乳腺癌DNA含量与癌基因蛋白表达的关系

临床与实验病理学杂志 1999年第2期第15卷 论著摘要

作者：李新功　姜辉　李爱英　丁洪基

单位：李新功　姜辉　李爱英　丁洪基（山东省胜利石油管理局中心医院病理科，东营　257034）

关键词：乳腺肿瘤；癌基因蛋白质类；DNA分析

　　中国图书分类号　R737.9；R392.31

　　文献标识码　A　　文章编号　1001-7399(1999)02-0184-02

　　1　材料和方法

　　1.1　材料　以1987～1997年收检，进行过c-erbB-2、p53、nm23、PCNA免疫组织化学检查的82例乳腺癌为观察分析对象，其中包括浸润性导管癌63例、浸润性小叶癌4例、髓样癌7例、乳头状癌3例、粘液腺癌5例，均为女性患者。

　　1.2　方法

　　1.2.1　DNA图像分析　常规石蜡切片，Feulgen染色，Olympus VANOX显微镜10×40倍视野下选取目标，应用CMIAS-008病理图像分析仪，测量淋巴细胞积分吸光度、乳癌细胞积分吸光度，计算DNA指数(DI，乳癌细胞与淋巴细胞DNA含量的比值)，打印DNA倍体直方图，统计各例＞5CEE(5倍体超出事件)数量。

　　1.2.2　免疫组织化学检查　微波修复抗原，S-P法进行免疫组织学标记，检测c-erbB-2、p53、nm23、PCNA。抗体及试剂盒均为Zymed及Maxim产品，购自迈新公司。抗体均为加强型单克隆抗体。阳性细胞＜20%为弱阳性，20%～50%为阳性，＞50%为强阳性。

　　2　结果

　　见表1。nm23阳性61例，其中48例为整倍体肿瘤。

表1　乳腺癌DNA含量与c-erbB-2、p53、nm23、PCNA表达的关系

　　3　讨论

　　随着图像分析技术的开发，细胞核DNA含量测定将逐渐用于临床病理工作^〔1，2〕。肿瘤细胞DNA含量常不同于正常细胞^〔3〕。细胞DNA含量及分布的异常代表了核染色质数量和结构发生的改变。这种改变不但加速了细胞分裂增殖，同时导致细胞内特异性多肽和蛋白的合成失败，使细胞不能从增殖状态转变为分化状态。

　　在正常情况c-erbB-2基因处于非激活状态，参与调节正常细胞的生长、分化和分裂。当受某些因素影响激活，则具有肿瘤转化活性。其在乳腺癌中的过度表达与癌的分化、组织学类型、淋巴结转移及预后有关。本组研究发现，c-erbB-2阳性病例较阴性者DNA指数DI及＞5CEE值均高，表明DNA分析结果与c-erbB-2检测同样对判别肿瘤恶性程度、病人预后有重要价值。

　　nm23是新近发现的转移抑制基因^〔4〕，有nm23-H1和nm23-H2两个亚型，可通过参与调节细胞内微管系统的状态而抑制癌转移。nm23表达程度与淋巴结转移之间有非常显著的负相关性。本组研究显示，nm23阳性表达的病例，大多为整倍体肿瘤。这对说明nm23表达阳性病例具有相对较好预后的原因有一定意义。

　　p53是一种重要的抑癌基因，有野生型和突变型^〔4〕。正常野生型p53有抑制细胞恶性转化的功能，突变后变为致癌基因，具有促进细胞恶性转化的作用。根据观察，p53蛋白表达与患者年龄、肿瘤体积、淋巴结转移、坏死等无关，与乳腺癌组织分化程度有关，组织学分级越高，其表达越强。DNA图像分析结果未显示p53不同表达之间存在差异。

　　PCNA又称周期素，是真核细胞DNA合成所必须的核蛋白，参与DNA合成的调节^〔3〕，在静止细胞含量很少，在G晚期细胞核中表达开始增加，S期达到高峰，是判断细胞增殖状态的很好标记。乳腺癌组织分化程度越低，PCNA表达程度越高。DNA含量测定作为直接反映细胞内核酸代谢情况的指标，与肿瘤性质、病人预后有关。本组研究显示，DNA指数DI及＞5CEE在PCNA阳性病例较阴性病例为高，证明二者在判别细胞增殖情况方面的一致性。

　　研究表明，DNA含量与c-erbB-2、nm23、PCNA等的表达有重要关系，综合各种检查的结果，对评价乳腺病变，特别是乳腺癌的预后，比单一因素评价，具有更可靠的价值。

　　参考文献

　　1　Carey FA. Measurement of nuclear DNA content in histological, and cytological specimens:principles and applications. J Pathol，1994；172：307

　　2　Takahashi Y, Takenaka A, Ishiguro T et al. Inatratumal DNA heterogeneity correlated with lymph node involvement and surgical staging in epithelia ovarian cancer by flow cytometry. Cancer,1994;73:3011

　　3　Altomas S, Lipponen P, Syrjanen K. Prognostic value of cell proliferation in breast cancer as detemined by proliferating cell nuclear antigen (PCNA) immunostaining. Anticancer Res,1992;12:1281

　　4　Leal CB, Schmitt FC, Bento MJ et al. Ductal carcinoma in situ of breast： Histologic caterization and its relationship to ploidy and immunohistochemical expression of hormone receptors, p53,and c-erbB-2 potein. Cancer,1995;75:2123

收稿日期：1998-06-29