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C-myc与nm23在淋巴结转移的卵巢肿瘤中扩增与表达

C-myc与nm23在淋巴结转移的卵巢肿瘤中扩增与表达

癌症 1999年第0期第18卷 论著摘要

作者:丁晓萍 杜丽华 冯辉

单位:丁晓萍 冯辉 解放军202医院妇产科(沈阳,110003);杜丽华 解放军514医院妇产科

关键词:卵巢肿瘤;nm23基因;c-myc基因;原位杂交;免疫组化

  中图号:R737.31文献标识码:A

  文章编号:1000-467X(1999)s0-0101-01

  近年来研究表明nm23基因与c-myc抑癌基因在许多肿瘤中有阳性表达,并与一些肿瘤的预后有密切关系,但此两种基因同时在卵巢肿瘤中的表达未见报告。故设计本组实验,观察nm23和c-myc基因在卵巢癌中的表达及扩增,探讨其临床意义。

  1材料与方法

  1.1标本来源

  卵巢肿瘤手术切除标本35例,按“WHO”标准分为:卵巢乳头状囊腺癌18例,交界性囊腺瘤7例,良性囊腺瘤10例,另正常卵巢组织6例。

  1.2临床资料

  根据国际妇产科协会FIGO卵巢恶性肿瘤分期标准,18例囊腺癌分为:Ⅰ期4例,Ⅱ期3例,Ⅲ期6例,Ⅳ期5例。其中腹腔广泛转移9例。年龄26~63岁,中位年龄52岁。术后经过化疗,15例病坚持随访3年,其中死亡3例。

  1.3实验方法

  采用免疫组化LSAB法,抗nm23多克隆抗体试剂盒为美国NYMED公司产品。染色按照LSAB试剂盒说明;c-myc扩增为Southern技术,均按《分子克隆》提供的方法进行。

  1.4对照实验

  免疫组化实验以正常卵巢组织对照,Tris缓冲生理盐水TBS取代一抗对照,HBsAg单抗替代一抗对照组。

  1.5统计学方法

  采用χ2检验、F检验。

  2结果

  2.1nm23基因蛋白在良恶性卵巢肿瘤中的表达

  nm23在正常卵巢组织中均未见阳性表达,良性卵巢肿瘤阳性表达率40%,交界性肿瘤表达率57.1%,恶性卵巢肿瘤则为72.2%的阳性表达率。18例恶性卵巢肿瘤中有淋巴结转移者12例,其中nm23阳性表达仅4例(33.3%),而无淋巴结转移6例,其中4例阳性表达(66.6%)。

  2.2c-myc基因在卵巢组织中的扩增与表达

  Southernblot杂交结果:将正常卵巢组织、良性肿瘤和恶性卵巢肿瘤各6例分成3组,以c-myc为探针的Southern杂交结果所示在c-myc中有较强的杂交带。

  RNA点杂交结果:在恶性组中的斑点密度值明显高于正常组。将中等计量斑点用计算机灰度扫描得出各点灰度值并计算出平均值,其平均值在正常组与良好性组较接近(正常组120度,良性组126度),恶性组明显高于正常组(恶性组185.5度),应用F检验,有显著差异(F=27.09,P<0.01)。其中有淋巴结转移者高于淋巴结转移者。

  3讨论

  nm23基因是一种与恶性肿瘤转移有关的基因,它通过微管聚合、信号传导、转录调节和细胞粘附等几种细胞间功能影响转移进程〔1〕。已知nm23的表达水平与乳腺癌、胃癌、肝癌、肺鳞癌和恶性黑色素瘤等转移呈负相关〔2〕。本研究表明在正常卵巢和卵巢良性组织中均有nm23表达,但卵巢癌中的nm23表达率明显高于正常卵巢组织、良性和交界性肿瘤,提示nm23表达与卵巢癌的发生有关。淋巴结阴性的肿瘤nm23表达水平显著高于淋巴结阳性的肿瘤,说明nm23基因是在卵巢癌发生过程的早期阶段被激活,对卵巢癌的淋巴结转移起抑制作用。与Alessandra〔3〕等研究结果一致。

  c-myc参与凋亡,将要凋亡的细胞内nm23的异常缺乏有导致转移克隆的可能性。cmyc阳性率随卵巢癌浸润程度及淋巴结转移而增高,说明cmyc蛋白过表达对癌细胞的浸润转移起促进作用。本实验中对基因在三种组织中的扩增与表达作了分析,c-myc基因在大部分恶性肿瘤有显著的基因扩增(66.7%)。同时也有显著的过表达,并与其基因的扩增水平相平行,说明卵巢恶性肿瘤中c-myc的变化也是从基因扩增水平开始的。至于c-myc与nm23之间虽无一定内在相关性,但二者均与肿瘤细胞增殖有关。对卵巢肿瘤淋巴结转移,c-myc里有显著的基因扩增和超表达,而nm23则低水平表达。目前认为与卵巢癌预后有关的重要指标之一是淋巴结是否受侵犯。所以nm23基因低表达即可作为卵巢癌转移的标志,又可用来鉴定常规组织病理学不能确定的具有高转移潜能的肿瘤亚群,从而预测肿瘤的转移和复发。因此,检测c-myc和nm23基因表达可用于了解卵巢肿瘤的发生发展及有无淋巴结转移。为临床上恶性肿瘤的诊断、治疗选择及预后预测提供更充分的理论依据。

  〔参考文献〕

  1 Steeg PS,Bevilacqua G,Koppes H,et al.Evidence for a novel gene associated with low tumor metastatic potential〔 J〕 .J Natl Cancer Inst,1988,80(3):200.

  2 郭瑞霞,乔玉环,孙莹璞.nm23基因与卵巢肿瘤〔J〕.国外医学妇产科学分册,1997,4:218.

  3 Alessandra V,Lare A,Vinecngo C.Suppressive role of metastasis related nm23 gene in human ovarian carcinoma:association of high messenger RNA expression with lack of lymph node metastasis〔 J〕 .Cancer Res,1995,55:2645.

收稿日期:1997-11-06;修回日期:1998-01-25


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