干扰素诱导膀胱肿瘤细胞膜肿瘤坏死因子受体表达及其临床意义

中华肿瘤杂志 1999年第2期第0卷 简　报

作者：王军起　连保罗　谢叔良　孙晓青　陈家存

单位：221002 徐州医学院附属医院泌尿外科

　　肿瘤坏死因子(TNF)必须和肿瘤细胞膜的肿瘤坏死因子受体(TNFR)结合，才能发挥其抗肿瘤作用。我们研究了膀胱肿瘤细胞膜TNFR的表达情况及干扰素对它的影响，现报告如下。

　　材料与方法　膀胱肿瘤BIU-87细胞用RPMI 1640完全培养基培养。调整肿瘤细胞至适当浓度，取1.5×10⁶个肿瘤细胞于反应管，加入终末浓度依次递增的用0.05 mol/L Tris-HCl溶液稀释的¹²⁵I-TNFα(范围100 pg～3.0 ng)，总反应体积为400 μl，每个浓度设3个复管。于4℃反应120分钟，8 000×g离心10分钟，去上清，沉淀用冷缓冲液洗2遍后用γ计数器测放射强度，同时测定非特异结合量。用含有α和γ干扰素的RPMI 1640培养基分别培养肿瘤细胞，α和γ干扰素的浓度(U/ml)分别为10，100，1 000，2 000。其中浓度为100的培养基分别培养5，10，15，20，24小时，浓度为10，1 000，2 000的培养基均培养15小时，按时收获细胞并计数，同上法测定细胞膜受体放射强度。

　　结果　膀胱肿瘤细胞膜表面存在着TNF受体。用放射配基结合分析研究，其结合曲线呈饱和双曲线型，Scatchard分析做图为一直线，说明膜表面存在一种亲和力的结合位点，并得其解离常数为0.25 nmol/L，受体数目为每个细胞869个结合位点。α和γ干扰素作用后均可明显增加膀胱肿瘤细胞膜TNF受体的数目，受体的特异性结合量随着干扰素浓度的增加而增加，并随着干扰素作用时间的延长而升高，以15小时为最大。且γ干扰素对受体表达的影响要大于α干扰素。

　　讨论　干扰素治疗膀胱肿瘤已取得良好疗效，这种作用离不开TNF的参与。TNF可以直接或间接破坏肿瘤细胞，其作用的发挥依赖于和肿瘤细胞膜上TNF受体的结合。这种结合过程极其重要，因为把TNF直接注入细胞内则无细胞毒性作用，因此要求靶细胞膜上必须存在TNF受体。本实验结果表明，膀胱肿瘤细胞膜表面存在TNF受体，且干扰素可以诱导该受体表达的增加，从而促进了TNF与肿瘤细胞膜TNF受体的结合，达到破坏肿瘤细胞的目的。此外，有一些肿瘤细胞的膜表面无TNF受体，或虽存在受体，但对TNF的细胞毒性作用完全耐受，而且不能被干扰素等生物反应调节剂所诱导，故对于这类肿瘤免疫治疗的效果可能会不理想。

(收稿：1998-01-04　　修回：1998-05-11)