幽门螺杆菌免疫卵黄中抗体产生水平的动态观察

　　军事医学科学院院刊2000年第24卷第2期

赵忠利　田青　张国珍　端青　黄策

　　关键词：幽门螺杆菌；抗体

　　幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)是迄今为止所发现的能在人胃部极酸性环境中生存的唯一微生物种，Hp可引起人急、慢性胃炎和消化性溃疡，其感染的不良预后为胃癌。

　　Hp感染的治疗以抗生素治疗为主，但复发率和再感染率较高，并且均有一定的副作用，如何预防和更好地治疗这一疾病，是各国专家正在研究的课题。有研究表明，应用能够中和Hp定居能力的单克隆抗体可以有效地防止受Hp攻击的小鼠感染Hp；抗Hp尿素酶IgA抗体与Hp共孵后口服接种小鼠，也可防止小鼠感染Hp，这些结果都说明体液免疫反应在Hp的免疫应答中所起的保护作用。为观察实验动物被动免疫在Hp感染的预防和治疗中所起的作用，我们先以Hp免疫产蛋鸡，然后收集并纯化所产鸡蛋卵黄中抗体(多为分泌型)用作被动免疫用抗体，并观察用Hp免疫蛋鸡所产蛋(免疫卵黄)中抗体产生的动态水平。

　　Hp免疫初产蛋鸡5只，1.6×10⁸个菌/只，多部位注射免疫，初次免疫阶段后7～10 d后加强一次，共加强3次，后根据抗体升降情况追加，加强免疫时剂量及途径与初次免疫时同。收集免疫前、后不同时间所产鸡蛋，每10 d为一组，每组 45～50 枚， 任取 10枚提取卵黄中抗体进行检测， 所测数值为这一时间段中5只鸡所产蛋中抗体水平的平均值。卵黄中抗体的纯化采取稀释盐析法，纯化后的抗体恢复到原始体积，然后进行指数稀释，检测抗体效价。抗体效价的检测用ELISA法，其中用Hp全菌抗原包被，二抗为抗鸡的酶标单抗。免疫前卵黄中不含Hp抗体。在初次免疫阶段，抗体水平持续上升，抗体效价最高可达1∶10⁶～1∶10⁷(第90天左右)，然后开始下降，降至1∶10³(第120天左右)，开始追加免疫，10 d后抗体水平上升至1∶10⁶(第130天左右)，并在此水平上维持了20 d后开始下降，此时(第170天左右)再次追加免疫，抗体水平仍持续下降，至第210天左右，卵黄中已检测不出抗Hp抗体。

　　本实验初步得到如下结论：(1)Hp免疫卵黄中可获得大量抗Hp抗体，效价最高可达1∶10⁶～1∶10⁷；(2)抗体水平在10⁵以上的阶段仅有80 d左右(第70～150天)，此后再次追加免疫，抗体水平仍持续下降，其原因可能是鸡龄过大及免疫耐受。

　　［作者简介］赵忠利(1964-)，男，山东潍坊人，实验师。

　　赵忠利(军事医学科学院微生物学流行病学研究所，北京　100071)

　　田青(军事医学科学院微生物学流行病学研究所，北京　100071)

　　张国珍(军事医学科学院微生物学流行病学研究所，北京　100071)

　　端青(军事医学科学院微生物学流行病学研究所，北京　100071)

　　黄策(军事医学科学院微生物学流行病学研究所，北京　100071)