成人腹泻轮状病毒抗体在人体内维持时间的研究

中华实验和临床病毒学杂志 2000年第4期第14卷 论　著

作者：王长安　李多敬　赵同兴　张宝云　周伟　屈建国　崔德广　吕德祥　李晓刚　洪涛

单位：王长安　赵同兴　张宝云　周伟　屈建国　洪涛（中国预防医学科学院病毒学研究所病毒形态研究室　北京　100052）；李多敬　崔德广　吕德祥　李晓刚（河南义马矿务局总医院）

关键词：成人腹泻轮状病毒；抗体；酶联免疫吸附测定

　　【摘要】　目的　观察成人腹泻轮状病毒(ADRV)抗体在人体内维持时间。方法　采用特异性的ADRV-ELISA阻断试验检测ADRV抗体，对河南义马地区1992、1987、1983年患成人腹泻的病人恢复1年、6年、10年后的血清进行ADRV抗体的检测。结果　260例ADRV病人恢复1年、6年、10年后其血清中ADRV抗体阳性率分别为22.7%(34/150)、36.3%(29/80)、23.3%(7/30)；对92例ADRV抗体阳性者进行了抗体维持时间的观察，ADRV抗体在人体内可维持1～6年。结论　成人腹泻轮状病毒感染人后一旦产生了抗体，可维持16年。

Study of ADRV antibody persistence in the serum of ADRV positive cases

WANG Changan,LI Duojing,ZHAO Tongxing

　　(Institute of Virology,Chinese Academy of Preventive Medicine,Beijing 100052,China)

　　【Abstract】　Objective　This research aimed at observing the persistent time of ADRV antibody in the sera of ADRV cases. Methods　We adopted a sensitive and specific Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detecting ADRV antibody in patients who had recovered. Results　We tested 260 human sera from Yi-Ma town of Henan Province. One year, six years and ten years after the patients had recovered, the of positive rates for ADRV antibody were respectively 27.7%,36.3% and 23.3%. Thirty subjects of ADRV antibody positive were followed up retrospectively, no recurrent diarrhea was found. Conclusion　The ADRV antibody can last 16 years after primary infection.

　　【Key words】　ADRV;　Antibody;　Enzyme-linked immunosorbent assay

　　成人腹泻状病毒(ADRV)是我国洪涛等人于1983年首先发现的一种人类B组轮状病毒^〔1-5〕，它在我国许多地区曾引起大规模暴发性流行性成人腹泻,义马地区也是ADRV发生流行的一个地区。有关ADRV的病原学及其分子生物学等已有许多报道^〔1-8〕，ADRV的全基因已经获得克隆，主要目的基因也已做了全序列分析和表达。为研制诊断试剂和制备疫苗奠定了基础。然而，对它的免疫学了解甚少，尤其是ADRV感染人体后其抗体的维持时间与发病的关系尚属空白，我们进行了此方面的研究。

　　1　材料和方法

　　1.1　血清标本来源　从1993年起分批分期采集义马地区于1983、1987、1992年曾感染过ADRV腹泻的病人恢复1～6年后的血清计370份，采集该区正常人(即无ADRV腹泻史的人)血清33份，实验前清置低温冰箱保存，实验时将每份血清分别作1∶10稀释。30例被测出ADRV抗体阳性者为临床随访对象。

　　1.2　ADRV抗体的制备　见文献〔6〕。

　　1.3　ADRV抗原提纯　取电镜和核酸电泳证明为ADRV阳性的病人粪液，用氯仿处理后差速离心，采用蔗糖、氯化铯超速离心提纯ADRV病毒^〔5〕。

　　1.4　ADRV-ELISA阻断试验　见文献〔7〕。

　　2　结果

　　2.1　ADRV病人恢复后不同时间其血清中ADRV抗体的检测　1993年采集义马地区在1992、1987、1983年曾感染过ADRV腹泻的病人恢复1年、6年、10年后其血清中ADRV抗体阳性率分别为22.7%(34/150)，36.3%(29/80)，23.3%(7/30)，见表1。

表1　ADRV病人恢复后不同时间其血清中

　　ADRV抗体的检测结果

　　Tab.1　ADRV antibody at different times after

　　patients have recovered detected

　　2.2　ADRV抗体维持时间的观察　1993年被测ADRV抗体阳性者，于1994年和1999年再次检测，结果仍属ADRV抗体阳性，见表2。将6例自1993年被测ADRV抗体阳性者，分别进行了3年3次ADRV抗体连续检测，结果ADRV抗体全部阳性。采集该区33名正常人血清，结果2例被检出ADRV抗体，ADRV抗体阳性率为6%(2/33)。30例ADRV抗体阳性者中男21人，女9人，其中工人13人，干部6人，家属3人，农民8人经随访调查，无一人复发ADRV腹泻痢疾。

表2　ADRV抗体在人血清中维持情况的测定

　　Tab.2　Duration of ADRV antibody persistence

　　3　讨论　　我们应用特异的ADRV-ELISA阻断试验，检测了河南义马地区在1992、1987、1983年患ADRV病人恢复1年、6年、10年后血清中的ADRV抗体。从表1可知，ADRV病人恢复1年、6年、10年后其血清中的ADRV抗体阳性率分别为22.7%(34/150)、36.3%(29/80)、23.3%(7/30)；ADRV感染者在恢复6年后被测出的ADRV抗体阳性率比1年和10年后的高；1987年腹泻人数不但集中，而且病重，这些可能是ADRV抗体阳性率较高的原因之一。该区正常人(即无ADRV腹泻史的人)血清中的ADRV抗体阳性率为6%(2/33)；后者ADRV抗体阳性率明显低于前者。表明ADRV病人恢复1～10年仍有约平均26.9%(见表1)的人血清中含有ADRV抗体。

　　我们首次对ADRV病人恢复1～16年后其血清中ADRV抗体情况做了观察，92例ADRV抗体阳性者做了重复检测，6例ADRV抗体阳性者进行3年追踪检测，发现成人腹泻轮状病毒(ADRV)感染人后一旦产生了相应的抗体，可维持16年之久。这对今后研制ADRV疫苗和预防ADRV腹泻提供了有价值的数据。

　　ADRV感染人恢复后，约有1/3人可产生抗体并维持数年，其抗体是否具有保护作用，我们跟踪了30例ADRV抗体阳性者，经随访调查无1例复发ADRV腹泻；这30人一直生活在ADRV流行区，该区曾发生过3次(即1983年、1987年、1992年)较大规模ADRV流行性腹泻，在此环境中不受感染在一定程度上反映着抗体所起到的保护作用。鉴于病例数有限及轮状病毒免疫的复杂性，有关ADRV的致病机理和机体免疫问题尚待进一步研究。

参　考　文　献

　　1，洪涛，王长安，陈广牧，等.在暴发流行的成人无菌性腹泻中发现的新轮状病毒.中华微生物学和免疫学杂志，1984，4：1.

　　2，Hong Tao,Chen Guangmu,WangChangan,et al. Rotavirus-like agent in adult non-bacterial diarrheal in China.Lancet,1983,Ⅱ(8358)：1078.

　　3，Hong Tao, Chen Guangmu,Wang Cangan,et al. Waterborne outbreak of rotavirus diarrhea is caused by a novel virus. Lancet,1984,Ⅰ(8387)：1139.

　　4，洪涛，王长安，姚恒礼，等.在我国成人“冬季流行性腹泻”便液中发现了一种新的病毒.科学通报，1983，28：759.

　　5，王长安，杨荣槛，陈广牧，等.成人腹泻轮状病毒的分子流行病学调查.微生物学报，1985，25：153.

　　6，王长安，孙君利，张永和，等.成人腹泻轮状病毒的提纯及其高价免疫血清的置备.病毒学报，1985，1：75.

　　7，王长安，杨荣槛，梁晓光，等.成人腹泻轮状病毒ELISA方法的建立和应用.病毒学报，1986，2：246.

　　8，王长安，杨荣槛，梁晓光，等.流行性成人腹泻病人排出成人腹泻轮状病毒的持续时间.病毒学报，1987，3：393.

(收稿日期：2000-03-04)