细胞粘附分子CD44s表达与胃癌生物学行为关系的研究
中国肿瘤临床1999年第26卷第5期
戴冬秋 陈峻青 赵凤凯 吴东瑛 王梅先
摘 要 目的：探讨细胞粘附分子CD44s在胃癌原发灶的表达与其生物学行为及淋巴结转移规律的关系，并进行临床病理学评价。方法：采用免疫组化方法（S－P法）观察了CD44s在70例非癌胃组织和胃癌原发灶中的表达情况，对胃癌标本进行系统病理学检查。结果：CD44s在非癌胃组织中呈弱阳性表达，胃癌组织阳性表达率为64.3％(45/70)。在淋巴结转移数超过5个，转移度大于50％及转移至Ⅱ站以远，Ⅲ、Ⅳ期胃癌中CD44s表达增强（P＜0.05～0.025），而与其它临床病理因素无关。结论：CD44s表达与胃癌淋巴结转移及TNM分期密切相关，对评估胃癌淋巴结转移程度和分析病期可能有一定价值。
关键词：胃肿瘤 CD44 细胞粘附分子 免疫组织化学
近年研究表明，细胞粘附分子与肿瘤细胞的侵袭转移行为密切相关[1]。细胞粘附分子CD44是一种跨膜糖蛋白，能介导淋巴细胞“归巢”和参与细胞－细胞间粘附，在肿瘤的发生、发展和转移中起一定作用[2]。目前，有关CD44表达与胃癌关系的研究较少[3]，本文应用免疫组织化学方法观察了CD44分子标准型（CD44s）在不同类型原发胃癌组织中的表达，与临床病理因素作对比分析，着重探讨其与胃癌浸润和淋巴结转移程度的关系。
1 材料与方法
1.1 标本
1995年1月至1996年12月间我科手术切除胃癌新鲜标本70例。标本离体后立即取癌灶及非癌胃组织各一块，OCT包埋，液氮速冻，－80℃保存待用。胃标本其余部分行系统病理学检查，按日本胃癌处理规约，中国医科大学肿瘤研究所胃癌生长方式及转移淋巴结分型，Lauren分型、UICC胃癌TNM分期等标准判断[4～7]。
1.2 免疫组化染色
1)试剂：第一抗体为抗CD44s单抗（A3D8，Sigma，USA），第二抗体为生物素标记的羊抗鼠IgG，S－P试剂盒为美国Zymed公司产品。2)染色步骤：将OCT包埋的速冻组织切成5μm冰冻切片，S－P染色步骤按试剂盒说明书进行，每例均留一张切片行HE染色常规检查。
对照：用PBS代替一抗作阴性对照，已知阳性切片作阳性对照。
1.3 结果判定
以细胞膜或（和）浆呈棕黄色为阳性。阴性指细胞未着色（－）、可疑或较弱着色（±）；＋：为较强非均质着色细胞数＞5％；＋＋：为较强的均质着色细胞＞75％。
2 结果
2.1 CD44s在胃非癌和癌组织中的表达
CD44s在非癌胃组织呈散在弱阳性表达，在胃癌表达呈强阳性，阳性率64.3％(45/70)。
2.2胃癌CD44s表达与临床病理关系
CD44s在淋巴结转移阳性胃癌中表达高于淋巴结转移阴性者（P＜0.025），与其他病理因素无明显关系（表1，2）。
表1 CD44s表达与胃癌生物学行为的关系
| 病理因素 |
例数 |
阳性例数(％) |
P值 |
| 大体类型 |
|
| 限局型 |
24 |
15(62.5) |
|
| 浸润型 |
46 |
30(65.2) |
＞0.05 |
| 分化程度 |
|
| 分化型 |
34 |
21(61.8) |
|
| 未分化型 |
36 |
24(66.7) |
＞0.05 |
| 生长方式 |
|
|
|
| 团块＋巢状 |
31 |
19(61.3) |
|
| 弥漫状 |
39 |
26(66.7) |
＞0.05 |
| 浸润深度 |
|
| T1/T2 |
37 |
20(54.1) |
|
| T3/T4 |
33 |
25(75.8) |
＞0.05 |
| 淋巴结转移 |
|
| 阴性 |
19 |
8(42.1) |
|
| 阳性 |
51 |
37(72.5) |
＜0.025 |
表2 CD44s表达与胃癌Lauren分型的关系
| Lauren分型 |
例数 |
阳性例数 |
| 肠型 |
39 |
24 |
| 混合型 |
8 |
5 |
| 弥漫型 |
23 |
16 |
| 合计 |
70 |
45 |
P＞0.05
2.3 胃癌CD44s表达与淋巴结转移的关系
在淋巴结转移数＞5、转移至Ⅱ站（N2）以远及转移度＞50％的胃癌组织中，CD44s表达明显增强（P＜0.05～0.025）（表3）
表3 CD44s表达与胃癌淋巴结转移个数和距离的关系
| 淋巴结转移 |
例数 |
阳性例数(％) |
P值 |
| 个数 |
|
| 0 |
19 |
8(42.1) |
＞0.05 |
| 1～4 |
20 |
13(65.0) |
| ＜0.05* |
| 5↑ |
31 |
24(77.4) |
| 站数 |
|
| N0 |
19 |
8(42.1) |
＞0.05 |
| N1 |
21 |
13(61.9) |
| ＜0.025** |
| N2↑ |
30 |
24(80.0) |
| 频度 |
|
| ＜50％ |
24 |
14(58.3) |
＜0.05 |
| ＞50％ |
27 |
23(85.2) |
＊：0及1～4组与5↑组比较＊＊：N0及N1组与N2↑组比较
2.4 胃癌CD44s表达与腹膜、肝转移及TNM分期的关系
本组材料中，腹膜癌转移8例，CD44s阳性5例。腹膜无癌转移62例，CD44s阳性40例。肝转移7例，CD44s阳性4例。肝无转移63例，CD44s阳性41例。CD44s表达在胃癌有无腹膜及肝转移间无明显差异（P＞0.05）。Ⅰ/Ⅱ期胃癌34例，CD44s阳性17例，Ⅲ/Ⅳ期胃癌36例，CD44s阳性28例，CD44s表达在Ⅲ/Ⅳ期胃癌高于Ⅰ/Ⅱ期胃癌（P＜0.025）
3 讨论
人CD44基因位于11号染色体短臂上（11P），Günthert等研究发现，将CD44cDNA转染大鼠非转移性癌和肉瘤细胞，导致淋巴结癌转移[8]，CD44基因在癌转移过程中的作用因此引起人们关注。
本研究应用免疫组化方法对CD44s在胃癌原发灶中的表达与胃癌生物学行为的关系进行了研究，特别是与淋巴结转移规律的关系，国内外尚未见报告。本研究发现，CD44s表达与胃癌细胞分化程度、生长方式、浸润深度、腹膜及肝转移状况无明显关系，但在淋巴结多数转移、转移度＞50％及转移Ⅱ站以远，Ⅲ、Ⅳ期胃癌时，CD44s表达明显增强。CD44s表达阳性的胃癌具有较强的淋巴结转移能力，可能与细胞癌变过程中获得CD44的表达，并模拟淋巴细胞“归巢”向淋巴结移动有关，在转移过程中，由于表面“归巢”受体的伪装，使胃癌细胞能逃避宿主免疫系统的识别和杀伤。文献报告，CD44s表达在淋巴和血行转移中均起重要作用[2]，本研究证实CD44s与胃癌淋巴结转移个数和距离密切相关，这对于临床判断胃癌淋巴结转移程度有重要意义。实验中未发现与血行转移（肝转移等）有明显关系，此点有待进一步研究。
作者单位：中国医科大学第一临床学院肿瘤科（沈阳市110001）
参考文献
1 Matsuura N,Katsumoto Y,Takeda T,et al.Cell adhesion in cancer and immunology.Biotherapy,1993;7:1552
2 East JA,Hart IR. CD44 and its role in tumor progression andmetastasis.Eur J Cancer,1993;29A:1921
3 Heider KH,Dammrich J,Skroch－ Angel P,et al. Differential expression of CD44 splice variants in intestinal and diffuse type
human gastric carcinomas and normal gastric mucosa.Cancer Res,1993;53:4197
4 Japanese Research Society for Gastric Carcinoma. Japanese classification of gastric carcinoma. First ed. Nishi M,Omori Y,Miwa K(1995). Kanehara Co.Tokyo.121～5
5 Chen JQ,Zhang WF,Wang SB,et al. Some problems in the surgical treatment of gastric cancer.Clin J Cancer Res,1991;3:45
6 Lauren P.The two histological main types of gastric carcinoma:diffuse and so called intestinal type carcinoma. Acta Pathol Microbiol Scand,1965;64:31
7 Kennedy BJ. The unified international gastric cancer staging classification system. Scand J Gastroenterol,1987;22(Suppl):11
8 Gü nthert U,Hofmann M,Rudy W,et al.A new variant of glycoprotein CD44 confers metastatic potential to rat carcinoma cells.Cell,1991;65:13
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