中晚期原发性肝癌患者血浆可溶性P-选择素的测定及临床意义

癌症 2000年第3期第19卷 临床研究

作者：官成浓　徐军发　银正民　潘达超　谢杰荣

单位：官成浓（广东医学院附属医院肿瘤科，广东湛江524001）；徐军发（广东医学院检验系，广东湛江524023）；银正民（广东医学院附属医院肿瘤科，广东湛江524001）；潘达超（广东医学院附属医院肿瘤科，广东湛江524001）；谢杰荣（广东医学院附属医院肿瘤科，广东湛江524001）

关键词：肝癌；可溶性P－选择素

　　摘　要：目的：探讨sP－selectin与原发性肝癌发展及转移的关系以及化疗对原发性肝癌病人血浆中sP－selectin水平的影响。方法：用ELISA法检测54例中晚期原发性肝癌患者化疗前后血浆sP－selectin的含量。结果：中晚期原发性肝癌患者化疗前后血浆中sP－selectin均明显高于正常对照组(P＜0.01)；而且与原发性肝癌的临床分期及治疗效果有关，Ⅲ期病人较Ⅱ期病人高(P＜0.05)，治疗前较治疗后高(P＜0.05)。结论：中晚期原发性肝癌患者血浆sP－selectin含量比正常人高，而且随着病情的发展及疗效而改变，故检测sP－selectin有可能成为原发性肝癌辅助诊断、病情发展及疗效观察的一项有价值的指标。

　　分类号：R735.7；R730.41　文献标识码：A

　　文章编号：1000－467X(2000)03－0256－03

Determination of plasma soluble P－selectin in the patients of middle－later stage primary liver carcinoma and its clinical significance

GUAN Cheng－nong　YIN Zheng－min　et al.

　　（Department of Oncology， Affiliated Hospital of Guangdong Medical College，Zhanjiang 524001， P.R.China）

　　XU Jun－fa

　　（Department of Laboratory Medicine,Guangdong Medical College，Zhanjiang 524023， P.R.China）

　　Abstract：Objective: To investigate the relationship of Soluble P－selectin (sP－selectin) with tumor progress and metastasis in primary liver carcinoma patients of middle－later stage, and the effects of chemotherapy on sP－selectin levels in the plasma of the patients. Methods: The concentration of sP－selectin in plasma of 54 patients with middle－later stage primary liver carcinoma was determined by ELISA prior to and after the chemotherapy. Results: The sP－selectin level in plasma, both prior to and after the chemotherapy, was significantly higher in the patients of middle－later stage primary liver carcinoma than that in control group (P＜0.01). There was a significnt difference of sP－selectin levels between pre－and post－chemotherapy (P＜ 0.05). The sP－selectin level also significantly correlated with clinical stage and the efficacy of treatment .The sP－selectin levels in the patients of stage Ⅲ was significantly higher than that of stage Ⅱ (P＜ 0.05).Conclusion: The sP－selectin levels in patients with middle－later stage primary liver cancer were higher than that in normal control; and it will be changed following treatment and disease progressing. The determination of sP-selectin may be useful for supplementary diagnosis，evaluating progression of disease and effect of treatment in primary liver cancer patients.

　　Key words：Liver cancer； Soluble P－selectin▲

　　P-选择素(P-selectin)是存在于血小板α颗粒和内皮细胞分泌颗粒(weibel　palade　body)内，介导嗜中性粒细胞和单核细胞与血小板和内皮细胞粘附的一种糖蛋白。可溶性P选择素(soluble P-selectin，sP-selectin)是由血小板及内皮细胞释放至血液中的^[1]。sP-selectin与嗜中性粒细胞和单核细胞的结合在控制炎症方面起重要作用^[2,3]。某些肿瘤细胞表面也具有P-selectin受体，有研究表明sP-selectin与肿瘤的发展及转移密切相关^[4～6]。为探讨sP-selectin与原发性肝癌发展及转移的关系以及化疗对原发性肝癌病人血液中sP-selectin水平的影响，我们对经本院收治的54例中晚期原发性肝癌患者治疗前后血浆中sP-selectin水平进行检测。现报道如下。

　　1　材料与方法

　　1.1　研究对象

　　1.1.1　正常对照组30例对照病人来自我院健康体检者，各项指标均符合健康查体标准，其中男女各15例，年龄18～52岁。

　　1.1.2　肝癌组54例患者均为临床确诊的中晚期原发性肝癌，诊断标准严格按照全国肝癌防治协作会议拟定的临床诊断标准，并按1977年我国制订的分期标准对病人进行分期。其中Ⅱ期21例，Ⅲ期33例。男39例，女15例，年龄22～58岁，全部病例治疗前KPS评分均在60分以上，且肾功能均正常。

　　1.2　方法

　　1.2.1　治疗方法全身化疗：5-FU600mg/m²，静滴（第1～5天）；ADM30mg/m²，静注（第1天）；MMC10mg/m²，静注（第1天）；每4周为一周期。介入治疗：按Seldinger方法经皮穿刺股动脉插管，将导管超选择插入供应肿瘤血管的动脉后，注入化疗药物(ADM30～40mg，MMC12～16mg，DDP80mg)及碘油(10～20ml)，每1～2个月重复一次。

　　1.2.2　实验方法两组均于晨起静脉空腹采血（治疗组治疗前后间隔时间为2个治疗周期，约1.5～2个月，54例中仅43例符合要求），用2％EDTA-Na₂-0.7％NaCl抗凝，立即离心(3000r/min，10min)分离血浆，放-20℃保存待检。sP-selectinELISA试剂盒由苏州医学院血栓研究所提供。实验操作严格按说明书进行。使用∑960型全自动酶标仪测定。

　　1.2.3　统计学方法　数据用+s表示，用方差分析进行统计学处理。

　　2　结果

　　2.1　sP-selectin测定与原发性肝癌临床分期的关系

　　不同临床分期中晚期原发性肝癌患者血浆sP-selectin的水平不同，Ⅱ、Ⅲ期之间存在着显著差异(P＜0.05)；均较正常对照组高，有非常显著性差异(P＜0.01)(见表1)。

表1　原发性肝癌患者血浆sP-selectin水平

　　与临床分期的关系

组别	n	+s(mg/L)	P值
正常对照组	30	18.47±3.76
Ⅱ期肝癌	21	88.67±78.62	＜0.01*
Ⅲ期肝癌	33	131.83±82.52	＜0.01*，＜0.05*

　　*与正常对照比较，＃Ⅱ、Ⅲ期之间比较2.2　原发性肝癌病人治疗前后血浆sP-selectin水平的变化

　　原发性肝癌病人治疗前后血浆sPselectin均比正常对照组高，有非常显著性差异(P＜0.01)，而且治疗后较治疗前低，有显著性差异(P＜0.05)(见表2)。

表2　原发性肝癌患者治疗前后血浆sP-selectin的测定结果

组别	n	+s(mg/L)	P值
正常对照组	30	18.47±3.76
化疗前	54	123.37±89.18	＜0.01*
化疗后	43	88.62±68.76	＜0.01*，＜0.05*

　　*与正常对照比较，＃Ⅱ、Ⅲ期之间比较3　讨论

　　肿瘤的发展及转移均存在着肿瘤细胞与其它细胞间的互相作用。粘附分子是一类介导细胞与细胞、细胞与细胞间质粘附作用的膜表面糖蛋白。P-selectin主要存在于血小板α颗粒和内皮细胞的weibel-palad小体内，经凝血酶、组胺、白三烯等刺激后快速表达于细胞的膜表面。P-selectin的受体主要有三种，即s-lewis^x、s-lewis^α和PSGLE-1(P-selectin glycoprotein ligand-1)。这些受体主要存在于白细胞、内皮细胞及某些肿瘤细胞表面^[4，7]。P-selectin介导嗜中性粒细胞和单核细胞与内皮细胞的粘附，也可介导某些肿瘤细胞与内皮细胞的粘附^[8]。Fox等^[9]研究表明肿瘤患者内皮细胞表面的P-selectin表达增加。

　　sP-selectin是由部分表达于细胞表面的P-selectin释放到血液中形成的。与膜表面P-selectin相比，其mRNA拼接片段缺乏跨膜区，仅瞬时表达于细胞表面。sP-selectin比P-selectin分子小，约3ku，是一个单聚体。有研究表明，正常水平的sP-selectin可控制嗜中性粒细胞与内皮细胞的粘附，同时也可降低嗜中性粒细胞呼吸爆发产生的超氧阴离子的量。Schadendorf等^[10]报道不同阶段的黑色素瘤患者血清中sP-selectin均高于正常人，而且，sP-selectin水平与病情发展呈正相关。目前尚未见关于sP-selectin与原发性肝癌的关系的报道。

　　我们的研究显示：1）不同临床分期的原发性肝癌患者血浆中sP-selectin水平不同，随着病情的发展、加重，sP-selectin逐渐增加，Ⅲ期肝癌病人血浆sP-selectin较Ⅱ期患者的高，有显著性差异(P＜0.05)；Ⅱ、Ⅲ期肝癌患者血浆sP-selectin均高于正常对照组，有非常显著的差异(P＜0.01)。我们临床观察到2例典型病人，初诊时未见转移病灶，属Ⅱ期患者，它们的血浆sP-selectin分别为：61.43mg/L和85.55mg/L，但经介入及化疗后，症状无改善，反而出现大量腹水或肺转移等表现，复查血浆sP-selectin分别为215.10mg/L及415.08mg/L，前后对比均明显增高。这可能与原发性肝癌患者体内炎症反应强烈及肝癌细胞的异常分泌物，使血小板与内皮细胞大量被激活，产生较多的sP-selectin有关，而sP-selectin的增高又可抑制嗜中性粒细胞及单核细胞的粘附与呼吸爆发，从而使肿瘤细胞逃避吞噬细胞的杀伤，易发生转移。2）原发性肝癌患者治疗前后血浆sP-selectin水平不同，治疗后明显低于治疗前，有显著差异(P＜0.05)。治疗前后均高于正常人，有非常显著差异(P＜0.01)。这可能与化疗药物本身有抗炎作用及治疗起效后，肿瘤细胞受到抑制或杀死，其异常分泌物减少，从而减少被激活的血小板和内皮细胞，进而减少sP-selectin的释放有关。我们亦观察到1例典型病例，初诊时为巨块型肝癌，B超示：“肝内肿物约10cm×15cm大，有少量腹水”，血浆sP-selectin为285.85mg/L，经2次介入治疗及1次全身化疗后，症状明显好转，复查Bus示：“肝内肿块明显缩小，约5cm×7cm大”，血浆sP-selectin为36.32mg/L。

　　以上研究显示：血浆sP-selectin有可能成为原发性肝癌辅助诊断、病情发展及疗效观察的一项有价值的指标。但由于病例数尚少，有待进一步研究。

　　基金项目：本课题受广东省卫生厅医学科学青年基金(B1997120)和广东医学院医学科学基金(附199812)资助

　　通讯作者：官成浓：Tel：86－759－2387456 Fax：86－759－2231754

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收稿日期：1999－08－02

修稿日期：1999－11－02