雌激素试验一般多在黄体酮试验未引起撤药性出血的患者进行，方法是每日口服己烯雌酚1mg，连服21日。如停药后3～8日内出现撤药性出血，表明子宫内膜对雌激素有生理性增殖反应。相反，如无撤药性出血则表明子宫内膜已遭严重损坏或内膜缺如(子宫性闭经)。
上述是理论上的雌激素试验，但有时单用雌激素不一定引起撤药性出血，故临床上常在口服21日己烯雌酚的最后4日每日加肌肉注射黄体酮20mg，停药3～8日内多可出现撤药性出血。这种方法实际上为人工周期治疗(试验)，有别于单用黄体酮作试验。
雌激素试验阳性表明子宫内膜对雌激素有反应，病因不在子宫。阴性表明子宫内膜萎缩或先天性内膜缺如，为子宫性闭经。
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