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沙眼衣原体感染输卵管性不孕患者输卵管液中肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的测定

沙眼衣原体感染输卵管性不孕患者输卵管液中肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的测定

  中华妇产科杂志2000年第35卷第7期

李海燕 梁占光

  摘 要 目的 探讨沙眼衣原体(CT)感染所致输卵管性不孕患者输卵管液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的水平及其意义。方法 用酶联免疫吸附试验法测定22例CT感染输卵管性不孕(A组)、23例非CT感染输卵管性不孕(B组)及19例已生育输卵管正常妇女(对照组)输卵管液中TNF-α和IL-6 的水平。结果 A 组TNF-α的水平为178 ng/L,高于对照组的124 ng/L(P<0.01);A组中输卵管阻塞者TNF-α为199 ng/L,高于粘连者的142 ng/L(P<0.01)。A 组IL-6的水平为681 ng/L,高于B组的264 ng/L及对照组的229 ng/L(P均<0.01),B组与对照组之间比较差异无显著性(P>0.05)。结论 无症状输卵管CT感染可使输卵管液中TNF-α和IL-6升高,其中TNF-α与输卵管损伤程度有关。TNF-α越高,损伤越重。

   关键词:衣原体,沙眼;输卵管疾病;不育,女(雌)性;肿瘤坏死因子;白细胞介素6

  沙眼衣原体(chlamydia trachomatis,CT)与输卵管性不孕(tubal factor infertility,TFI)关系密切。本研究检测输卵管液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的水平,探讨CT感染TFI的发病机理。

  资料与方法

  一、研究对象

  为1998年10月至12月在我科因TFI作输卵管粘连分离手术的45例患者及19例(对照组,输卵管外观正常)因绝育后复通或妇科良性肿瘤行卵巢囊肿剥出及子宫切除手术者。全部病例均于术中取输卵管液进行CT-DNA聚合酶链反应( pCR)检测,CT-DNA阳性的22例TFI为A组,阴性的23例TFI为B组,对照组CT-DNA均为阴性。

  A组及B组平均27岁,不孕时间3年,原发性不孕A组占41%(9/22),B组占52%(12/23)。对照组平均年龄34岁,包括绝育术后复通、子宫肌瘤、卵巢囊肿及功能失调性子宫出血等患者。

  二、研究方法

  1.标本收集及处理: 采用国产定量滤纸(2.5 mm×0.6 mm)取输卵管液[1],吸液量为(23.2±0.3)μl。此滤纸片血清蛋白回收率为99.2%~101.8%[2]。术中将3张滤纸条分别置入输卵管腔中,浸透输卵管液后放入离心管,加入800μl生理盐水。所有标本均在-20℃保存,集中测定。

  2.CT-DNA、TNF-α、IL-6的检测:CT-DNA采用PCR法,试剂盒由伊利康生物技术有限公司提供,引物扩增产生400 bp片段产物。采用酶联免疫吸附法检测TNF-α及IL-6,试剂盒购于深圳晶美生物工程公司。方法是各取稀释浓度的标准品23.23μl加入800 μl生理盐水中,按前述方法处理后作滤纸片标准品,其余按试剂盒要求操作,拟合标准曲线相关系数分别为0.99及0.95。

  三、统计学方法

  TNF-α比较采用单因素方差分析,IL-6用秩和检验,组间比较用q检验。

  结果

  一、 输卵管液中CT-DNA的检测结果

  TFI患者的CT-DNA阳性率(49%)明显高于对照组(14%),差异有极显著性(P<0.01)。其中输卵管梗阻者26例的CT-DNA阳性率(54%)与19例粘连者(42%)比较,差异无显著性(P>0.05)。

  二、输卵管液中TNF-α和IL-6的检测结果

  A组及B组中TNF-α水平明显高于对照组,差异有显著性(P<0.01,<0.05),但A组与B组间差异无显著性(P>0.05)。A 组IL-6水平明显高于B组及对照组,差异有极显著性(P均<0.01),但B组与对照组比较,差异无显著性(P>0.05)。见表1。

表1 3组患者输卵管液中TNF-α、IL-6的水平(ng/L,x±s)

组别 总例数 TNF-α IL-6
A组 22 178±46 681±596
B组 23 158±46 264±189
对照组 19 124±37 229±174

  三、CT感染TFI患者不同输卵管病变的TNF-α和IL-6水平比较

  TNF-α在输卵管梗阻者(14例)为(199±30)ng/L,明显高于输卵管粘连者(8例)的(142±48)ng/L(P<0.01)。而IL-6,输卵管粘连者为(956±810)ng/L,高于输卵管梗阻者的(523±383)ng/L,但差异无显著性(P>0.05)。讨论

  一、输卵管液中TNF-α的产生及其作用

  CT感染时输卵管上皮细胞首先释放TNF-α,再激活局部单核、巨噬细胞产生更多的TNF-α[3]。Toth等[1]发现,TNF-α与CT感染输卵管炎损伤有关。本研究也提示TNF-α水平升高与输卵管损伤有关,且水平越高损伤越重。

  二、输卵管液中IL-6的产生及其作用

  CT感染时IL-6水平升高。但IL-6在CT感染中所起的作用仍未明确且有争议。本研究提示,IL-6水平在CT感染时明显升高,与CT的亚临床感染或持续性感染状态密切相关。但非CT感染TFI与对照组之间IL-6水平差异无显著性,而该组包括有输卵管损伤的患者,说明IL-6与输卵管损伤无直接联系[4]。此点有待进一步研究。

  三、CT感染 TFI局部病变与TNF-α、IL-6的关系

  本研究表明,TNF-α的产生与输卵管损伤程度有关,而IL-6与TNF-α的趋势相反。有研究表明,IL-6主要参与机体防御反应,与疾病早期有关,TNF-α在高水平时表现为损害效应,与疾病的持续状态有关[5]。IL-6以剂量依赖方式抑制TNF-α产生[6]。所以,在输卵管损伤较轻时IL-6水平较高,TNF-α水平较低。随着病程延长,输卵管损伤加重,引起阻塞,IL-6产生相对减少,从而解除了对TNF-α的抑制作用,TNF-α产生增多,输卵管损伤加重。

  作者单位:李海燕(现在云南省大理医学院妇产科)

  梁占光(610041 成都,华西医科大学附属第二医院妇产科)

  参考文献

  1,Toth M, jeremias J, Ledger WJ, et al. In vivo tumor necrosis factor production in women with salpingitis. Surg Gynecol Obstet, 1992, 174: 359-362.

  2,苏琼,张莉,王文达.纸片血清标本检测乙型肝炎病毒标志物及丙型肝炎抗体的应用.临床肝胆病杂志,1998,11:228-229.

  3,Ault KA, Tawfik OW, Smith -King MM, et al. Tumor necrosis factor-alpha response to infection with Chlamydia trachomatis in human fallopian tube organ culture. Am J Obstet Gynecol, 1996, 175:1242-1245.

  4,Buyalos RP, Funari VA,Azziz R, et al. Elevated interleukin-6 levels in peritoneal fluid of patients with pelvic pathology. Fertil steril,1992,58:302-306.

  5,Heremans H, van Damme J, Dillen C, et al. Interferon gamma, a mediator of lethal lipopolysaccharide-induced shwartzman-like shock reactions in mice. J Exp med, 1990, 171: 1853-1869.

  6,Aderka D, Le JM, Vilcek J. IL-6 inhibits lipopolysaccharide-induced tumor necrosis factor production in cultured human monocytes, U937 cells, and in mice. j Immunol, 1989,143: 3517-3523.


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