原位杂交方法检测膀胱癌细胞的凋亡及其临床意义

中华泌尿外科杂志 1999年第4期第20卷 论著摘要

作者：王建宇　崔　周煜　吴明明　虞颂庭

单位：王建宇　崔　周煜　吴明明　虞颂庭（300052 天津医科大学总医院泌尿外科）

　　采用核酸原位杂交方法观察膀胱癌细胞凋亡与肿瘤分级、分期的关系，及对膀胱癌预后和治疗的意义。

　　材料与方法　45例标本取自我院泌尿外科1994～1996年经手术切除,病理确诊为膀胱癌的病人。男34例,女11例,年龄45～74岁,平均(62±6)岁。其中移行细胞癌33例，腺癌7例，鳞癌5例。另取正常膀胱粘膜组织4例作对照。膀胱移行细胞癌病理分级：Ⅰ级7例，Ⅱ级15例，Ⅲ级11例。临床分期：Tis～T₁12例，T₂～T₄21例。末端标记核酸原位杂交（ISEL）采用美国产原位细胞凋亡检测试剂盒。在病理切片上，用荧光素修饰的核苷酸标记DNA 3′-OH,再与碱性磷酸酶结合的抗荧光素抗体特异性识别并结合，以不含TdT的试剂为阴性对照。在400倍光镜下，随机选择视野并计数1 000个肿瘤细胞，记录凋亡细胞，计算细胞凋亡指数（ AI）。AI=( 凋亡细胞数/1 000)×100% 。检测结果经统计学t检验。

　　结　果　　膀胱癌中的凋亡细胞经ISEL法着色，典型者为在肿瘤组织中散在分布蓝色颗粒的细胞。45例标本中，凋亡细胞的范围为0～26个／1 000。AI小于0.5％者23例，0.5%～0.9%者8例，1.0%～1.1％者6例，AI大于1.5％者8例。对比33例移行细胞癌与正常移行上皮细胞AI，肿瘤组明显增高，二者差异有显著性（P＜0.01）。在33例移行细胞癌中，凋亡指数随病理分级的增高而增高，Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ级之间差异有显著性（P＜0.05）。不同组织类型膀胱肿瘤的凋亡指数不同，腺癌和鳞癌的凋亡指数较移行细胞癌高，差异有显著性(P＜0.05)。而腺癌与鳞癌之间的凋亡指数差异无显著性( P＜0.05)。

　　讨　论　本研究检测到膀胱移行细胞癌的凋亡指数较正常移行上皮明显增高，随着恶性程度的增高其凋亡指数也增加，因此细胞凋亡程度与组织增生能力相一致，可作为反映其增生潜能的标志之一。膀胱移行细胞癌中细胞凋亡指数随病理分级升高而增高，提示膀胱肿瘤细胞凋亡指数与膀胱肿瘤的预后密切相关。

　　本组表浅性膀胱肿瘤的凋亡指数显著高于浸润性肿瘤，说明在相对早期的膀胱移行细胞癌中，凋亡发生是广泛的，可以暂时地抵销细胞的过度增生，使组织重新恢复平衡。因此，在肿瘤由表浅性向浸润性发展的过程中，细胞凋亡起到屏障作用^［1］。

　　在不同的膀胱肿瘤细胞类型中，凋亡指数亦不同。此结果可能是细胞本身内在因素决定的，也可能是各组例数相差悬殊造成的。本研究结果提示：检测膀胱癌细胞凋亡指数可作为判定膀胱癌恶性程度的新指标，对膀胱癌的治疗和预后有一定意义。

　　参考文献

　　[1]　Maokoto I,Yasuo T,Makato S,et al. Apoptosis of colon cancers assessed by in situ DNA nick end-labeling method. Pathology International, 1996,46∶33-37.

(收稿：1998-10-12　修回：1999-01-18)