小儿急性白血病血液中LPO、SOD含量的测定及其临床意义

中国医学物理学杂志 1999年第3期第16卷 临床应用研究与经验总结

作者：刘鸿莲 胡新珉 陈友琴

单位：华西医科大学 基础医学院物理教研室，四川 成都 610044

关键词：白血病（AL）；脂质过氧化物（LPO）；超氧化物歧化酶（SOD）

　　摘要：本文对12例未经治疗的小儿急性白血病（AL）患者及8例小儿正常对照者血浆脂质过氧化物（LPO）、全血超氧化物歧化酶（SOD）进行测定，结果显示：白血病的LPO和SOD与正常对照组比较，差别均具有显著性意义（P0.0005）。结果提示：LPO、SOD与AL有密切关系，可供探讨AL与自由基的关系及临床诊断作参考。

　　中图分类号：R725.5　文献标识码：B　　文章编号：1005-202X（1999）03-0199－02

Clinical significance of LPO. SOD content in blood of children patient with acute leucocythemia

LIU Hong-lian，HU Xin-min，CHEN You-qin

　　Department of physics of Basic Medical college, West China University of Medical Sciences Chengdu 610044,China

　　Abstract:　The content of Lipoperoxides(LPO), Superoxide dismustase(SOD) in blood of 12　cases of acute leucocythemia and 8 cases of normal subjects as control be determined . The results indicated that the level of LPO and SOD was significance higher in patient with leucocythemia than normal group (P＜0.0005). This result suggest that it could be used to determine the relationship between free radicals and leucocythemia and be useful in diagnosis.

　　Key words:　leucocythemia； lipoperoxides(LPO)； superoxide dismustase(SOD)

　　自由基因其是许多化学、酶和生物学反应过程中活泼的中间体，在辐射及化学造成的生物大分子和机体的损伤过程中大量存在。随着自由基医学研究的深入，许多实验证明，自由基与肿瘤的发生、发展密切相关，自由基的致癌作用基本被肯定^[1]，本文对12例未经治疗的小儿白血病患者血浆脂质过氧化物、全血超氧化物歧化酶进行测定,为探讨自由基与白血病的相关性及白血病在发生、发展中自由基含量的变化情况，为自由基检测在临床诊断上提供参考,现将测定结果报告如下。

　　1　材料与方法

　　1.1　对象

　　经临床确诊的小儿急性白血病患者12例，其中男7例，女5例。年龄4～14岁，其中急性淋巴细胞性白血病（ALL）9例，急性非淋巴细胞性白血病（ANLL）3例，在治疗用药之前，抽取空腹病人的血液进行检验处理；正常对照组为健康儿童8名，年龄2～13岁，进行同样的血液采集与处理。

　　1.2　主要试剂

　　四乙氧基丙烷（美国Hluka产品）、硫代巴比妥酸（国产分析纯）、邻苯三酚（遵义市第二化工厂，分析纯）；其余试剂均为国产分析纯。

　　1.3　主要测定仪器

　　RF-5000型荧光分光光度计（日本岛津公司）；UV-260型紫外光分光光度计（日本岛津公司）。

　　1.4　实验方法

　　1.4.1　 LPO测定采集外周血后,按张秀明等^[2]的改良硫代巴比妥酸荧光法，此法具有灵敏度高、特异性好、速度快等优点。通过沉淀血浆内红细胞中多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应所生成的过氧化脂质，其降解产物中的丙二醛与硫代巴比妥酸缩合形成红色产物，以四乙氧基丙烷作为标准物，用荧光分光光度计进行微量测定。

　　1.4.2　SOD 测定采集外周血后，按徐树云^[3]的方法制备红细胞SOD抽提液, 并按邻苯三酚自氧法^[4]测试和计算SOD活力。邻苯三酚在碱性条件下能发生自氧化生成有色中间产物和超氧阴离子自由基，自由基浓度越高自氧化的催化反应速度越强，而SOD能迅速捕捉超氧阴离子自由基，从而抑制邻苯三酚自氧化反应。用紫外分光光度计对邻苯三酚自氧化生成的有色中间产物进行微量测定，从而计算SOD活力。

　　1.5　统计学处理

　　血浆LPO含量（μmol/L）的算式为：

　　式中F为各管荧光强度。

　　红细胞SOD活性：指每毫升反应液中酶活性单位量××u/ml。SOD每分钟抑制邻苯三酚自氧化反应速度为50%时所需的酶量定义为一个酶活性单位u。

　　本实验数据以平均值±标准差(x±SD)表示,采用两样本均数比较的t检验, 所有处理显著性水准均取单测α=0.05。

　　2　结果

　　小儿AL血液中LPO和SOD含量测定结果如表1：

　　　　　表1　小儿AL血液中LPO和SOD含量变化（±SD ）

　　由表可知，白血病组LPO、均明显高于正常对照组，SOD明显低于正常对照驵，结果经t检验，其差别具有显著性意义，P均值＜0.0005。

　　3　讨论

　　正常人体内约有2%的氧在代谢过程中产生氧自由基，它对人体的某些生命活动含量=×8是必不可少的。正常情况下，氧自由基的产生与清除处于动态平衡^[5]，一旦这种平衡被干扰打破，大量氧自由基在体内蓄积，可引起多种组织细胞的病理损伤。主要表现为破坏生物膜的完整性，引起细胞结构和功能改变；细胞的病理损伤还影响体内核酸的代谢，破坏DNA的结构，导致基因突变，从而引起细胞表达分化异常，产生癌变^[6][7]。

　　LPO是体内自由基引发不饱和脂肪酸链式反应的产物,本文结果表明,白血病的LPO值与对组比较，P＜0.0005, 表明白血病患者体内自由基过多，因此，引发脂质氧化作用增强。

　　SOD是生物体内重要的抗氧化酶，能够清除过多的超氧阴离子自由基，保护生物膜及细胞大分子结构的功能，与抑癌过程密切相关。急性白血病时红细胞的SOD活力降低的原因可能是因某原因引起自由基产生增加，使自由基清除剂之一的SOD消耗增加，或因某些原因引起SOD活力降低。

　　我们的实验结果与文献报道^[8]相符合。白血病人的自由基浓度变化是一个动力学过程，不同阶段其由基浓度不同。其变化规律我们正在进一步研究之中。

　　我们的研究表明，氧自由基在白血病的发病过程中有一定作用，为应用氧自由基清除剂和抗氧化剂药物治疗AL提供了理论依据，并在白血病与LPO和SOD的相互关系方面，为临床诊断提供有价值的实验依据。

　　参考文献：

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收稿日期：1999-02-25