胃癌变过程中细胞凋亡与增殖的研究

现代诊断与治疗 2000年第4期第11卷 论著摘要

作者：熊锋宝　胡伟　冯琼　张文昌

单位：熊锋宝（南昌市第一医院消化科，江西 南昌 330008）；胡伟（江西医学院第一附属医院消化科，江西 南昌 330006）；冯琼（江西医学院第二附属医院病理科，江西 南昌 330006）；张文昌（江西医学院第二附属医院病理科，江西 南昌 330006）

关键词：胃癌；细胞凋亡；细胞增殖

　　中图分类号：R735.2　　　文献标识码：B　　　文章编号：1001-8174(2000)04-0234-01

　　胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，在消化道癌中占第一位。近年的研究表明，胃癌不仅是细胞增殖和分化异常的疾病，也是细胞凋亡异常的疾病。细胞凋亡与消化道疾病和消化道肿瘤有密切的关系^［1］。然而现有的研究还未能完全阐明凋亡与胃癌的关系。本研究试图通过对慢性浅表性胃炎、萎缩性胃炎、胃溃疡、不典型增生、早期胃癌、进展期胃癌的凋亡细胞与Ki-67(增殖相关抗原)的研究，从而探求胃癌的发生、发展规律。

　　1　资料与方法

　　1.1　标本选择　本研究标本选自江西医学院一、二附院病理科1996～1998年石蜡存档标本，其中慢性浅表性胃炎11例，慢性萎缩性胃炎12例，胃溃疡12例，不典型增生10例，早期胃癌10例，进展期胃癌12例。胃癌为手术切除标本，其余均为胃镜活检标本，组织用福尔马林固定，石蜡包埋，连续切片约3～5μm，组织分型由HE染色确定。

　　1.2　方法　细胞凋亡检测采用TUNEL染色，以标记溶液作为阴性对照，免疫组织化学染色采用S-P法，以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作空白对照。细胞凋亡原位检测试剂盒及Ki-67单克隆抗体及过氧化酶标记的链霉卵白素染色试剂盒购自福州迈新生物公司。

　　1.3　结果判定　光镜下TUNEL染色片上的显色反应，细胞核蓝黑色为阳性，Ki-67免疫染色反应表现为细胞核呈深棕褐色。凋亡指数(Apoptosis index，AI)及Ki-67增殖指数(Ki-67LI)均表示为每100个上皮细胞中的阳性细胞数或肿瘤细胞中的阳性细胞百分数。每张切片至少观察1000个细胞。

　　1.4　统计分析　组间对照采用H检验，差异显著值定为P＜0.05。

　　2　结果

　　在良性疾病，慢性浅表性胃炎(Chronic superficial gastritis，CSG)、慢性萎缩性胃炎(Chronic atrophic gastriltis，CAG)、胃溃疡(Grastric ulcer，GU)其凋亡指数逐渐升高。CAG和GU之间Ki-67LI无差别。凋亡细胞主要存在于浅表胃粘膜及胃小凹，相互比较，差异显著。良性病变Ki-67LI总体较低，均＜10%。不典型增生、早期胃癌、进展期胃癌的细胞凋亡指数逐渐下降，且均＜5%，而其Ki-67LI与前三种良性病变相比直线上升，且呈全层表达。其AI和Ki-67LI与良性病变相比较均有显著差异。其之间相互比较，AI及Ki-67LI亦有显著差异(见附表)。

附表　各病变组织平均Ki-67LI及AI(±s)

　　注：Ki-67LI!H检验H＝54.7；P＜0.001，除CAG与GU比较P＞0.05外，其余各组织相比较P均＜0.05。AI!H检验H＝58.38。P＜0.001，各组相互比较P均＜0.05。

　　3　讨论

　　目前认为胃粘膜发生癌变过程如下：正常胃粘膜→慢性萎缩性胃炎→肠化生→不典型增生→癌变^［2］。虽然Kerr等在1972年就提出了细胞凋亡这一概念，它作为一种生理现象，维持着人体内环境的动态平衡。细胞凋亡异常参与多种疾病的发生与发展。但对细胞凋亡进一步研究却是在90年代，尤其是细胞凋亡与肿瘤的关系。寻找最有效的物理、化学、生物诱导剂及最佳的诱导条件诱导胃癌等肿瘤的细胞凋亡可能是将来肿瘤领域的研究热点。本研究发现胃癌前病变不典型增生、早期胃癌、进展期胃癌的细胞凋亡与良性病变慢性浅表性胃炎、萎缩性胃炎、胃溃疡比较明显下降，而Ki-67LI明显上升，同一切片发现，前者增殖区域很少见到凋亡细胞，而良性病变同一切片比较发现在浅表胃粘膜及胃小凹可见到凋亡细胞，也可见到少量的增殖细胞，这说明在胃癌变过程中，细胞凋亡抑制，增殖细胞密度增加，细胞积聚速率加快，与胃癌的形成、发展有关。胃癌变过程中，细胞凋亡减少，细胞增殖的确切机制还不十分清楚，可能与细胞凋亡的基因调控失调有关。国内学者研究表明，Fas抗原对胃癌及癌旁组织的细胞凋亡具有促进性调控作用^［3］，国外学者研究示Fas抗原对不同的胃癌细胞株呈现不同的表达^［4］，bcl-2、bcl-xl、Survivin基因具有抗胃癌细胞凋亡作用^［5］。但无论怎样，胃癌的凋亡调节不是单一的或简单的几个基因作用，而是多基因的相互作用，因此，对胃癌过程中促凋亡基因与抑凋亡基因的进一步研究，有助于揭示胃癌变的分子水平机制，从而为胃癌的治疗带来曙光。

　　(本文承湖南医科大学二附院凌奇荷教授审校。)

　　参考文献：

　　［1］Waston AJM.Necrosis and apoptosis in the gastrointestinal tract［J］.Gut，1995，37(2)：165-167.

　　［2］林庚金.消化病新概念［M］.上海：上海医科大学出版社，1997.50.

　　［3］刘海峰，刘为纹，房殿春，等.胃癌和癌旁组织Fas抗原表达与细胞凋亡的关系［J］.世界华人消化杂志，1998，6(4)：321-322.

　　［4］Hisae Hayashi，Shigeru Tatebe，Mitsuhiko Osaki，et al.Expression of Fas and its mediation of apoptosis in human gastric cancer cell lines［J］.Jpn J Cancer Res，1997，88(1)：49-55.

　　［5］Lu CD，Altieri DC，Tanigawa N，Expression of a novel antiapoptosis gene survivin correlated with tumor cell apoptosis and p53 accumulation in gastric carcinomas［J］.Cancer Res，1998，58(9)：1808-1812.

收稿日期：1999-10-20