卡介苗联合白细胞介素-2膀胱灌注预防膀胱癌复发机理的研究

中华外科杂志 1998年第4期第36卷 临床研究

作者：温儒民　周广臣　谢叔良　连保罗　孙晓青　陈家存

单位：221002 徐州医学院附属医院泌尿外科

关键词：膀胱肿瘤；癌；灌注，局部；卡介苗；白细胞介素；2

　　【摘要】　目的　探讨卡介苗(BCG)联合白细胞介素-2(IL-2)膀胱灌注预防膀胱癌复发的机理。方法　对35例膀胱移行细胞癌术后患者分别行BCG和BCG加IL-2膀胱灌注，随访14～22个月，复发率分别为31.2 5%和21.05%。　结果　应用IL-2加BCG膀胱灌注6周后，外周血天然杀伤细胞激活因子(NKCF)活性明显增强，在NKCF活性与IL-2活性间有显著正相关变化。　结论　IL-2加BCG膀胱灌注预防膀胱癌复发作用明显优于单纯用BCG，IL-2和BCG 两者间有免疫促进和协同作用。

　　Mechanism of preventing the recurrence of bladder carcinoma by intravesical instillation of BCG plus IL-2　 Wen Rumin,Zhou Guangchen,Xie Shuliang,et al. Department of Urology,Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College, Xuzhou 221002.

　　【Abstract】　Objective　To study the mechanism of preventing the recurrence of bladder carcinoma by intravesical instillation of BCG plus IL-2.　Method　Intravesical instillation of BCG or BCG plus IL-2 were carried out in the bladder transitional cell carcinoma patients undergoing surgical operation(16,19 cases respectively).　Result　They were followed up for 14～22 months.The recurrence rates were 31.25% and 21.05% respectively. At 6 weeks after the instillation of IL-2 plus BCG,the peripheral blood NKCF activity was increased significantly and there was a significant positive correlation between the activities of NKCF and IL-2.Conclusion　The intravesical instillation of IL-2 plus BCG is clearly superior to only BCG in preventing recurrence of bladder carcinoma.There may be immuno-enhancement and immuno-synergism.

　　【Key words】　Bladder neoplasms　　Carcinoma　　Perfusion，regional　　BCG Vaccine　　Interleukin-2

　　卡介苗(BCG)联合白细胞介素-2(IL-2)膀胱灌注预防膀胱癌复发，国内外已有报道^［1，2］，但对其作用机理尚缺乏足够的认识。对此，我们进行了研究，现报告如下。

资料与方法

　　一、临床资料

　　经病理确诊的膀胱移行细胞癌初发患者35例，均为单发， 病理分级Ⅰ～Ⅱ期，已行膀胱部分切除或经尿道膀胱肿瘤电切术。年龄42～69岁，平均54.3岁。按均衡原则分成两组，BCG灌注组16例，BCG加IL-2灌注组19例。正常对照组来自血库献血员20例，年龄35～52岁，平均 45.2岁。

　　二、灌注方法

　　灌注开始时间为患者切口基本愈合后，排尿正常，一般为术后1周左右。BCG灌注组以BCG 120 mg加生理盐水30 ml膀胱灌注，BCG加IL-2灌注组以IL-210000 U,BCG 120 mg加生理盐水30 ml膀胱灌注，每周1次，连续6周。维持疗程一般为每个月1次，1年后每3个月1次。术后每3个月行膀胱镜和（或）B超检查一次，随访时间14～22个月。

　　三、实验方法

　　1．外周血单核细胞分离：无菌抽取外周静脉血5 ml，肝素抗凝，经淋巴细胞分离液密度梯度离心(2000 r/min)20分钟。吸取界面单核细胞层，Hank液洗2遍，完全培养液将细胞浓度调至1×10⁶/ml。

　　2．IL-2产生能力测定：MTT法测定^［3］。

　　3．NKCF活性检测：MTT法测定^［4］。

结果

　　1．疗效观察:BCG膀胱灌注组16例患者中有5例复发，复发率为31.25%；BCG加IL-2灌注组19例患者中有4例复发，复发率为21.05%。BCG灌注后，35例患者全部发生不同程度的尿频等膀胱刺激征。22.8%(8/35)的患者有肉眼血尿；62.8%(22/35)出现低热；11.4%(4/35)发生高热。上述症状多于灌注1～2天后发生，随灌注时间延长，症状加重。疗程结束后，全部症状消失。

　　2．IL-2及NKCF活性测定结果:对照组20例患者血IL-2为0.42±0.06A值，NKCF活性为33.57%±8.39%。肿瘤组35例，灌注前的IL-2为0.21±0.04A值，NKCF为19.84%±5.62%。16例BCG灌注组灌注前的IL-2为0.19±0.04A值，NKCF为17.78%±5.46%，灌注6周后的IL-2为0.31±0.05A值，NKCF为27.79%±6.64%，与灌注前相比差异显著(P＜0.05)。19例BCG加IL-2灌注组灌注前的IL-2为0.23±0.05A值，NKCF为21.16%±5.84%，灌注6周后的IL-2为0.40±0.06A值，NKCF为32.30%±9.84%，与BCG灌注相比差异显著(P＜0.05)。比较BCG或BCG加IL-2膀胱灌注6周后IL-2活性与NKCF活性关系时发现，二者间有显著正相关关系，r值分别为0.843与0.875，P＜0.01。

讨论

　　BCG是一种刺激网状内皮系统，增强免疫细胞功能的有效生物制剂。局部灌注，口服BCG预防肿瘤复发已取得令人满意的效果。近年来的研究表明，BCG联合IL-2膀胱灌注预防膀胱肿瘤复发明显优于单用BCG^［1，2］。我们的研究结果也证实了这一点，本组复发率为21.05%，与文献报道基本相似。

　　膀胱癌患者的免疫功能低下，外周血IL-2及NK活性降低。提高患者的免疫功能，降低复发率就显得非常重要。NK 细胞在机体免疫监视与杀伤肿瘤效应中起重要作用。BCG是NK细胞的强烈诱导剂与活性调节剂，在免疫调节网络中，BCG通过直接诱导、激活T、T₄、NK、MΦ产生IL-2与IFN。后者可进一步刺激NK细胞增殖与分化，使前体NK细胞转化成具有强烈细胞毒效应的成熟NK细胞^［5］。本组实验显示， BCG灌注后，外周血NKCF活性增强，NKCF活性与IL-2活性间有明显正相关变化。因此机体形成一个BCG、IL-2、NK 的免疫调节网络。根据膀胱癌患者血和尿中IL-2活性低下，我们选用IL-2联合BCG膀胱灌注后，外周血NKCF活性更强，在NKCF活性与IL-2活性间也有显著正相关变化。说明IL-2与BCG间有免疫协同或促进作用，对BCG、IL-2、NK免疫网络有更强的调节作用，进一步放大免疫细胞的抗肿瘤效应。由此，我们认为BCG加IL-2膀胱灌注预防肿瘤复发的机理可能是：在用BCG灌注治疗引起膀胱粘膜炎性反应及免疫作用的基础上，IL-2对其产生了免疫促进和协同作用，同时提高机体的主动免疫和被动免疫功能。

参考文献

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　　5韩瑞发,马腾骧,王文成,等.BCG 灌注对外周血免疫细胞的调节及其功能的影响.中华泌尿外科杂志,1994,15:100-101.