免疫性不育、不孕检测的临床意义
黑龙江医药科学 1999年第3期第22卷 临床研究
作者:欧玉清 继强 和庆余 刘向东
单位:欧玉清 继强:佳木斯大学医学院中心实验室;和庆余:佳木斯大学医学院病生教研室;刘向东:巴彦县卫生院检验科
关键词:抗精抗体;抗卵巢抗体;抗子宫内膜抗体;抗人绒毛膜促性腺激素抗体;酶联免疫吸附法
提要 本文应用酶联免疫吸附法(ELISA),检测不育、不孕症患者血清、精液、宫颈粘液中的抗精抗体(AsAb),抗子宫内膜抗体(AEMAb),抗卵巢抗体(AovAb),抗人绒毛膜促性腺激素抗体(AhcGAb)。实验结果发现,部分患者上述相应的抗体为阳性,这提示上述四种抗体对免疫性不育、不孕具有一定的临床检测意义。
Clinical significance of the detection of immune infertility and sterility
Ou Yuqing, et al
Abstract The antisperm antibody(AsAb), antiendomembrane antibody(AEMAb), antiovarium antibody(AovAb), and antihuman chorionic gonadotropin antibody(AhcGAb), of the serum, sperm and cervical mucus were detected in the patients with infertility and sterility using ELISA. The results showed that the antibodies above-mentioned were positive in some patients, suggesting that it was of some clinical significance to the immune infertility and sterility to detect the above antibodies.
Key words antisperm antibody; antiendomembrane antibody; antiovarium antibody; antihuman chorionic gonadotropin antibody; ELISA
1900年metalnikov发现,精子具有诱发特异性自身免疫和同种免疫的能力。为了研究不育问题,科学家们经过大量实验室和临床证明,虽然引起自身抗体和同种抗体的病因学尚不清楚,但他们是与不育不孕有关的。据文献报道,育龄期夫妇中不孕者约占10%,其中约有30%是由免疫性因素造成的[1],而男性不育患者血清和精液中抗精抗体的阳性率约为3.5%,女性不孕患者血清和宫颈粘液中抗精抗体阳性率比男性高一倍以上[2]。本文应用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测如下四种可导致不育,不孕的抗体:抗精抗体(AsAb)、抗子宫内膜抗体(AEMAb)、抗卵巢抗体(AovAb)、抗人绒毛膜促性腺激素抗体(AhcGAb)。从而为免疫性不育、不孕的诊断和治疗提供可靠的依据。
1 材料和方法
随机选择正常生育男性自愿者20人,正常生育女性自愿者20人为对照组。不育男性30人,不孕女性30人为实验组。分别采集精液、宫颈粘液和血液样品待测。(ELISA)药盒由北京医科大学生殖医学研究中心提供。
2 样品检测
①按药盒说明书要求将洗液、二抗、底物A、底物B、底物C配制好。②将待测血清10ul+90ul洗液,精浆、宫颈粘液用原液每孔加100ul;阳性对照血清10ul+90ul洗液;空白孔加洗液100ul;置室温2h。③洗涤6次,甩干,每孔加二抗100ul,置室温2h。④洗涤6次,甩干。每孔分别加底物液100ul(底物液的配制:将底物A 0.5ml、底物B 4.5ml、底物C 4ul混合后即刻使用),避光置室温10~20min,当阳性对照孔出现天蓝色后,即可加终止液每孔30ul,判定结果以酶标仪OD450定量。
3 结果与讨论
正常生育男、女对照组四种抗体检测的结果均为阴性。而实验组30名男性中,有3人精液的抗精抗体为阳性,有2人血清的抗精抗体为阳性。实验组的30名女性中,宫颈粘液抗精抗体为阳性的1人,血清抗精抗体为阳性的1人、抗子宫内膜抗体为阳性的5人、抗卵巢抗体为阳性的1人、抗人绒毛膜促性腺激素抗体为阳性的3人。本文采用酶联免疫吸附法检测了可能导致不孕的四种抗体,其检测的临床意义如下。①抗精抗体(AsAb),男女体内都可能存在抗精抗体,精液内存在多种抗原,这些抗原在女性生殖道中,可经宫颈上皮吸附后产生免疫反应。在女方血液和生殖道局部产生抗精子抗体,这种抗体可影响精子的运行,导致不孕。正常情况下,男性体内不会产生自身的抗精抗体,但当男性输精管发生炎症和某些病变时,精液就可能渗漏到外围组织中去,从而产生自身的抗精抗体,导致不育[2,3]。②抗子宫内膜抗体(AEMAb),当女性子宫内膜有炎症时,可能转化成抗原或半抗原,刺激机体自身产生相应的抗体。此外,人工流产刮宫时,胚囊也可能作为抗原刺激机体产生抗体。便会导致不孕、停孕或流产。不少女性因在初次妊娠时作了人工流产,而继发不孕,这种继发不孕患者多数是因体内产生抗子宫内膜抗体所致不孕。③抗人绒毛膜促性腺激素抗体(AhcGAb),人绒毛膜促性腺激素(hcG)是维持早期妊娠的主要激素。但是有自然流产史的女性,在流产过程中,绒毛膜组织中的hcG可能作为抗原刺激母体产生抗体,曾接受过hcG注射以治疗功能性子宫出血或促进排卵的妇女中,其体内的抗hcG抗体也有可能为阳性,此类患者可在临床表现为不孕或习惯性流产[1,4]。④抗卵巢抗体(AovAb),在六、七十年代,已发现卵巢存在特殊抗原。近年来报道抗卵巢自身免疫可影响卵巢的发育和正常功能,从而导致卵巢衰竭和卵泡成熟前闭锁而导致不孕。
参考文献
1.天津科技出版社编.实用男性学.第1版,天津:天津科技出版社1988;107~111
2.李潭,易英.消除抗体治疗不孕.健康报,第4版,1996年5月25日
3.Alexander HJ lmmunology of semen, Fertil steril 1987;47,192
4.沙家豪,周作民,胡志刚.人精自有效抗原的分析.男性学杂志,1993;7(2)98
(1998-09-13收稿)