强肝丸C抗鸭乙型肝炎病毒的动物实验研究

　　强肝丸C是以中草药叶下珠为主，黄芪等药为辅的中药方剂。近年来，国内外研究证实叶下珠有较强的抗乙型肝炎病毒作用，其抗病毒机制目前尚不清楚。本研究观察了强肝丸C、肝得健在体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用。

　　材料与方法

　　1．动物模型：采用健康成年的重庆麻鸭产的蛋孵化的1日龄雏鸭,经腹腔接种0.1ml DHBV DNA阳性的血清。接种1周后,分别颈外静脉抽血,用地高辛标记的DHBV DNA探针经斑点杂交检测筛选出感染阳性鸭作为实验动物。

　　2．实验分组及用药方法：将DHBV DNA阳性的1月龄鸭55只分为7组，病毒对照组，用生理盐水，于每日清晨腹腔注射,剂量为1ml·kg^-1·d^-1；阳性药物对照组,用阿昔洛韦(湖北潜江市制药厂出品,批号04100302)每日腹腔注射1次,剂量为100mg·kg^-1·d^-1；强肝丸C小剂量组,剂量为150mg·kg^-1·d^-1；强肝丸C中剂量组,剂量为750mg·kg^-1·d^-1；强肝丸C大剂量组,剂量为5000mg·kg^-1·d^-1；肝得健小剂量组，剂量为1500mg·kg^-1·d^-1；肝得健大剂量组，剂量为3000mg·kg^-1·d^-1。强肝丸C由重庆江北石门医院提供,肝得健为法国罗纳普朗克公司出品。于每日清晨空腹灌服。实验用药时间为1月。

　　3．观察指标：（1）血清DHBV DNA改变情况：于用药前、用药2周、用药1月、停药1周分别颈外静脉抽血,分离血清于-20℃保存待检。采用斑点杂交法,用地高辛探针将用药前后的血清统一对比检测，以与探针同源的质粒DNA倍比稀释后点样于硝酸纤维薄膜上杂交显示的斑点颜色深浅为标准,与待检血清斑点杂交斑点颜色深浅比较来半定量。（2）肝脏病理检查：于停药后1周将实验动物分别剖杀,取小块肝组织固定于10%甲醛溶液,作常规HE染色病理检查。(3)肝功能检查：各组于用药1月、停药1周分别抽血检测鸭血清中ALT的变化情况。统计学处理用t检验。

　　结果：1．用药前、中、后血清DHBV DNA改变情况：各实验组仅阳性药物对照组、强肝丸C大、中、小剂量组用药1月有血清病毒DNA明显降低，且阳性药物对照组用药2周就有DHBV DNA显著降低，但停药后有DNA回升现象，而强肝丸C停药后无DNA回升现象。2. 肝脏HE染色病理检查：各组均有不同程度肝细胞空泡变性、肿胀、嗜酸性变，部份可见小叶间隔及汇管区炎症细胞浸润、点状坏死，强肝丸C、肝得健用药组较病毒对照组轻。3.用药1月、停药1周血清ALT改变情况：各用药组与病毒对照组相比，用药1月、停药1周血清ALT有下降趋势，但仅强肝丸C大剂量组差异有显著意义（P＜0.05）。

　　讨论：我们应用1d龄雏鸭经腹腔感染DHBV而建立的重庆麻鸭乙型肝炎动物模型进行强肝丸C以及保肝药肝得健抗病毒作用的研究,为临床治疗肝炎病人提供临床前研究资料。实验结果表明:强肝丸C用药1月后DNA明显降低，停药1周后无DHBV DNA回升现象，其抗病毒效果与剂量大小无明显关系。但大剂量强肝丸C有明显降低ALT的作用。

齐珍元 郭树华 陈压西

作者单位：400010 重庆医科大学病毒性肝炎研究所

齐珍元 女，46岁，技师。