检测哮喘患者诱导痰嗜酸粒细胞和嗜酸粒细胞阳离子蛋白及其意义
急救快车
1.江西省肺科医院；江西 南昌 330006； 2.江西省中医院呼吸疾病研究所；江西 南昌 330006 李秋根１；刘江红１；郭德华２；陈乐蓉１；彭建萍１
摘要：检测哮喘患者泼尼松治疗前后诱导痰嗜酸粒细胞(EOS)和嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)水平的变化，并和健康人群ECP作比较，评价诱导痰液分析在哮喘气道炎症研究中的作用。
1 资料与方法
1.1 临床资料：哮喘发作期患者38例，男20例，女18例；年龄13～6岁，平均41.0岁；其中轻度12例，中、重度26例。诊断符合文献〔１〕标准；6周内无用皮质激素史；无高血压、糖尿病、消化道溃疡、白内障及青光眼病史。患者均口服泼尼松0.5 mg·kg－１·d－１，疗程6日。正常对照组为健康人25例，男13例，女12例；年龄15～63岁，平均39.6岁。
1.2 诱导痰标本收集方法：试验前常规吸入硫酸特布他林(喘康速)500μg后，超声雾化吸入质量分数为3%的的高渗盐溶液40 ml(雾化机旋到最大速度位置)，总时间20分钟，整个过程鼓励患者咳嗽，痰液吐到一个干净的塑料杯中。取符合标准的痰液(镜下见痰液中有较多的柱状上皮细胞和吞噬细胞、鳞状上皮细胞<10个/低倍视野)立即送检找EOS，然后将痰液与等体积的质量分数为1%的二硫苏糖醇(DTT)振荡30秒，4 ℃下离心(4 000 g)10分钟，取上清液于-20 ℃～-70℃保存，待测ECP。
1.3 检测方法：测定哮喘患者治疗前后分别诱导痰EOS、ECP浓度和肺功能〔第1秒用力呼气容量(FEV１)〕；对照组行诱导痰ECP浓度检测。痰EOS计数方法：将痰液直接涂片，分别行1∶400伊红Y染色和1∶200美蓝染色，然后置高倍镜下计算EOS相对计数百分数。痰ECP浓度测定用酶联免疫荧光法，用Pharmacia uni CAP 100全自动体外过敏原检测系统检测，操作按说明书进行。1.4 统计学方法：数据用均数±标准差(x[TX－]±s)表示，用t检验和直线相关分析。
2 结 果
2.1 哮喘患者经泼尼松治疗后，诱导痰EOS和ECP及FEV１变化见表1。诱导痰EOS、ECP均与FEV１呈显著负相关(r1=-0.0，r２=-0.3，Ｐ均<0.0)。
2.2 中、重度哮喘患者诱导痰EOS、ECP水平变化见表2。
3 讨 论传统观点认为哮喘是与气管平滑肌痉挛、气道狭窄所致。近年来研究揭示哮喘的本质是细胞因子参与调节的，涉及中性粒细胞、嗜酸粒细胞、T淋巴细胞和肥大细胞等多种细胞的慢性气道炎症〔２〕。气道高反应(AHR)是哮喘重要的病理生理特征，也是哮喘倾向于反复发作的基础。气道炎症是AHR形成的关键原因，而EOS又是哮喘气道炎症的关键效应细胞之一，所以，EOS在哮喘AHR形成中起重要作用。
eCP是EOS激活后释放的一种毒性蛋白，是EOS活化的标志及造成哮喘气道炎症的主要介质。本组哮喘患者诱导痰ECP在治疗前后均明显高于健康人群，且中、重度哮喘患者诱导痰EOS、ECP明显高于轻度哮喘患者，反映了哮喘的气道炎症。诱导痰EOS和ECP可反映哮喘气道炎症的严重程度，亦可用于指导哮喘气道炎症的治疗。
参考文献〔１〕中华医学会呼吸系病学会哮喘组．支气管哮喘防治指南〔Ｊ〕．中华结核与呼吸杂志，1997，20：5.〔２〕李风森，阿不都·艾尼，热依木，等．哮喘豚鼠外周血中性粒细胞及淋巴细胞化学发光的观察〔Ｊ〕．中国危重病急救医学，1999，11(1)：51.
第1作者简介：李秋根(1967-)，男(汉族)，江西省遂川人，副主任医师。
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