哮喘患者血T淋巴细胞和嗜酸细胞活性指标的检测及意义

中国急救医学 1999年第8期第19卷

作者：邓火金　孙　滨　于化鹏　杨振峰

单位：邓火金　于化鹏　杨振峰　广州珠江医院呼吸科，510282；孙　滨　西安西京医院呼吸科

关键词：哮喘；嗜酸细胞阳离子蛋白；白细胞介素类

　　摘要：目的　为探讨哮喘患者体内T淋巴细胞和Eo的激活程度。方法　选择血清白细胞介素(IL)-5、可溶性白细胞介素2受体(SIL-2R)、嗜酸细胞阳离子蛋白(ECP)作为其活性指标进行检测。结果　30例哮喘患者中22例血清IL-5浓度在35 ng/L以上，正常对照组均在35 ng/L以下(P＜0.05)；SIL-2R浓度哮喘组为268.5±73.7 u/ml较正常人138.5±55.3 U/ml为高(P＜0.01)；而ECP浓度哮喘组14.4±11.8μg/L也高于正常人5.6±4.8 μg/L(P＜0.01)，且血清IL-5、SIL-2R浓度与其血清ECP浓度均呈显著正相关(r=0.53、0.46，P＜0.05)而与FEV₁%呈显著负相关(r=-0.52、-0.42，P＜0.05)。结论　哮喘患者体内T淋巴细胞和Eo激活；血清IL-5、SIL-2R和ECP浓度可作为反映哮喘气道炎症消长的指标。

Study on the blood T lymphocyte and eosinophil activity in asthmatic patients

DENG Huo-jin,SUN Bin,YU Hua-peng,et al.

　　department of Respiratory Medicine,Zhujiang Hospital,First Military Medical university,Guangzhou 510282

　　Abstract　Objective　To investigate the degree of T lymphocyte and eosinophil activity in asthmatics.Methods　Measured levels of the serum interleukin-5(IL-5),soluble IL-2 receptor (SIL-2R) and esoinophil cation protein (ECP) by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and fluoresrcein labeled enzyme.Results　IL-5 was detectable in the serum of 22 of the 30 asthmatics (lower limit in sensitivity 35 ng/L of IL-5 eLISA kit),but was not detectable in the serum of all the control subjects (＜35 ng/L,P＜0.05).In asthmatics,serum SIL-2R and ECP levels (268.5±73.7 U/ml and14.4±11.8 Ug/L) were significantly greater than those in normal subjects (138.5±55.3μ/ml and 5.6±4.8 μg/L,P＜0.01).It was also found that there were remarkable correlations of serum IL-5,SIL-2R levels and ECP levels (r=0.53、0.46，P＜0.05);whereas these were negative correlations of serum IL-5,SIL-2R levels and FEV₁%(r=-0.52、-0.42,P＜0.05).Conclusions　T lymphocyte and eosinophil in asthmatics are activated.The serum IL-5,SIL-2R and eCP levels could be considered as parameters indicating the severity of airway inflammation in asthma.

　　Key words　Asthma　Eosinophil cation protein　Interleukins

　　随着哮喘发病机制研究的进展，人们认识到哮喘的本质是一种由T淋巴细胞介导以Eo浸润为主的慢性气道炎症性疾病，T淋巴细胞和Eo的相互作用在哮喘气道炎症的发生发展中起关键性作用。本实验旨在了解哮喘患者体内Eo和T淋巴细胞的活化及其关系，并对所检测的标志物进行评价，为临床寻求反映哮喘炎症的客观指标。

　　1　资料与方法

　　1.1　研究对象　中、重度^［1］哮喘患者30例，男11例，女19例，年龄13～53岁。检查时均为发作期，肺功能检查1秒钟用力呼气容积(FEV₁)＜预计值80%，支气管扩张试验，缓解率＞15%。试验前3个月未用过糖皮质激素，24小时未用支气管扩张剂。测定前取静脉血5 ml。正常人对照选本院血库健康献血员20人，男8人，女12人，年龄23～47岁，无哮喘、寄生虫病史及Eo增高性疾病。

　　1.2　实验方法

　　1.2.1　外周血白细胞和Eo计数　按常规法计绝对数。

　　1.2.2　肺功能测定　用chest-35综合肺功能仪(日本)测定基础肺功能。

　　1.2.3　血清IL-5、SIL-2R浓度测定　均采用酶联免疫法(IL-5试剂盒由美国Biosource公司提供，灵敏度35 ng/L，测定范围35～750 ng/L；SIL-2R试剂盒由白求恩医科大学免疫教研室提供)。操作按说明进行。

　　1.2.4　血清ECP浓度检测　采用荧光免疫法，用Pharmacia CAP变应原检测系统(Kabi pharmacia，瑞典，灵敏度2 μg/L，测定范围2～200 μg/L)检测。操作按说明进行。

　　1.2.5　统计学处理　采用t检验、秩和检验和直线相关分析。

　　2　结果

　　2.1　外周血白细胞数　正常对照组外周血白细胞总数(6.06±1.29)×10⁹/L与哮喘组外周血白细胞总数(6.42±1.18)×10⁹/L无显著差异(P＞0.05)。但哮喘组Eo数(0.23±0.16)×10⁹/L明显高于正常组(0.17±0.11)×10⁹/L(P＜0.05)。

　　2.2　哮喘组血清IL-5浓度　30例哮喘患者中22例血清IL-5浓度在35 ng/L以上，中位值浓度89(35～380) ng/L，正常对照组血清IL-5浓度均在35 ng/L以下，差异有显著性(P＜0.01)。

　　2.3　哮喘组血清SIL-2R和ECP浓度　哮喘组血清SIL-2R浓度为268.5±73.7 u/ml，明显高于正常对照组138.5±55.3 U/ml，P＜0.01。哮喘组血清ECP浓度14.4±11.8 ug/L也明显高于正常对照组5.6±4.8 μg/L，P＜0.01。

　　2.4　各参数间的相关分析　哮喘组血清IL-5浓度外周血Eo数显著相关(r=0.49，P＜0.05)；血清IL-5与SIL-2R浓度显著相关(r=0.50,P＜0.05)；血清IL-5与ECP浓度亦显著相关(r=0.53，P＜0.05)；而血清SIL-2R与ECP浓度也显著相关(r=0.46，P＜0.05)。血清IL-5、SIL-2R和ECP浓度与FEV₁%均呈显著负相关(r=-0.52,-0.42,-0.48,P均＜0.05)。

　　3　讨论

　　气道炎症是哮喘的病理基础，T淋巴细胞活化和Eo聚集是气道炎症的特征性改变。活化的T淋巴细胞及释放的细胞因子在哮喘发病中起核心作用，SIL-2R是激活的T淋巴细胞膜上IL-2Rα链上脱落的45 KD糖蛋白，是体内T淋巴细胞活化的标志^［2］。SIL-2R水平升高反映机体免疫功能异常状态并与疾病的发生直接相关。本实验结果显示，发作期哮喘患者血清SIL-2R水平明显高于正常人，提示发作期哮喘患者体内T淋巴细胞处于高度激活状态。

　　IL-5是由激活的T淋巴细胞所分泌的在哮喘炎症发生过程中起关键作用的细胞因子。它促进Eo趋化、募集、激活、诱导活性氧的产生及脱颗粒释放ECP等多种毒性蛋白，增强其抗体依赖的细胞毒性作用并延长其生命，是Eo聚集和激活的主要因子^［3］。本实验结果显示急性发作期哮喘患者血清IL-5水平显著高于正常人，与Walker等^［4］认为IL-4、IL-5水平升高是变态反应性哮喘的特征之一的观点一致。血清IL-5水平升高与外周血Eo数和血清ECP浓度升高呈显著正相关；与反映气流阻塞程度的FEV₁%呈显著负相关。表明激活的T淋巴细胞可能通过释放细胞因子，促进Eo的增殖、活化、释放ECP等毒性蛋白，造成气道上皮损伤，支气管痉挛，导致气道高反应性和通气功能障碍。

　　Eo浸润是哮喘气道炎症区别于其它炎症性疾病的一个最显著的病理生理特征。Eo被抗原激活后可释放多种毒性颗粒蛋白，其中ECP是一种对呼吸道上皮有直接破坏作用的毒性蛋白。在哮喘发病中，ECP诱导肥大细胞和Eo释放组胺，导致气道平滑肌痉挛，粘膜水肿等变态反应性病理改变^［5］。此外，ECP还可引起气道上皮和肺组织的广泛损伤，气道上皮剥脱或气道内粘液栓形成，产生气道高反应性和通气功能障碍^［6］。本实验结果表明，发作期哮喘患者血清ECP明显高于正常人且与FEV₁%呈负相关，表明ECP是Eo激活和反映气道炎症程度的指标。

　　SIL-2R和ECP分别是T淋巴细胞和Eo活化的标志，IL-5是主要由活化T淋巴细胞释放的细胞因子，哮喘的许多症状是由它们引起的。目前常规方法无法客观地检测肺内炎症状态，而临床评估既困难又常受用药及其它因素的干扰，而血清SIL-2R、IL-5和ECP测定安全、敏感、特异，故可广泛用于临床评估病情，指导治疗和评价疗效。

　　本课题受全军医药卫生科研基金资助

　　参考文献

　　［1］中华医学会呼吸病学会哮喘组.支气管哮喘的定义、诊断、严重程度分级及疗效判断标准(修正方案).中华结核和呼吸杂志，1993，16(哮喘增刊)：5.

　　［2］Frew AJ,Dasmahaptra J.The role of T lymphocytes in allergic airway disease. Thorax,1995,50:919.

　　［3］Frew AJ,Kay AB.Eosinophils and T-lymphocytes in late-phase allergic reaction.J Allergy Clin Immunol,1990,85:533.

　　［4］Walker C,Bode E,Boer L,et al.Allergic and nonallergic asthmaics have distinct patterns of T-cell activation and cytokine production in peripheral blood and bronchoalveolar lavage.Am Rew Respir Dis,1992,146:109.

　　［5］Kay AB.Asthma and inflammation.J Allergy Clin Immunol,1991,87:893.

　　［6］Holgate ST,Roche WR,Church MK.The role of the eosimophil in asthma.Am Rev respir Dis,1991,143:s66.

收稿：1998-08-06修回：1999-02-11