杂志 1999年第5期第0卷 临床经验

作者：杨波　朱善德　于众　张弘　杜晓炬　康健　蒲菲菲

单位：杨波　朱善德　杜晓炬　康健　蒲菲菲　沈阳军区总医院肝胆外科　辽宁省沈阳市　110015； 于众　张弘　（中国医科大学病理教研室　辽宁省沈阳市　110001

关键词：肝肿瘤；葡糖醛酸酶/ 分析；癌，肝细胞

　　Subject headings　liver neoplasms; glucuronidase/ analysis; carcinoma, hepatocellular

　　中国图书馆分类号　R 735.7

　　采用ELISA及免疫组化方法检测HCC患者血清及癌组织中β-G活性变化，旨在对β-G与HCC的关系进行探讨.

　　1　材料和方法

　　1.1　材料　共选取HCC患者63例，其中42例行手术切除治疗，取术前及术后l wk空腹静脉血；42例手术切除肝癌组织标本，均经病理确诊，其中高分化者16例，中低分化者26例. 另取106例健康献血员，13例肝外伤手术切除肝组织石蜡切块标本为对照组.

　　1.2　方法

　　1.2.1　血清学检测　血标本均为空腹静脉血，用量3 mL，离心后取血清在-40℃保存. 为减少误差，取相近时期健康献血员血清，用ELISA法测定. 样品吸光度值/ 阴性对照吸光度值≥2为阳性. 阳性样本以倍比方式稀释至阴性时的滴度为测得值，单位为滴度，方法参照文献1.

　　1.2.2　组织学检测　分别对42例肝癌组织及13例对照组标本取材，经常规制作石蜡连续切片，厚度4 μm. 抗β-G单克隆抗体工作浓度为1∶200，采用ABC法，每例均用PBS代替Ⅰ抗作空白对照，光镜观察. 着色标准：细胞浆内出现棕黄色颗粒为β-G阳性反应细胞，每例标本记数200个细胞，以每100个计数的细胞中呈阳性反应细胞数表示. 根据β-G阳性反应细胞数量分为三组，阳性细胞百分率≤25%为(-)，25%～50%为(+)，50%～75%为(++)，＞75%为(+++).

　　2　结果

　　肝癌患者血清β-G活性滴度(15.86±1.58)与正常对照组β-G活性滴度(6.71±1.11)比较有非常显著差异(P＜0.01). 其中术后(8.74±1.16)比术前(16.05±1.60)显著降低，有非常显著差异(P＜0.01). 组织学比较，肝癌组织细胞β-G阳性率(71.4%±3.4%)较对照组阳性率(28.3%±4.2%)有非常显著性差异，P＜0.01. 肝癌分化程度与β-G表达阳性率的关系示，肝癌分化愈差，β-G表达阳性率愈高，呈正相关关系(r=0.637，P＜0.01)，见表1.

　　　表1　肝癌分化程度与β-G表达阳性率的关系

　　3　讨论　　β-G是细胞溶酶体中酸性水解酶，参与体内细胞的物质代谢，其前身在附有多聚核糖体的膜上合成的，而后进入内质网，再移位于高尔基复合体，由6-磷酸受体转移到溶酶体，在此聚集、加工、成熟为各种酶，完成一定生理功能^［2］. 作用部位在于葡糖醛酸甙的β-糖苷键. 且该酶具有参与细胞增生的生理功能^［3］. 研究表明，β-G可以水解癌周结缔组织中的蛋白多糖及糖蛋白，破坏其网状结构的防御作用，有利于癌细胞的浸润及扩散^［4］，当机体组织细胞发生恶变时，该酶含量增加^［5，6］. β-G在肝组织中含量最多^［7］，为探讨HCC与β-G关系，采用ELISA及免疫组化法联合检测HCC患者血清及癌组织中β-G的整体性变化.

　　本研究表明功能学上，肝癌患者血清β-G活性与正常人有质的差异，术前术后也有质的差异. 肝癌患者与正常人组织细胞间的β-G表达在形态学上亦有质的差异；β-G的过量表达与肝脏正常 细胞由转化致恶变的演变过程及程度直接相关.

　　我们认为：β-G在肝癌患者血清及癌组织中的异常增高，是由癌细胞自身的生物学特性决定，缘于肿瘤细胞为适应其快速、过度增殖和异常分化的自主性生长的生存方式而产生的自我调控，由其自身独特的生长方式决定并成为内因的.

　　通讯作者：杨波

　　4　参考文献

　　[1]　杨波，蒲菲菲，康健，范剑非，杜晓炬，李顺明，朱善德，邢婕. ELISA测定血清β-葡萄糖醛酸酶及临床应用. 临床检验杂志， 1998;16:300

　　[2] 杨波，朱善德，杜晓炬，李顺明，杨捷润，李荫山. 人肝细胞超微结构β-葡萄糖醛酸酶分布的定位定量研究及意义. 中华实验外科杂志， 1996;13:342

　　[3] Finch PJ, Ryan FP, Rogers K. Gastric enzymes as a screening test for gastric cancer. Gut, 1987;28:319

　　[4]　苗德林，黄幼蓉，程本宽. 胃癌细胞的β-葡萄糖醛酸酶及β-N-乙酰葡萄糖胺酶与浸润的关系. 中华病理学杂志， 1987；16：269

　　[5]　杨波，岳辉，范剑非，张宏，朱善德，杜晓炬，于安民. β-葡萄糖醛酸酶与肝细胞癌关系的免疫电镜研究. 中华肝脏病杂志， 1998；6:105

　　[6] 游学俊，谭慎微. 头颈部恶性肿瘤患者β-葡萄糖醛酸酶活性的检测. 中华耳鼻喉科杂志， 1996;31:181

　　[7] Ho KJ. Pathogenesis of the formation of pigment gallstons. The role of human biliary β-Glucuronidase. Medicine Today. 1992;155:694

收稿日期：1998-11-09　修回日期：1999-01-04