幽门螺杆菌感染在胃粘膜癌变中的作用

世界华人消化杂志 1998年第6期第0卷 临床经验

作者：郑　雄¹　屠柏强¹　刘文忠²　萧树东²

单位：1上海市卢湾区中心医院消化内科　200020；2上海市消化疾病研究所　200001

关键词：胃炎；胃肿瘤；螺杆菌感染；螺杆菌，幽门；增殖细胞核抗原

　　Subject headings　gastritis; stomach neoplasms; Helicobacter infection; Helicobacter pylori; proliferating cell nuclear antigen

　　中国图书资料分类号　R573.3

　　1　材料和方法

　　1.1　材料　本研究所用标本均取自上海市消化疾病研究所病理科保存的自1996-01/1996-12的胃窦粘膜活检标本. 随机抽取基本正常胃粘膜11例，慢性胃炎(包括慢性浅表性、慢性萎缩性)115例，异型增生25例和胃癌10例. 慢性胃炎的诊断参照悉尼系统分类标准. 慢性萎缩性胃炎中将萎缩和肠化分别分为轻、中、重三级，记分为1，2，3分. 由于萎缩常常伴有肠化，故两者合并计算积分，根据萎缩和肠化程度不同，将慢性萎缩性胃炎分为三组：轻度是指萎缩+肠化积分≤2分，中度是指萎缩+肠化积分为3～4分；重度是指积分＞4分. 慢性胃炎伴异型增生者均归为异型增生组.

　　1.2　方法　①Hp的检测：采用改良Giemsa染色方法^［1］. ②PCNA的检测：采用免疫组织化学(ABC)染色方法，PCNA单抗(鼠抗人，DAKO公司)，ABC试剂盒(抗鼠，华美公司)，DAB试剂盒均购自华美公司，具体操作根据试剂盒所述. 阳性对照用胃息肉，阴性对照用PBS代替一抗. PCNA计算方法采用阳性细胞标记指数%(LI %)，即任选染色典型的连续视野3～4个，纵行切面连续计数500～1000个左右粘膜上皮细胞，阳性细胞(着色细胞)所占的百分比.

　　统计学处理　结果以均数±标准差表示(±s)，两组均数比较用组间t检验.

　　2　结果

　　2.1　各阶段PCNA表达情况　基本正常胃粘膜、慢性浅表性胃炎、萎缩伴肠化(根据萎缩+肠化的积分分为轻度、中度、重度)、异型增生和胃癌的PCNA表达见表1中“总体PCNA LI%”所示. 结果表明，不管Hp是否感染，以PCNA LI%表示的胃上皮细胞增殖从正常胃粘膜至胃癌的连续阶段中进行性增加，各组间PCNA LI%均有显著差异(P＜0.01).

　　表1　幽门螺杆菌感染对各阶段病变胃粘膜上皮细胞增殖的影响

　　^bP＜0.01，Hp⁺ vs Hp^-.

　　2.2　Hp感染对各阶段PCNA表达的影响　应用改良Giemsa染色方法检测了所有研究样本的Hp感染情况，如表1所示. 进一步追踪观察Hp感染对正常粘膜向胃癌演进过程中胃上皮细胞增殖的影响. 统计学处理表明，在浅表性胃炎和轻度萎缩性胃炎组中，Hp阳性患者的PCNA LI%分别为13.14±1.60和19.68±2.22，而Hp阴性病例为6.95±0.78和11.34±1.89，有显著差异(P＜0.01)，其余各组中Hp阳性和阴性病例间PCNA LI% 均无显著差异(P＞0.05).

　　3　讨论

　　增殖细胞核抗原(PCNA)是DNA δ聚合酶的辅助蛋白，存在于细胞核中，为DNA合成所必需，通过对PCNA染色的定位和半定量测定分析，可以反映细胞的增殖情况. 细胞增殖增加，是反映细胞发生肿瘤危险性增高的重要标志. 细胞增殖加快时，分裂细胞数DNA复制增加，这不仅增加了自发性DNA复制错误(自发突变)的机率，还增加了内外源性致癌因子(如氧自由基、亚硝酸盐、胆盐等)作用于DNA的机会，使基因容易发生突变^［2］. 这种突变使细胞逐步地转变为恶性. 因此，早在Hp分离培养成功前，细胞过度增殖已被视为胃癌发生危险性增加或癌前病变的指标之一^［3］. 我们的研究发现，随着病程的发展，不管Hp是否感染，以PCNA LI%表示的胃上皮细胞增殖从正常胃粘膜至胃癌的连续阶段中进行性增加，各组间PCNA LI%均有显著差异. 这提示随着病程的发展，发生胃癌的机会也逐渐增加，这与Correa et al提出的人胃癌的发生模式相符合.

　　Hp感染与胃癌的发生有密切的关系. 世界卫生组织(WHO)已将Hp列为胃癌的一组致癌原. 但Hp在胃癌发生中确切的作用机制目前仍不清楚. 有不少文献报道Hp感染能促进胃粘膜上皮细胞的增殖^［4］，众多文献在研究中仅简单地将病例分为Hp阳性和Hp阴性组而不考虑胃粘膜的炎症和分化程度. 我们分别根据胃粘膜炎症和分化程度，及Hp感染情况进行分组，然后进一步追踪观察Hp感染对正常粘膜向胃癌演进过程中胃上皮细胞增殖的影响，结果显示仅在浅表性胃炎和轻度萎缩性胃炎组中，Hp阳性患者的PCNA LI%显著高于Hp阴性病例，有统计学意义，其余各组中Hp阳性和阴性病例的PCNA LI%均无显著差异. 这提示Hp感染在胃癌发生过程中，主要作用于胃癌发生的早期，一旦慢性胃炎发展到中度萎缩伴肠化以后，其他因素可能起着重要作用. 已经知道，癌变过程是一个多阶段过程，主要分“启动期”和“促癌期”，两个阶段，其中的作用因素分别称为“启动因子”和“促癌因子”，本研究结果提示，Hp在胃癌发生过程中可能起着启动因子的作用.通讯作者　郑雄

　　收稿日期　1998-02-10　修回日期　1998-03-10

　　4　参考文献

　　1　胡伏莲，周殿元，贾博琦主编. 幽门螺杆菌感染的基础与临床. 第1版. 北京：中国科学技术出版社，1997：299

　　2　Ames BN, Gold SL. Too many rodent carcinogens: mitogenesis increases mutagenesis. Science, 1990;249(31 August):970-971

　　3　张南征，张学庸，陈希陶，沈世人. 胃癌及其他胃癌患者的胃粘膜细胞动力学观察. 中华消化杂志，1984；4(2)：81-84

　　4　Fan XG, Kelleher D, Fan XJ, Xia HX, Keeling PWN. Helicobacter pylori increases proliferation of gastric epithelial cells. Gut, 1996;38(1):19-22