H-ras和ICAM-1基因在人肝癌细胞中的表达及分布

中华肿瘤杂志 1998年第6期第0卷 简　　报

作者：黄蓓　武忠弼　阮幼冰　杨木兰

单位：430030 武汉，同济医科大学实验医学研究中心超微病理研究室

　　当激活的ras基因被转染进入NIH3T3细胞时，可产生许多转移现象。细胞间粘附分子(ICAM-1)能介导癌细胞与内皮细胞、淋巴细胞结合，在肿瘤转移中有肯定的作用。为此，我们用原位核酸杂交技术观察H-ras和ICAM-1 mRNA在人肝癌细胞中的原位表达及分布特点，并分析其与肝癌转移潜能的关系。

　　材料与方法　新鲜人原发性肝癌标本22例，已有临床转移者12例，即门静脉内有癌栓，或肝门淋巴结内有癌细胞浸润，或已有远处转移者。分别取癌、癌旁肝及癌与非癌交界处组织。4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，连续切片，进行核酸原位杂交。探针标记及杂交步骤按试剂盒说明书进行。以不加变性探针，或以Buffer Ⅰ代替抗体或阳性切片，经RNA酶消化后再行杂交做阴性对照。对阳性细胞百分率和多数阳性细胞的着色强度进行综合评价，数据用χ²检验。

　　结果　在肝癌原发灶内，H-ras和ICAM-1 mRNA的阳性表达信号为肝癌细胞胞浆内均匀分布的紫蓝色或紫红色颗粒，阳性细胞常呈灶状分布。癌结节之间及同一癌结节内表达存在异质性，有的结节全部呈阳性表达，有的则部分细胞呈阳性，有时仅见少数阳性细胞散在分布于癌结节中。在同一病例中，基因表达的分布区域接近。H-ras mRNA在未转移组表达阳性率为30.0%(3/10例)，在已转移组则高达91.7%(11/12例)，两者差异有极显著性(P＜0.01)。ICAM-1 mRNA在未转移组的表达阳性率为50.0%(2/4例)，在已转移组则为87.5%(7/8例)，两者差异有显著性(P＜0.05)。

　　讨论　本研究结果显示，H-ras mRNA和ICAM-1 mRNA在人肝癌组织中均有不同程度的表达，且在已转移组中的阳性表达明显高于未转移组，表明这两种基因对肝癌的转移都起一定的促进作用。同时还发现，在未转移组病例中也可见基因的表达。提示细胞在恶性转化的同时，部分已获得了转移的特性。此外，不同的癌细胞两种基因表达有明显异质性，在已转移的病例也可仅为少数癌细胞表达极强的H-ras和ICAM-1 mRNA，提示基因可能是在转移的某一阶段起作用。在同一病例中，两种基因表达的分布区域相似，说明两种基因之间可能存在互补协同的作用。

(收稿：1997-10-24　　修回：1997-12-09)