乳腺癌组织P-糖蛋白的表达及其临床意义

中华肿瘤杂志 1998年第5期第0卷 临床研究

作者：李恩孝　李蓉　张珍华　王剑波

单位：710061 西安医科大学第一临床医学院肿瘤内科(李恩孝、李蓉、张珍华)；第四军医大学病理教研室(王剑波)

　　关键词： 乳腺肿瘤　　P-糖蛋白　　免疫组织化学　　预后

　　【摘要】　目的　研究P-糖蛋白(P-gp)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法　用免疫组化法检测60例乳腺癌、19例转移性乳腺癌组织P-gp表达及化疗疗效。结果　乳腺癌P-gp表达阳性率为48.3%，P-gp表达与年龄、月经状态、腋淋巴结转移数目、分期、病理组织类型及激素受体状况无关(P＞0.05)。P-gp阳性组远处转移率(62.1%)及死亡率(51.7%)高于阴性组(16.1%及12.9%，P＜0.005)，5年生存率(48.3%)低于阴性组(87.1%，P＜0.05)。阳性组辅助化疗后远处转移率(94.7%)高于阴性组(57.1%，P=0.0468)。转移性乳腺癌P-gp阳性组化疗有效率(1/10)低于阴性组(7/9，P=0.0055)。结论　免疫组化法检测P-gp表达对评估乳腺癌多药耐药、化疗疗效及预后具有一定临床价值。P-gp阳性者对MDR型药物耐药，疗效及预后差。

　　Clinical significance of P-glycoprotein expression in breast cancer　　Li Enxiao, Li Rong, Zhang Zhenhua, et al. Department of Medical Oncology, The First Clinical Medical College, Xi'an Medical University, Xi'an 710061

　　【Abstract】　Objective　To study the clinical significance of P-glycoprotein (P-gp) in breast cancer. Methods　Expression of P-gp in 60 cases of breast cancer was examined by immunohistochemistry. P-gp expression and response to chemotherapy were comparatively investigated in 19 patients with metastatic breast cancer. Results　The P-gp was positive in 48.3% of the 60 cases of breast cancer. P-gp expression was not related to patients′ age, menstruation status, number of axillary lymph nodes involved, clinical stage, histological type, and hormonal receptor status(P＞0.05). The frequency of metastasis (62.1%) and mortality (51.7%) were higher in P-gp positive cases than those in negative cases (16.1% vs 12.9%, P＜0.005). The 5-year survival rate of P-gp positive cases (48.3%) was significantly lower than that of negative cases (87.1%) (P＜0.05). In patients received adjuvant chemotherapy distant metastasis occurred more frequently in P-gp positive cases (94.7%) than in P-gp negative cases (57.1%) (P=0.0468). More P-gp negative patients (7/9) than positive patients (1/10) were responsive to chemotherapy (P=0.0055). Conclusion　Immunohistochemical examination of P-gp expression is useful in predicting response to chemotherapy and prognosis in breast cancer patients. P-gp positivity is associated with poor prognosis.

　　【Subject words】　Breast neoplasms　　P-glycoprotein　　Immunohistochemistry　　Prognosis

　　多药耐药(MDR)是限制化疗疗效提高的主要因素之一。MDR表型与MDR1基因过度表达及其编码的产物P-糖蛋白(P-gp)有关，它可将某些高脂溶性和疏水性药物泵出细胞外，影响化疗疗效。为此，我们用免疫组化法检测乳腺正常组织、良性疾病及癌组织中P-gp表达特点，以分析其表达与临床病理因素、化疗疗效及预后的关系，评估其临床应用价值。

材料与方法

　　1.材料来源：我院1989～1992年间经病理确诊的60例乳腺癌标本，以及15例正常乳腺组织、16例乳腺增生病和15例乳腺纤维腺瘤标本；1996年1月～1997年2月间收治的19例术后发生远处转移的乳腺癌癌组织。

　　2.一般资料：60例乳腺癌患者，中位年龄50岁(28～80岁)，＜50岁32例，≥50岁28例。绝经前27例，绝经后33例。Ⅰ期5例，Ⅱ期40例，Ⅲ期15例。腋淋巴结转移N₀ 27例，N_1～3 17例，N≥4 16例。单纯癌30例，浸润性导管癌14例，浸润性小叶癌及髓样癌各5例，粘液腺癌及硬癌各3例。中数随诊时间52.8个月。具有高危险因素的26例患者进行了术后CAF方案辅助性化疗6周期，其中22例发生远处转移(Ⅱb期7例，Ⅲ期15例)。19例术后发生远处转移乳腺癌患者，女性17例，男性2例。中位年龄48.5岁(28～67岁)。化疗方案：CTX+ADR+5-Fu，PTX+ADR或EPI。每3～4周为1个周期，至少治疗2个周期。按WHO(1981年)统一评价标准，疗效分为完全缓解(CR)，部分缓解(PR)、稳定(S)、进展(PD)。

　　3.P-gp用SABC法：石蜡组织切片脱蜡，酒精水化；0.3%H₂O₂甲醇溶液孵育后微波炉修复抗原；正常血清封闭后，加1∶10抗P-gp单克隆抗体(德国BM)4℃过夜；1∶100生物素化羊抗小鼠IgG血清及1∶100 SABC试剂(博士德公司)均孵育60分钟；DAB显色，苏木素复染，常规封片，镜检。雌激素受体(ER)及孕激素受体(PR)检测按酶联雌/孕激素衍生物亲和组化法试剂盒(上海医科大学肿瘤医院提供)说明进行。P-gp染色结果判定分4级^［1］：阴性(-)，阳性(+)，中等阳性(++)，强阳性(+++)。

　　4.统计分析：用SAS软件包行χ²检验及Fisher确切概率法检验。Kaplan-meier法分析生存率并经Log-rank检验。

结果

　　60例乳腺癌及乳腺各组织P-gp表达情况见附表。60例乳腺癌组织29例阳性，占48.3%。癌组织内黄棕色颗粒样着色，呈簇状或散在性分布于细胞浆及细胞膜上，不同组织间及同一组织的不同瘤灶内染色强度及分布不均(图1，2)。癌旁乳腺小叶增生组织内有程度不同的阳性表达，且分布不均；而癌旁正常组织无阳性表达。正常乳腺组织中可见散在的少数细胞染色。ER(+)46例，ER(-)14例；PR(+)16例，PR(-)44例。乳腺癌P-gp表达与年龄、

附表　乳腺癌、良性疾病及正常组织P-gp表达情况

　　月经状态、分期、腋淋巴结转移数目、病理组织类型及激素受体均无相关性(P＞0.05)，其表达程度与月经状态及激素水平也无相关性(P＞0.05)。P-gp阳性组远处转移发生率及死亡率明显高于阴性组(分别为62.1%和16.1%，51.7%和12.9%(P＜0.005)。P-gp阳性组5年生存率为48.3%，明显低于阴性组的87.1%(P＜0.05)。当发生远处转移时，差异便具有非常显著性(P=0.00005)。行辅助性CAF方案化疗后，P-gp阳性者远处转移发生率(94.7%)高于阴性者(57.1%，P=0.0468)。

　　19例转移性乳腺癌组织P-gp阳性率为52.6%(10/19)，化疗总有效率为42.1%(8/19)。P-gp阳性的10例中，PR 1例，S 4例，PD 5例；P-gp阴性的9例中CR 1例，PR 6例，S及PD各1例。P-gp阳性和阴性的有效率分别为1/10及7/9，两者差异有显著性(P=0.0055)。

讨论

　　本组资料表明，乳腺正常组织无P-gp阳性表达，乳腺增生病及纤维腺瘤呈弱阳性表达，乳腺癌旁增生组织有程度不同的弱阳性表达，乳腺癌有较高水平表达。乳腺组织在向癌的演变过程中，是否因为MDR1基因被激活致使P-gp表达水平增高，尚未见相关报道，有待继续研究。本组乳腺癌组织P-gp阳性率与文献报道^［2，3］结果相近。我们观察到在不同病理组织类型中、或相同组织类型、或同一切片的不同瘤灶内可看到分布及染色强度不均一，这一特点可能与乳腺癌组织异质性有关，也是乳腺癌化疗疗效个体差异及肿块不均匀缩小的原因之一。

　　乳腺癌的主要预后因素有年龄、月经状态、临床分期、腋淋巴结转移数目、病理组织类型及激素受体状态等，P-gp表达与上述诸因素均无关，其中P-gp表达程度与雌、孕激素受体水平也无关，说明乳腺癌组织P-gp表达是一种不依赖于细胞增殖比率的独立预后指标^［2～4］。本组P-gp阳性者5年生存率低于阴性者，而远处转移发生率明显高于阴性者。预示乳腺癌P-gp阳性者复发转移率较高、生存率较低，生存期较短^［5］。术后行辅助性CAF方案化疗，P-gp阳性者化疗后远处转移率高于阴性者，提示前者用含MDR型药物辅助性化疗未能达到控制亚临床转移灶的目的。

　　本组资料显示，术后发生转移时，行含ADR或PTX为主的联合方案化疗，P-gp阳性者化疗总有效率明显低于阴性者，与上述辅助性化疗结果吻合，也与文献报道结果相似^［6～8］。表明P-gp药泵作用使药物外排增加，影响药物对癌细胞的杀伤作用，致使化疗疗效降低，提示制订化疗方案时应避免使用MDR型药物。因此，免疫组化法检测乳腺癌P-gp表达，有助于评估其MDR、化疗疗效及预后，指导化疗方案的设计。

参考文献

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(收稿：1997-09-25　　修回：1998-04-30)