大肠癌CD₄₄V₆、E-cadherin表达及临床意义

肿瘤防治杂志 2000年第3期第17卷 基础研究

作者：阮永威　林黎明　戚桂珍

单位：阮永威　林黎明　戚桂珍（济南市　250000)　山东省委机关医院）

关键词：结肠肿瘤；抗原，CD44；粘附分子；免疫组织化学

　　【摘要】　目的：探讨大肠癌CD₄₄V₆，E-cadherin的表达对大肠癌的进展和转移的意义。方法：应用SP免疫组化技术检测56例大肠癌标本的CD₄₄V₆，E-cadherin的表达。结果：CD₄₄V₆表达有转移者84.9%(28/33)，无转移者39.1%(9/23)。E-cadherin表达有转移者24.2%(8/23)，无转移者52.2%(12/23)，两者与肿瘤转移明显相关(P＜0.05)。结论：对大肠癌组织进行CD₄₄V₆，E-cadherin的表达检测，有助于预测大肠癌的进展程度和转移的判断，以及评估预后。

　　中图分类号：R735.34；　　　　文献标识码：A

　　文章编号：1009-4571(2000)03-0242-03

Expression of CD₄₄V₆ and E-cadherin in Colorectal Cancer

RUAN Yong-wei,LIN Li-ming,QI Gui-zhen.

　　（Shandong Provincial Hospital,Jinan 250021）

　　【Abstract】　Objective：To evaluate the expression of CD₄₄V₆ and E-cadherin in colorectal cancer and its roles in estimation of tumor progression and metastasis.Methods：Using immuno-chemical staining, the expression of CD₄₄V₆ and E-cadherin was detected in colorectal cancer.Results：The positive rate of CD₄₄V₆ is 84.9%(28/33) in tumors with metastasis,and 39.1%(9/33) in tumors without metastasis.The positive rate of the expression of E-cadherin is 24.2%(8/23) in tumors with metastasis, and 52.2%(12/23) without metastas.Conclusions：Determination of CD₄₄V₆ and E-cadheron might be useful in assessing tumor progression and metastasis and in predicting prognosis of colorectal cancer.

　　【Key words】　colonil neoplasms;antigens CD₄₄;E-cadherins;immunohistochemistry

　　研究发现癌基因的激活、抑癌基因的失活，以及一些细胞成分的变化是肿瘤发生和发展的分子生物学基础。恶性肿瘤转移扩散是病人死亡的主要原因。恶性肿瘤转移扩散是细胞与细胞外间质及其他细胞相互影响的结果，肿瘤细胞表达的多种粘附分子起着重要作用^［1］。本研究旨在探讨粘附分子CD₄₄V₆与E-cadherin对大肠癌的进展程度和有无转移的诊断意义。

　　1　材料与方法

　　1.1　标本

　　采用山东省立医院1995～1998年手术切除的经病理证实且资料完整的大肠癌病例56例。其中男性30例，女性26例；结肠20例，直肠36例；组织学分型为低、中、高分化腺癌和粘液癌；Dukes分期：A期6例，B期17例，C期24例，D期9例。所有患者术前均未接受任何辅助治疗。

　　1.2　方法

　　采用SP免疫组化染色。主要步骤：取石蜡切片，厚4 μm，脱蜡脱水，分别行HE染色和免疫组化染色。SP试剂盒为Cruz公司产品(工作效价为1∶100，1∶10)。应用3%H₂O₂甲醇溶剂阻断内源性过氧化氢酶，微波灶抗原修复，苏木素复染。每批染色均设阳性和阴性对照，严格按照操作说明进行。

　　1.3　结果判断

　　光镜下排除非特异性染色，黄色、棕黄色、棕褐色为阳性。结果采用AB值法：A：按显色细胞比例评分。显色细胞占切片细胞总数的1/3以下为1分；1/3～2/3阳性显色细胞为2分；2/3以上阳性显色细胞为3分。B：按切片中细胞显色评分。0分细胞无着色；1分浅黄色；2分棕褐色。每例肿瘤细胞积分＝A×B：阴性(-)：0分；弱阳性(+)1～3分；阳性(++)4～6分；强阳性(+++)大于6分。

　　1.4　统计分析

　　计量资料用t检验，计数资料应用χ²检验。

　　2　结果

　　大肠癌细胞中的阳性表达主要位于细胞膜或细胞浆。CD₄₄V₆呈强阳性表达，其阳性率为66.1%(37/56)(图1)。E-cadherin多为阴性或弱阳性表达，少数强阳性表达，阳性率为35.7%(20/56)(图2)。有转移者CD₄₄V₆阳性表达率明显升高，阳性率为84.9%(28/33)，无转移者阳性表达率为39.1%(9/23)，P＜0.05(表1)；E-cadherin有转移者阳性表达率为24.2%(8/33)；无转移者为52.2%(12/23)，P＜0.05(表2)。

图1　大肠癌CD₄₄V₆高表达于

　　细胞膜上、染色为棕黄色(SP法×400)

图2　大肠癌E-cadherin低表达

　　个别细胞中，染色呈棕黄色(SP法×400)

表1　CD₄₄V₆表达与大肠癌转移的关系

表2　E-cadherin与大肠癌转移的关系

　　3　讨论　　CD₄₄ 是一类单一基因编码具有多功能的单链跨膜糖蛋白，属于白细胞粘附分子，广泛存在于白细胞、上皮细胞及内皮细胞上，参与细胞与细胞、细胞与间质之间的相互作用，并被认为与细胞的运动、肿瘤生长和侵袭扩散有关。研究发现10余种CD_44v，而CD₄₄V₆与肿瘤转移的关系最为密切^［2］。同时，E-cadherin存在于细胞表面，具有促进上皮细胞之间相互粘附的功能，以保证细胞间的完整性，在恶性肿瘤转移过程中细胞膜上的E-cadherin分子首先遭到破坏，从而导致癌细胞的运动和侵袭扩散^［3］。

　　通过大肠癌及转移灶和大肠腺瘤中CD₄₄的检测发现大肠癌及转移灶中100%、大肠腺瘤95%可见多种CD_44v的表达，直肠癌从Dukes A～D期，CD₄₄V₆的表达呈明显逐渐增强趋势^［4］。本组56例中，CD₄₄V₆阳性率为66.1%(37/56)；伴有淋巴结和肝、肺等远处转移33例中，CD₄₄V₆阳性率为84.9%(28/33)，阳性表达率明显高于无转移者39.1%(5/33)(P＜0.05)。12例有远处转移者，11例阳性或强阳性，阳性率为91.7%。可以看出随着肿瘤转移的发生和发展，CD₄₄V₆阳性率明显升高。可能CD₄₄V₆有促进癌细胞向基质侵袭，改变肿瘤细胞骨架蛋白的聚集和分布，从而促进肿瘤细胞的迁移和运动能力增强，使癌细胞获得较强的转移能力，并使转移的癌细胞更稳定的寄宿，形成转移灶。

　　文献报道^［3］大肠癌的E-cadherin阳性表达率为29%。另有文献报道^［5］认为E-cadherin阳性率的降低与肿瘤的生长和转移有明显相关性。本组资料E-cadherin的阳性表达率为35.7%(20/56)，有转移者阳性表达率为24.2%，明显低于无转移者52.2%(12/23)(P＜0.05)。E-cadherin阳性表达率降低可能由于粘附分子E-cadherin随着肿瘤发生、发展而遭破坏，从而在细胞与细胞间的表达能力下降，E-cadherin表达的下降可能是造成肿瘤细胞转移的重要因素。

　　通过对本组56例大肠癌组织中CD₄₄V₆和E-cadherin的表达分析发现，CD₄₄V₆和E-cadherin的表达与大肠癌的转移有明显关系。因此，术前对活检组织或/和切除组织中CD₄₄V₆和E-cadherin进行检测，有助于肿瘤生物学行为的判断，对判断大肠癌的潜在转移、病人病情发展及预后有重要意义，对大肠癌的综合治疗有重要指导价值。

　　参考文献：

　　［1］　Streit M,Schmidt R,Hilgenfeld RU,et al.Adhesion receptors in malignant transformation of gastrointestinal tumors［J］.J Mol Med,1996,74:253～268.

　　［2］　Curiec N,Marcellin L,Gairard B,et al.CD₄₄ exon 6 expression as a possible early prognostic factor in primary node negative breast carcinoma［J］.Clin Exp Metastasis,1996,14(5):434～439.

　　［3］　Cofuku J,Shiozaki H,Jsujinaka T,et al.Expression of E-cadherin and alphacatenin in patients with colorectal carcinomal correlation with cancer invasion and metastasis［J］.Am J Clin Pathol,1999,111(1):29～37.

　　［4］　Heider KH,klofmann M,Hors E,et al.A human homologue of the rat metastasis associated variant of CD₄₄ is expressed in colorectal carcinomas［J］.J Cell Bid,1993,120:227～233.

　　［5］　Shum CT,Wu MS,Lin JT,et al.An immunohistochemical study of E-cadherin expression with correlations to clinicopathological features in gastric cancer［J］.Hepato-gastroenterology,1998,45(22):944～949.

收稿日期：2000-01-10　修回日期：2000-02-20