放射免疫显像在前列腺癌中的应用

中华泌尿外科杂志 1998年第12期第19卷 简　报

作者：钭理强　张传波　俞莉章　张春丽　郭应禄

单位：100034 北京医科大学第一医院，泌尿外科研究所(钭理强、俞莉章、郭应禄)；北京医科大学第三医院泌尿外科(张传波)；北京医科大学第一医院放射科(张春丽)

　　我们报告抗前列腺癌膜抗原单抗YDPC应用于裸鼠前列腺癌肿瘤模型放射免疫显像(RIS)的结果。

　　材料和方法　抗前列腺癌膜抗原单抗YDPC由本室制备。以间接免疫荧光和Western Blot方法鉴定所制备单抗所识别抗原的性质。前列腺癌细胞抗原的提取方法按Trizol试剂盒说明。

　　人前列腺癌细胞株PC-3M由本室保存，人直肠癌细胞株lovo由加拿大Alberta实验室Diener教授提供。裸鼠和Balb/c小鼠购于北京医科大学实验动物中心。裸鼠肿瘤模型的建立：裸鼠右侧肩部皮下接种PC-3M和lovo细胞5×10⁶/只，约3～4周后长成直径1cm的肿物，即可用于RIS。^99mTc标记单抗采用二巯基乙醇直接还原法，纯化用SephadexG-50，分别计算标记率、放化纯度及标记抗体对PC-3M细胞表面抗体最大结合力。裸鼠分实验组6只，对照组2只。尾静脉注射一定剂量的标记单抗后，分别于6和24小时进行显像。显像条件为低能准直器，能量140keV，矩阵128×128，窗宽20%，采集20分钟。显像完毕后处死裸鼠，取肿瘤组织和正常组织，称湿重后γ计数器测定，计算每克肿瘤组织的吸收率(%ID/g)。

　　结　果　将YDPC杂交瘤细胞接种注射降植烷Balb/c小鼠后，收集腹水1∶10 000稀释后作间接免疫荧光实验，可见细胞膜表面有明显的荧光染色。但多次Western Blot结果均无明显的条带被YDPC单抗识别。

　　YDPC经二巯基乙醇还原法标记后，用薄层层析法(HLC)检测，其标记率为42%，放射化学纯度大于95%。Scatchard作图法计算YDPC对细胞膜表面抗原的亲和力为7.71×10⁹M^－1。11 100kBq标记抗体注射后6小时肿瘤开始显像，24小时后肿瘤显像清晰。对照组裸鼠直肠移植肿瘤一直没有明显的放射性浓聚。显像后每只小鼠取血100μl，解剖裸鼠各组织，以γ计数器测定。6小时和24小时的肿瘤吸收率分别为1.9%和2.1%ID/g。

　　讨　论　为了更好达到RIS诊断转移性前列腺癌的目的，关键是发现一种前列腺组织特异的且针对细胞膜抗原的单抗。早期RIS多采用抗PAP和抗PSA的单抗。但应用于检测前列腺癌转移灶时敏感性很低，其主要原因是它们属于针对胞浆成分的单抗。我们所制备的单抗具有较高的特异性。间接免疫荧光实验表明前列腺癌细胞膜表面具有荧光染色。我们试图进一步明确YDPC所识别抗原的性质，但多次提取前列腺癌细胞抗原后的Western Blot结果均为阴性，推测在抗原提取过程中被降解之故。

　　本实验在体外鉴定后进行小鼠前列腺癌肿瘤模型的显像。从^99mTc标记YDPC在前列腺癌模型中的生物分布及肿瘤的RIS结果看，在短时间内^99mTc标记YDPC开始特异集中在肿瘤局部，并随时间延长，肿瘤组织变得逐渐清晰可见，而本底逐渐减弱。

(收稿：1997-09-08　修回：1998-08-10)