男性不育精浆C_3d和C₃的测定及与抗精子抗体的关系

临床检验杂志 1999年第1期第17卷 体液检验

作者：高正洪

单位：靖江市人民医院检验科，江苏靖江214500

关键词：男性不育；抗精子抗体；C_3d；C₃

　　抗原抗体复合物及某些微生物等可激活补体系统，引起补体的活化。C₃被C₃转化酶裂解成C_3a、C_3b片断，后者进一步被裂解成C_3c、C_3f和C_3dg，C_3dg再被水解成C_3d、C_3g，因此C_3d的含量可反映补体活化的程度。在男性不育患者中，抗精子抗体(AsAb)与精子相关抗原的结合也可导致补体的活化，使C_3d含量增加。活化的补体与抗原-抗体复合物结合可引起精子结构和功能的改变，因而在免疫性不育的发病机制中起重要作用，因此测定精浆中C_3d与C₃的含量具有重要的临床价值。本文报告用ELISA检测精浆中的C_3d及C₃，并探讨了其与AsAb的关系，现报告如下：

　　1　材料和方法

　　1.1　标本来源　生育男性8例，系妻子已生育一子女者；不育男性42例，均为结婚二年以上，性生活正常而妻子未受孕者。所有精浆标本均在室温自行液化后，于一小时内2 500 r/min，15 min分离上层精浆，置－20℃冰冻保存备用。同时抽取静脉血测血AsAb。

　　1.2　主要试剂　包被用抗人C₃、HPR-抗人C_3d及沉淀剂等均由南京军区南京总医院临免科提供。

　　1.3　C_3d参考品的制备　参照文献^［1］介绍的方法进行。

　　1.4　ELISA检测C_3d及C₃含量　分别按文献^［1］和文献^［2］介绍的方法进行。根据测得的C_3d及C₃含量计算C_3d/C₃的比值。

　　1.5　ELISA法检测AsAb试剂盒　购自南京军区南京总医院。按说明书介绍的方法操作。

　　2　结果

　　2.1　42例不育男性，经检测AsAb阴性者26例，AsAb阳性者16例，阳性率38.1%。其中血清抗精子抗体阳性者9例，精浆抗精子抗体阳性者7例(有两例血清抗精子抗体同时为阳性)。8例生育男性血清和精浆AsAb均为阴性。

　　2.2　不育男性及生育男性精浆C_3d、C₃及C_3d/C₃测定结果见表1。

表1　不育男性及生育男性精浆C_3d、C₃及C_3d/C₃测定结果

　　asAb阳性者与生育组间比较　*P＞0.05，**P＜0.01

2.3　以C_3d大于0.8 mg/L为阳性，比较C_3d阳性率与AsAb测定结果的关系，结果见表2。

表2　AsAb与C_3d阳性检出率的关系

　　2.4　精浆AsAb阳性的不育男性C_3d测定结果(2.09±1.5 mg/L)，略高于血清AsAb阳性的不育男性C_3d测定结果(1.05±0.42 mg/L)，但两者差异不显著(P＞0.05)。3　讨论

　　本文的检测结果表明:AsAb阳性的不育男性精浆C_3d及C_3d/C₃的结果均较生育组显著增高(P＜0.01),AsAb阴性的不育男性精浆C_3d、C₃及C_3d/C₃与生育组相比则无显著差异(P＞0.05)。提示AsAb与精子膜固有成份及膜表面被覆成份的结合能导致补体的活化，使C₃裂解加速，进而导致精子结构和功能的受损。

　　3.2　文献^［2］报告正常生育男性精浆中C₃的含量为6.1±4.3 mg/L，不育男性为9.2±5.7 mg/L，本文的结果与之相近；精浆中C₃的含量未见有报道。本文的检测结果显示：AsAb阴性的不育者精浆C_3d与生育组甚为相近，而AsAb阳性的不育者精浆C_3d则显著高于正常者，两组不育者C_3d阳性检出率之间有显著差异(P＜0.01)。在AsAb阳性的不育者中，C_3d/C₃的比值显著高于生育组也说明C₃裂解速度增加，裂解产物增多。这进一步提示AsAb能活化补体，从而干扰精子的功能。

　　3.3　AsAb对生殖过程的影响已经得到充分的证实。有研究认为：只有射精精子表面精子抗体的附着，才是直接导致男性免疫性不育的免疫学因素^［3］。因而精浆AsAb比血清AsAb对生殖的干扰影响更大。在本文的研究中，精浆AsAb阳性和血清AsAb阳性的不育男性间C_3d含量虽无明显差异(这可能是我们观察的例数不够所致)，但前者的测定结果仍比后者为高。这也说明精浆内的AsAb能直接激活精浆内的补体系统，直接造成精子的损伤。

　　参考文献

　　1　童明庆，颜承靖，裴云，等.ELISA测定补体C_3d片断.临床检验杂志，1996，14(1)∶31

　　2　张秀成主编.精子检测与分离.北京：北京科技出版社，1993.106

　　3　胡承阅.男性免疫性不育.国外医学计划生育分册，1996，15(1)∶13

(1998-03-09收稿，1998-08-25修回)