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目前前市面可见多种驱蚊剂， 但主要成分一般都 是合成药物， 如避蚊胺， 它对多种昆虫有驱避作用， 是 一种高效、 广谱驱避剂， 对蚊、 蠓、 蚋有良好的驱避效 果。虽然能够杀灭蚊虫， 但是长期使用或误用避蚊胺 后存在潜在的毒性问题， 在泰国和我国台湾地区已经 禁止使用避蚊胺。中药是大自然的瑰宝， 经查阅文献、 艾草、 苍术、 川芎、 厚朴、 菖蒲和樟脑均有较好的驱蚊 效果， 为避免提取中药成分时采用有机溶剂对环境污 染的影响， 本实验通过超临界 CO 2 萃取提取中药活性 成分， 无有机溶剂残留等优势， 获得一种无毒无害且 有显著驱蚊效果的复方艾草驱蚊剂， 为产品的进一步 开发提供依据。 材料与方法 1 材料 艾草， 苍术， 川芎， 厚朴， 菖蒲， 樟脑共六种中草药购于安徽中医药大学第一附属医院并经孟楣主任药 师鉴定。 2 复方艾草驱蚊液的制备 采用超临界 CO2 萃取装置对上述药材进行精油 提取。将艾草、 苍术、 川芎、 厚朴、 菖蒲、 樟脑 6 种中药 低温烘干后， 混合粉碎 （约 20 目） ， 置于萃取釜中， 封 闭萃取釜， 同时将萃取釜、 解析釜加热至 40℃、 35℃； 然后将冷凝器中已冷却至 -4℃的液态 CO 2 通过高压 泵持续加入到萃取釜， 待萃取釜压力达到 20MPa 时， 接通解析釜并保持解析釜 5MPa 的压力环境； 打开解 析釜与冷凝器之间阀门， 进行循环萃取 2h。萃取完成 后， 从解析釜下收集取萃取液， 待用。 选取苍术 （A） ， 川芎 （B） ， 厚朴 （C） ， 菖蒲 （D） ， 樟 脑 （E） ， 艾草 （F） ， 空白 （G） 六种中药材并调整药材剂 量 （低 （1） 、 中 （2） 、 高 （3） ）三个水平）作考察对象， 设 计七因素三水平正交表， 即 L18（3 7 ） 正交表， 见表 1。 从表 1 可知， 极差 R 6 >R 5 >R 1 >R 2 >R 4 >R 3 ， 结合均值 可知， 最佳方案是 A 3 B 1 C 3 D 2 E 1 F 3 ， 即选取苍术 （A） 高等 剂量， 川芎 （B）低等剂量， 厚朴 （C）高剂量， 菖蒲 （D） 中剂量， 樟脑 （E）低剂量， 艾草 （F）高剂量六种中药 材配伍。配比为： 苍术： 川芎： 厚朴： 菖蒲： 樟脑： 艾草 =4： 1： 4： 2： 1： 4。 驱蚊实验及结果 1 试虫 在长 × 宽 × 高为 40?cm×30?cm×30?cm 的蚊笼 内放入攻击力合格的白蚊伊蚊 100 只试虫， 放三次， 共测试 300 只白纹伊蚊。实验所用白蚊伊蚊中科院 上海昆虫博物馆实验室饲养的敏感提供。饲养羽化 后 2 ～ 3?d?未吸血雌性成虫供试。 2 人体实验 采用 GB/17322.10 － 1998 农药登记卫生用杀虫 剂的室内药效评价方法进行药效实验， 中试验方法 进行效果测试。试验人员手臂暴露 4?cm×4?cm 皮肤 面积， 其余部分严密遮避。将手臂伸入蚊笼内放置 2? min， 记录前来停落的蚊虫数， >30 只者为攻击力合格， 该试验人员及此笼蚊虫可用于驱避试验。经过测试， 每次停留在试验人员暴露手臂上的白纹伊纹数量分 别是 92 只， 90 只， 91 只， 取三者平均数， 则攻击力合 格者占总数的 91%， 剔除攻击力不合格的白纹伊蚊。 2 驱避试验 选攻击力合格的白纹伊纹， 将其放在一间教室， 选取志愿者 60 人， 随机分为 20 组， 分散在教室， 其中 两组为空白对照组喷洒蒸馏水， 其余为实验组喷洒不 同配方的复方艾草驱蚊液。观察有无蚊虫前来吸血， 只要有蚊虫前来吸血即判作驱避剂失效， 嘱咐志愿者 记录有效保护时间 （h） ， 每个配方重复试验 3 次。实 验数据见表 1。 将实验数据输入正交试验结果的表格中， 通过统 计学方差检验进行数据分析， 以驱蚊效果为实验效应 找出不同配方的复方艾草驱蚊液的最佳复方配比， 方 差分析结果见表 2。结果， 复方艾草驱蚊液中六种中 草药均有驱蚊作用 （P<0.05） ， 其中 F（艾草） 的驱蚊效 果最佳在配方中起主要作用。结合表 1， 得出苍术： 川 芎： 厚朴： 菖蒲： 樟脑： 艾草 =4： 1： 4： 2： 1： 4 配比时， 驱 蚊效果最佳。 3 产品使用方法 喷雾剂不仅可以将驱蚊液直接送达作用或吸收 部位， 驱蚊液分布均匀、 驱蚊奏效快， 而且驱蚊液装于 密闭、 不透明的容器中避光且不易直接与空气中氧或 水份接触， 从而提高了驱蚊液的稳定性与安全性， 便 于保存， 且气雾剂使用方便， 便于携带。 4 急性毒性试验 取体重 20±2g 的昆明种小鼠 40 只， 雌雄各半， 随 机分成两组 （空白对照组、 复方艾草驱蚊液组） ， 每组 20 只。禁食 10h 后称重， 分别雾化吸入复方艾草驱蚊 液 （20 毫升 / 次） ， 空白对照组采用同样的方式雾化吸 入蒸馏水， 每次喷雾 30min， 总计 3 次， 两次之间间隔 6h。正常饲养， 连续观察 14d。结果表明雾化吸入复 方艾草驱蚊液后， 与空白对照组比较， 动物的行为、 进 食、 四肢活动、 呼吸、 大小便及体重增长等情况未见异 常。提示复方艾草驱蚊液安全性良好。结果见表 3。 5 黏膜刺激性试验 取 SD 大鼠 12 只， 随机分为空白对照组、 复方艾草 驱蚊液组， 每组 6 只。复方艾草驱蚊液组大鼠双侧鼻 孔以移液器定量滴入 100μl 相应药物， 同时双侧口腔 以移液器定量滴入 100μl 相应药物， 正常组以 100μl 生理盐水滴鼻和口腔， 保证药物与鼻腔接触 4h， 给药 4h 后观察 60min， 记录大鼠打喷嚏及挠鼻次数。结果 见图 1。结果表明与空白对照组相比， 复方艾草驱蚊液 组大鼠打喷嚏及挠鼻次数均没有明显变化。 对口腔黏膜的直接观察发现， 应用复方艾草驱蚊 液对口腔黏膜的表观状态没有明显影响， 未见大鼠口 腔黏膜发红、 水肿或渗出。提示复方艾草驱蚊液对黏 膜无刺激性。结果见表 4。 结 论 本复方艾草驱蚊液由纯天然中草药组成， 产品的 研制开发过程中未使用任何环境不友好试剂， 产品绿 色天然， 可持续利用。 驱蚊液提取过程中采用超临界 CO 2 流体萃取技 术， 萃取时温度较低且在无氧环境下， 萃取的挥发油 不易被氧化， 能保持原药材的天然味道； 从解析釜中 表 4 口腔黏膜刺激及反应分级标准 形态改变 分级评分 （1）无改变或无明显改变 0 （2）轻度充血，少量分泌物 1 （3）中度充血，分泌物较多 2 （4）重度瘀血，水肿，分泌物较多，黏膜变性 3 收集后， CO 2 流体转变为 CO 2 气体， 没有任何溶剂残 留， 可以最大程度的利用药物有效成分。 参考文献 [1] ? 姜志宽， 郑智民， 王忠灿 . 卫生害虫管理学 [M] 北京 : 人民卫生 出版社， 2011:?1-13. [2] ? 刘辉， 晏许超， 李慧， 等 .9 种植物精油对白纹伊蚊驱避活性的 研究 [J]. 中华卫生杀虫药械， 2015， 21（1） :17-20 |
