高效液相色谱法测定痤疮霜的含量

中国现代应用药学 2000年第3期第17卷 医院药学

作者：刘建红　吴民　管继萍　袁涛　朱春梅

单位：克拉玛依 834000 新疆克拉 玛依石油管理局总医院

关键词：高效液相色谱法；甲硝唑；氯霉素

　　摘要　目的：测定痤疮霜中甲硝唑和氯霉素的含量。方法：高效液相色谱法，以地塞米松为内标,Nova-Pak c₁₈柱，甲醇-水为流动相；测定波长260nm。结果：一次进样可完成2种化学性质不同组份的含量分析。甲硝唑9.94～109.34μg/ml,氯霉素4.92～54.12μg/ml范围内，峰面积与其浓度呈良好的线性关系；平均回收率依次为97.31%,RSD=0.94%;98.12%,RSD=0.78%(n=5)。结论：方法简便，结果满意，适于医院制剂分析。

Assay of Zhuochuangshuang by HPLC

Liu jianhong(Department of Petroleum Hospital Kelamayi Xinjiang,Kelamayi 834000)

　　wu Ming(Department of Petroleum Hospital Kelamayi Xinjiang,Kelamayi 834000)

　　guan Jiping(Department of Petroleum Hospital Kelamayi Xinjiang,Kelamayi 834000)

　　ABSTRACT　OBJECTIVE：To separate and determine the co ntents of metronidazole and chlormycetin in zhuochuangshuang.METHODS:A HPLC method was used with a column of Nova-Pak C₁₈.Dexamethasone was u sed as internal standard.The mobile phase consist of methanol and water.The dete cting wavelength was 260nm.RESULTS:The separation and determination of two constituents were accomplished by only one sample inject.The calibration curves were linear in the range of 9.94～109.34μg/ml for metronidazole,and 4.92 ～54.12μg/ml for chloromycetin.The average recoveries of metronidazole,chloromy cetin were97.31%(RSD=0.94%),98.12%(RSD=0.78%,n=5) respectively.CONCLUSION:This method was simple and quick for the simultaneous determination of the contents in Zhuochuangshuang.

　　KEY WORDS　HPLC,metronidazole,chloromycetin

　　我院制剂痤疮霜在临床用于治疗痤疮，疗效较好，其主要有效成分为甲硝唑、氯霉素。本文采用以地塞米松为内标，用高效液相分离测定霜剂中这2种成分的含量。本方法准确、快速且峰形好，样品回收率高而稳定，适于医院的质量分析。

　　1　仪器与药品

　　Waters液相色谱仪510泵，486紫外检测器,Millennium 2010液相色谱数据处理软件;UV-2100紫外分光光度计；色谱柱为Nova-Pak c₁₈柱(3.9×150mm,4μg)。

　　甲硝唑、氯霉素、地塞米松对照品(中国药品生物制品检定所)，以上对照品经面积归一化测定含量均在99.5%以上。甲醇为色谱纯，痤疮霜为我院配制，所用试剂均为分析纯。

　　2　方　法

　　2.1　色谱条件

　　色谱柱为3.9×150mm不锈钢柱，固定相为Nova-Pak C₁₈ ;流动相为甲醇-水(30∶50),流速1.30ml/min;测定波长260nm;检测灵敏度0.001。

　　2.2　系统适用性试验

　　在该色谱条件下的色谱图可见，甲硝唑、氯霉素的理论塔板数分别为1100，2000。基质峰1与甲硝唑、甲硝唑与氯霉素、氯霉素与地塞米松的分离度依次为2.2，6.5和5.1。

　　2.3　标准曲线的制备

　　2.3.1　内标液的配制　精密称取地塞米松25.12mg于100ml量瓶中，加甲醇至刻度，配成浓度为251.2μg/ml。

　　2.3.2　标准液的配制　分别精密 称取甲硝唑、氯霉素对照品49.7和24.6mg于100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得混合标准液。

　　2.3.3　标准曲线的制备　于10ml量瓶中，加入内标液1ml,再分别加入上述混合标准液0.2,0.6,1.0,1.4和2.2ml,加甲醇至刻度，摇匀。进样10μl,以各组分与内标的峰面积比A与进样浓度c进行回归，得线性方程：甲硝唑:A=0.1668c+0.5800,r=0.9998;氯霉素:A=0.2973c+0.5001,r=0.9998。线性范围分别为：甲硝唑：9.94～109.34μg/ml,氯霉素：4.92～54.12μg/ml。

　　2.4　样品分析

　　精密称取痤疮霜2.5g,加甲醇30ml,于50℃水浴上溶解，再放置冰浴上使基质析出，滤过，滤液置100ml量瓶中，用适量甲醇洗涤容器及滤器，洗涤液并入量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。精密吸取该液1ml置10ml量瓶中，另加内标液1ml,用甲醇稀释至刻度，摇匀后即可进样分析，进样量为10μl。

　　2.5　干扰性实验

　　按处方量取空白基适量(约2.4g),照上述方法处理测定，可见基质不干扰痤疮霜中2种有效成分的测定。

　　2.6　加样回收率测定

　　取痤疮霜约2.5g,精密称定，精确加入一定量甲硝唑，氯霉素标准品，按上述样品分析方法同样操作，进行加样回收率测定。甲硝唑的回收率为97.31%(RSD=0.94%,n=5);氯霉素的回收率为98.12%(RSD =0.78%,n=5)。

　　2.6　方法重现性考察

　　将测定回收率的样品溶液分别在日内的不同时间(4,8,12和16h)和日间(1,2和3d)进样进行HP lC分析。结果甲硝唑的日内精密度为RSD=0.71%(n=5)，日间为RSD=0.32%(n=3)；氯霉素的日内精密度为RSD=1.34%( n=5)，日间为RSD=0.56%(n=3)。表明方法的重现性 好。

　　2.7　样品分析结果

　　取痤疮霜(批号990202)约2.5g，精密称定，按样品分析方法同样操作进行含量测定，结果见表1。

表1　痤疮霜中有效成分的含量/n=3

　　3讨　论3.1　用甲醇将痤疮霜在微热的情况下溶解，冷却后过滤，这样既可将样品中的有效成分提取完全，又可排除基质的干扰，因在冰浴中霜剂中的基质可析出。

　　3.2　本文采用的内标法测定，操作简单，灵敏度高，为复方制剂的质量控制提供了一种简便、快速而准确的分析方法。

收稿日期：1999-05-21