中国人β₂受体遗传多态性与哮喘关系的研究

中华结核和呼吸感染 2000年第7期第23卷 论著摘要

作者：邱玉英　殷凯生

单位：210029 南京医科大学第一附属医院呼吸科

　　β₂肾上腺素受体（β₂ AR）基因与哮喘的关系一直受到广泛的重视。由于不同种族间等位基因的多态性分布不同,因此目前尚不能肯定β₂ AR基因的变异与我国哮喘的发病有何关系。为此我们建立了一种非放射性聚合酶链反应-等位基因特异性寡核苷酸（PCR-ASO）杂交法,从分子水平上对我国汉族人群β₂ AR 16和27 位点的遗传多态性进行了分析,并探讨这一多态性和哮喘之间的关系。

　　对象与方法　59例哮喘患者（哮喘组）均为居住在南京地区的汉族人，男27例, 女32例,平均年龄(42±5)岁，其中轻度26例，中度22例，重度11例（缓解期）；72名健康对照者(正常对照组)为同期来本院健康体检者,男34名,女38名,平均年龄(43±6)岁。

　　取抗凝血5 ml,用常规的酚氯仿法提取DNA，采用PCR-ASO杂交法^［1,2］扩增目的基因及检测β₂ AR遗传多态性。

　　统计学处理采用χ²检验。

　　结果　中国汉族正常人群和哮喘患者β₂ AR 16、27 位点基因型和等位基因分布频率比较差异均无显著性（P＞0.05,表1）。

表1　正常人群和哮喘患者β₂ AR 16、27位点基因型和等位基因的分布频率

　　注：哮喘组与正常对照组比较P＞0.05

表2　中国汉族与英国高加索哮喘人群β₂ AR 16、27位点基因型分布频率

　　中国汉族与英国高加索哮喘患者β₂ AR 16和27位点基因型分布频率的比较， 16位点差异无显著性（P＞0.05），27位点差异有显著性（P＜0.05,表2）。

　　中国汉族不同严重程度哮喘患者β₂ AR 16、27 位点等位基因分布频率间比较差异无显著性（P＞0.05），但对于16位点重度与轻、中度比较，Gly16频率明显增加（OR分别为3.86,3.75）,而27位点差异无显著性（OR分别为1.08,1.00，表3）。

表3　不同严重程度的哮喘患者β₂AR16、27位点等位基因分布频率

　　讨论　β₂ AR是一种典型的耦联G蛋白的膜受体。人类β₂ AR 基因位于染色体5q 31上。Reishaus等^［3］于1993年发现β₂ AR基因编码区存在着9个的突变位点 ,其中4个可导致氨基酸序列的改变,从而使编码的第16、27、34和 164 位氨基酸分别发生Arg→Gly、Gln →Glu、Val→Met和Thr→Ile的改变,其中前两个突变较为常见,后两个较少见，且突变率在正常人群和哮喘患者之间差异无显著性, 但在一部分哮喘患者发病机制中扮演一辅助角色。该研究结果显示，哮喘患者β₂ AR 功能不良是由于基因点突变引起,而非后天获得。本组试验研究结果证明，β₂ AR 遗传多态性并非我国汉族哮喘发病的决定因素。中国汉族哮喘人群β₂ AR 16和27位点基因型分布频率不同于英国高加索人群^［2］，说明人种不同,其β₂ AR的遗传多态性也不同。中国汉族轻、中、重度哮喘患者β₂ AR 16位点等位基因分布频率虽差异无显著性，但两两比较，轻度与重度、中度与重度之间差异均有显著性,Gly16在重度哮喘患者中频率明显增高，提示β₂ AR 16 位点与哮喘严重程度有关。而研究人员在重组表达体系中发现，Gly 16与Arg 16相比较具有增加激动剂所促发的受体下调作用^［4］。因此可以推测，重度哮喘患者使用β₂ AR激动剂后，受体下调数目增加易致失敏，从而对β₂ AR激动剂反应不佳，治疗效果不好，此现象可能与β₂ AR 16位点的遗传多性有关。以上研究结果表明，虽然β₂ AR不是哮喘发病的决定因素， 但在哮喘发病过程中以及对治疗的反应中起重要作用，β₂ AR 16位点可能是重度哮喘发病的重要遗传因素之一。

　　基金项目：江苏省教委自然科学研究基金资助（1031298010）

参考文献

　　1，Dewar JC, Wilkinson J, Whealtley A, et al. The glutamine 27 β₂-adrenoceptor polymorphism is associated with elevated IgE levels in asthmatic families. J Allergy Clin Immunol,1997,156:261-265.

　　2，Gunneberg A, Scobie G, Hayes K, et al. Competitive assay to improve the specificity of detection of single-point mutations in α1-antitrypsin deficiency. Clin Chem, 1993,39:2157-2162.

　　3，Reishaus E, Innis M, Maclntyre N, et al. Mutations in the gene coding for the β₂-adrenergic receptor in normal and asthmatic subjects. Am J Respir Cell Mol Biol, 1993,8:334-339.

　　4，Green SA, Turki J, Innis M, et al. Amino- terminal polymorphisms of the human β₂-adrenergic receptor impart distinct agonist- promoted regulatory properties. Biochemistry, 1994,33:9414-9419.

（收稿日期：1999-08-11）