冠心病患者血小板聚集功能及噻氯匹啶作用的观察

中国病理生理杂志 2000年第8期第16卷 论　　著

作者：李玉杰　麦炜颐　曾群英　何清　刘莉莉

单位：（广州中山医科大学附属第一医院， 广东 广州　510080）

关键词：冠状动脉疾病；血小板聚集抑制剂；噻氯匹啶；腺苷二磷酸

　　［摘　要］　目的：探讨冠心病患者血小板聚集功能以及噻氯匹啶对此过程的抑制作用。方法：应用比浊法测量冠心病患者服药前后，由二磷酸腺苷（ADP）、肾上腺素（EPI）、胶原（Coll）和磷酯花生四烯酸（ACA）诱导的血小板聚集功能。结果:患病组ADP、EPI诱导的最大血小板聚集率（0.78±0.23，0.86±0.25）明显高于对照组（0.65±0.19, P＜0.05; 0.73±0.21, P＜0.05），且被噻氯匹啶明显抑制（0.68±0.18，P＜0.05；0.75±0.20, P＜0.05)。而两组间Coll和ACA诱导的最大血小板聚集率无明显差异，且患病组治疗前后无明显差异。结论：冠心病患者血小板聚集功能明显增强，噻氯匹啶可明显抑制这一过程。

　　［中图分类号］　R541.4　　　［文献标识码］　A

　　［文章编号］　1000-4718(2000)08-0702-03

Study of platelet aggregations in patients with coronary heart

　　disease and the effect of ticlopidine treatment

LI Yu-jie, MAI Wei-yi, ZENG Qun-ying, HE Qing, LIU Li-li

　　(First Affiliated Hospital, Sun Yat-sen University of Medical Sciences， Guangzhou 510080，China)

　　［Abstract］　AIM: To investigate the platelet aggregations in patients with coronary heart disease(CHD) and the effect of ticlopidine treatment. METHODS: Platelet aggregations induced by adenosine diphosphate(ADP), epinephrine(EPI), collagen(Coll), arachidonic acid(ACA) in CHD group before and after ticlopidine treatment were measured by turbidity assay. RESULTS: Maximum ratios of platelet aggregations (max%) induced by ADP,EPI in CHD group (0.78±0.23,0.86±0.25) were significantly higher than that of control group (0.65±0.19,0.73±0.21, P＜0.05). After the treatment with ticlopidine, they were lowered obviously (0.68±0.18, P＜0.05;0.75±0.20,P＜0.05). There were no difference in max% induced by Coll and ACA between two groups and there were no significantly changes of max% induced by Coll and ACA by ticlopidine in CHD group. CONCLUSION: The platelet aggregations were increased in patients with coronary heart disease and could be inhibited by ticlopidine.

　　［MeSH］　 Coronary disease; Platelet aggregation inhibitors; Ticlopidine; Adenosine diphosphate

　　研究表明，血小板聚集功能的增强在冠心病的发生发展中起着重要作用，目前临床广泛开展抗血小板治疗^［1～3］。有关临床研究表明新型广谱抗血小板药物噻氯匹啶(ticlopidine)在对心脑血管疾病的治疗中，具有重要作用^［4～6］。但其对血小板聚集功能的具体作用，尚少深入研究。为此，我们对冠心病患者的血小板聚集功能进行测定，并观察噻氯匹啶对此过程的抑制作用。

　　材　料　和　方　 法

　　一、研究对象

　　1998.1～1999.6门诊及住院的冠心病患者，依国际心脏病学会和WHO1979年“缺血性心脏病的命名和诊断标准”确诊，排除以下情况：①出血倾向；②血小板计数＜100×10⁹/L；③近期应用肝素/口服抗凝剂；④肝肾功能不全。完成整个实验过程者，共45例，其中不稳定型心绞痛36例，急性心肌梗死9例；男28例，女17例，年龄42～76（51.3±11.9）岁。

　　二、对照组

　　20例，男13例，女7例，年龄35～70（50.7±14.3）岁，为志愿者及健康体检者。

　　三、仪器

　　PACKS－4型血小板聚集仪（Helena laboratories USA）。

　　四、方法

　　入选患者服药前作血小板聚集功能检测，取空腹静脉血9 mL，加入含3.2%枸橼酸钠1 mL的硅化试管中，以800 r/min离心15 min，取血小板悬液2.5 mL备用，所余血浆以3000 r/min，离心15 min，取贫血小板血浆0.55 mL，按有关说明操作^［7］，电脑自动分析、打印不同诱聚剂诱导的血小板聚集率动态曲线并确定最大聚集率(max%)。所用诱聚剂及终浓度分别为：二磷酸腺苷(adenosine diphosphate, ADP)10 μmol/L，肾上腺素(epinephrine， EPI)300 μmol/L，胶原(collagen, Coll)10 mg/L，磷酯花生四烯酸(arachidonic acid, ACA) 500 mg/L。此后给噻氯匹啶(抵克力得ticlid, 法国Sanafi公司产品)250 mg，每日2次口服，2周后重复上述检测。治疗期间观察病情变化，复查血白细胞计数、血小板计数和出、凝血时间等。

　　五、统计处理

　　有关数据以±s表示，两组间差异显著性用t检验判定。

　　结　　果

　　一、两组最大血小板聚集率（max%）

　　患病组ADP和EPI诱导的最大血小板聚集率（0.78±0.23, 0.86±0.25）明显高于对照组（0.65±0.19, P＜0.05；0.73±0.21，P＜0.05)；患病组Coll和ACA诱导的最大血小板聚集率与对照组无显著差异(均P＞0.05)。

　　二、噻氯匹啶对最大血小板聚集率的抑制作用

　　患病组服用噻氯匹啶2周后，其ADP和EPI所诱导的最大血小板聚集率有明显降低(0.68±0.18, P＜0.05；0.75±0.20， P＜0.05，见表1)。表明噻氯匹啶对ADP和EPI诱导的血小板聚集有明显抑制；对Coll和ACA诱导的最大血小板聚集率无明显作用(见表1，均P＞0.05)。治疗后患病组ADP等所诱导的最大血小板聚集率仍高于对照组， 但已无显著差异(见表1，均P＞0.05)。

　　三、治疗前后患病组血小板聚集功能的动态变化

　　自图1可以看出，患病组ADP等诱导的血小板聚集率随时间延长而逐渐增高，但ADP和EPI所致者上升较慢， 其48 s、240 s和480 s的血小板聚集率分别为0.44、0.74、0.78和0.28、0.70、0.86；而ACA和Coll所致的血小板聚集开始时增高较快，其最大血小板聚集率亦较高，相应时间的血小板聚集率分别为0.08、0.84、0.92和0.03、0.90、0.96。应用噻氯匹啶2周后，所有时段ADP和EPI诱导的血小板聚集率均降低，其48 s、240 s和480 s的血小板聚集率分别为0.30、0.52、0.68和0.15、0.53、0.72；而服药后ACA和Coll所致血小板聚集率无明显降低，其相应时间的血小板聚集率分别为0.01、0.84、0.92和0.05、0.87、0.93(见图1)。

Fig 1 Dynamic observation on platelet aggregations before and after the treatment by ticlopidine in patients with coronary heart disease

　　Ratios: ratios of platelet aggregation; Time: seconds;

　　B: before treatment; A: after treatment

　　aDP(ACA, Coll, EPI): platelet aggregations induced by ADP(ACA, Coll, EPI)

1　噻氯匹啶治疗前后冠心病患者血小板聚集功能的动态变化

表1　两组最大血小板聚集率（max%）及治疗后改变

　　Tab 1　The maximum ratio of platelet aggregations in two groups and its changes after the

　　treatment by ticlopidine in patients with coronary heart disease (±s)

　　* P＜0.05， vs control group； △ P＜0.05， vs before treatment；CHD=coronary heart disease; B=before treatment; A=after treatment; ADP=adenosine diphosphate; EPI=epinephrine; Coll=collagen; ACA=arachidonic acid　　四、经作相应治疗后，患者病情有明显改善，少数患者出现胃肠道症状（恶心、呕吐、腹泻等），经处理后缓解。未见明显白细胞减少、血小板减少及严重出、凝血时间延长。

　　讨　　 论

　　在冠心病不稳定型心绞痛病程中，粥样斑块破裂和血栓形成起着重要作用，斑块破裂所引起的血小板激活启动了凝血过程的链式反应，引起血栓形成^［1］。同时，大量研究阐明，心肌梗死的主要病理机制为动脉粥样斑块破裂部位形成了富含血小板的血栓^［2］。多种因素，包括ADP、肾上腺素、胶原、凝血酶、花生四烯酸及血小板激活因子（platelet activating factor, PAF）等，可以激活血小板，进而诱导血小板聚集反应，其中，ADP起着关键的作用，其与受体结合后，激活血小板表面的纤维蛋白受体（糖蛋白IIb/IIIa），使其和纤维蛋白原结合，进而引起血小板聚集^［8］。本研究表明，患病组ADP和EPI诱导的血小板聚集率（max%）明显高于对照组，表明这种病理情况下，患者的血小板处于高聚集状态，同时，多种因素导致的ADP和EPI释放增加，促进了冠心病患者血小板的聚集，在其病理过程中起着一定作用。至于Coll和ACA所诱导的血小板聚集，两组之间无明显差异，可能因为胶原组织的暴露和细胞膜损伤导致的花生四烯酸释出是一种严重病理状态，因而导致血小板聚集率极度升高（max％＞0.95）。冠心病患者所具有的血管内皮损伤更易导致胶原暴露和花生四烯酸释出，因而其致血小板聚集的作用更强。

　　新型抗血小板药物噻氯匹啶，可以抑制多种因素诱导的血小板聚集。通过改变血小板膜及干扰膜纤维蛋白原的相互作用，阻断血小板膜上糖蛋白IIb/IIIa受体，其抑制由ADP及其它血小板激活剂诱导的血小板聚集反应^［8］。多个大系列临床研究表明，应用噻氯匹啶可以减少粥样硬化血管疾病患者缺血性卒中、心肌梗死或血管性死亡的危险^［9］。本结果表明，口服噻氯匹啶2周后，ADP诱导的血小板聚集的动态过程均受到明显抑制，其最大聚集率明显降低（0.68±0.18 vs 0.78±0.23,P＜0.05)，说明噻氯匹啶对ADP诱导的血小板聚集有明显抑制作用。此外，本结果还表明，噻氯匹啶对EPI诱导的血小板聚集亦有明显抑制作用，其最大聚集率亦明显降低（0.75±0.20 vs 0.86±0.25, P＜0.05）。但噻氯匹啶对Coll和ACA所诱导的血小板聚集无明显抑制作用（均P＞0.05）。因此，在冠心病患者应用噻氯匹啶，可以有效抑制一般病理状况下，ADP和EPI增加所诱导的血小板聚集，从而取得较好的治疗效果。但是，噻氯匹啶对严重病理状况下，胶原暴露和花生四烯酸释出引起的血小板聚集抑制作用较弱，临床应该寻找新型药物以保护血管内皮功能和抑制膜磷酯分解，从而更好地控制疾病的发展。

　　冠心病患者的血小板聚集功能明显增强，在心绞痛、心肌梗死的发生发展中起一定作用。噻氯匹啶可以明显抑制ADP、EPI诱导的血小板聚集，具有明显的抗血小板聚集、防止血栓形成作用，可用于缺血性心脏病的治疗。

　　Tel: 020-87769190

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［收稿日期］ 2000-01-25　　　［修回日期］ 2000-04-26